發(fā)布時(shí)間：2021-05-18 07:57

　　背景:膽管癌約占消化系統(tǒng)腫瘤中的3%,近年發(fā)病率呈上升趨勢,其死亡率高,5年生存率低。由于膽管癌早期癥狀不明顯,發(fā)現(xiàn)多已是晚期,手術(shù)治療效果欠佳,且缺乏有效化療方案,故從中醫(yī)中藥角度尋求新的治療方法和藥物引起學(xué)者們的廣泛關(guān)注。龍葵為茄科茄屬植物（SolanumnigrumL）,具有清解熱毒、消腫散結(jié)、消炎利尿的傳統(tǒng)中醫(yī)功效。近年來龍葵對惡性腫瘤的治療作用引起了人們的關(guān)注,被列為十大抗腫瘤中草藥之一。不少研究表明龍葵中含有多種具有抗腫瘤作用的活性成分,其中澳洲茄邊堿作為龍葵的主要活性成分,抗癌作用得到了肯定。但其發(fā)揮的作用機(jī)制尚不十分清楚。本課題將從細(xì)胞生物學(xué)角度探討澳洲茄邊堿對人膽管癌細(xì)胞的促進(jìn)凋亡、抑制增殖和轉(zhuǎn)移作用,以期解釋龍葵抗膽管細(xì)胞癌的部分作用機(jī)制,并為臨床應(yīng)用提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的:探討龍葵提取物澳洲茄邊堿對人膽管癌細(xì)胞的促進(jìn)凋亡、抑制增殖和轉(zhuǎn)移作用及其機(jī)制。方法:①采用0,2,4,6,8,10 μM濃度的澳洲茄邊堿處理對數(shù)生長期人膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞株后,用倒置光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目、細(xì)胞形態(tài)的變化;MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率,選擇最佳藥物作用時(shí)間及藥物濃度,探... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 理論研究
    1 膽管癌診治的相關(guān)理論概述
        1.1 膽管癌的流行病學(xué)
        1.2 膽管癌的危險(xiǎn)因素及發(fā)病機(jī)制
        1.3 膽管癌的分型與分期
        1.4 膽管癌的診斷與治療現(xiàn)狀
        1.5 膽管癌治療瓶頸問題及展望
    2 凋亡蛋白與膽管癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性
        2.1 Bcl-2和Bax與膽管癌
        2.2 Caspase與膽管癌
        2.3 XIAP與膽管癌
        2.4 PARP與膽管癌
    3 EMT與膽管癌侵襲和轉(zhuǎn)移
        3.1 EMT相關(guān)分子標(biāo)志物與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移
        3.2 PI3K/AKT信號通路軸與膽管癌侵襲轉(zhuǎn)移
    4 中醫(yī)藥對膽管癌的相關(guān)認(rèn)識
        4.1 中醫(yī)藥對膽管癌病因病機(jī)的認(rèn)識
        4.2 中醫(yī)藥對膽管癌的證治近況
    5 龍葵及其提取物澳洲茄邊堿抗腫瘤作用
    參考文獻(xiàn)
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
    1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 藥物
        2.2 細(xì)胞株
        2.3 試劑及溶液配制
        2.4 儀器及耗材
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 細(xì)胞復(fù)蘇、凍存、傳代與培養(yǎng)
        3.2 細(xì)胞活力測定實(shí)驗(yàn)
        3.3 流式細(xì)胞術(shù)
        3.4 劃痕實(shí)驗(yàn)
        3.5 Transwell實(shí)驗(yàn)
        3.6 線粒體膜電位的檢測
        3.7 Q-PCR檢測相關(guān)蛋白mRNA的表達(dá)
        3.8 Western blotting檢測
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 澳洲茄邊堿對人膽管癌細(xì)胞QBC939增殖的影響
        4.2 澳洲茄邊堿誘導(dǎo)人膽管癌細(xì)胞株QBC939凋亡
        4.3 澳洲茄邊堿誘導(dǎo)膽管癌人QBC939細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制
        4.4 澳洲茄邊堿抑制人膽管癌細(xì)胞株QBC939轉(zhuǎn)移
    5 討論
        5.1 中藥龍葵對膽管癌具有一定的療效作用
        5.2 澳洲茄邊堿具有抑制人膽管癌QBC939增殖,促進(jìn)凋亡作用分析
        5.3 澳洲茄邊堿阻斷人膽管癌QBC939細(xì)胞EMT過程,抑制轉(zhuǎn)移作用及機(jī)制闡述
    參考文獻(xiàn)
結(jié)語
附錄一 英文縮略詞表
附錄二 綜述一
    參考文獻(xiàn)
附錄三 綜述二
作者簡介
攻讀博士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]葛根素對人膽管癌QBC939細(xì)胞生長抑制的影響[J]. 于國秀,李貴新,代一佳,李潔旭.  濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(05)
[2]徐振曄辨治肝內(nèi)膽管癌1則[J]. 羅琴琴,王立芳,徐振曄.  江蘇中醫(yī)藥. 2017(02)
[3]膽管癌圍手術(shù)期的中醫(yī)藥治療[J]. 馬宏波,藺濤,劉秀妃.  亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2016(21)
[4]澳洲茄邊堿通過Caspase3蛋白誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞的凋亡作用[J]. 李俊,熊峰.  氨基酸和生物資源. 2016(03)
[5]胃癌組織中LMO1與Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白表達(dá)的關(guān)系及意義[J]. 孫云,胡曉杰,馬國娟,尹香云,彭彥輝.  腫瘤學(xué)雜志. 2016(09)
[6]膽管癌患者癌組織與血清中XIAP、SMAC水平的變化及其臨床意義[J]. 陳雷,尚培中.  中國普通外科雜志. 2016(09)
[7]經(jīng)內(nèi)鏡膽道支架置入術(shù)在肝門部膽管癌姑息性治療中應(yīng)用優(yōu)劣勢分析[J]. 黃磊,施兆發(fā),王路兵,黃俠.  湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(03)
[8]25例膽管癌的證候分析[J]. 李靈常,畢蕾.  中國農(nóng)村衛(wèi)生. 2016(10)
[9]膽囊癌與膽管癌中藥組方規(guī)律關(guān)聯(lián)規(guī)則與療效分析[J]. 李佳麗,朱慧,牛靜秀,邴琳,蔡玉梅,崔宇,張文華,尹曉東,應(yīng)簡子,龐雁.  中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志. 2016(02)
[10]Prognostic factors and long-term outcomes of hilar cholangiocarcinoma:A single-institution experience in China[J]. Hai-Jie Hu,Hui Mao,Anuj Shrestha,Yong-Qiong Tan,Wen-Jie Ma,Qin Yang,Jun-Ke Wang,Nan-Sheng Cheng,Fu-Yu Li.  World Journal of Gastroenterology. 2016(08)

碩士論文
[1]HMME聯(lián)合He-Ne激光對犬乳腺腫瘤細(xì)胞線粒體膜電位和ATP酶的影響[D]. 李華濤.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



本文編號：3193441