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基于Notch/Treg和ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路cross-talk研究中藥新風(fēng)膠囊改善AA大鼠肺功能的機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-05-13 13:01
  1目的在新安醫(yī)學(xué)“從脾治痹”、“健脾化濕通絡(luò)法”理論指導(dǎo)下,擬用佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠為模型,深入研究類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎免疫炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激狀態(tài)、肺功能的變化及益氣健脾通絡(luò)中藥復(fù)方新風(fēng)膠囊(Xinfeng Capsule,XFC)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎肺病的調(diào)節(jié)機(jī)制,探討新風(fēng)膠囊治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的免疫學(xué)機(jī)制。探討Notch/Treg和ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路的cross talk在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)肺間質(zhì)病變中的作用,為中醫(yī)藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,提供理論依據(jù)。2研究背景RA肺功能下降與Notch信號(hào)通路調(diào)控的,如調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)等,免疫效應(yīng)細(xì)胞的分化和發(fā)育相關(guān),直接參與的組織纖維化過程。同時(shí),因機(jī)體免疫紊亂而誘發(fā)的氧自由基,如活性氧(ROS)等,介導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷也參與這一過程。Notch/Treg信號(hào)通路激活,可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者肺功能降低,ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路過激活,致氧化應(yīng)激損傷也影響肺功能。而兩者間存在的“串話”可能是導(dǎo)致RA及其肺功能降低的機(jī)制之一。新安醫(yī)家通過長(zhǎng)期臨床實(shí)踐總結(jié),在治療痹證方面,辨治時(shí)尤重脾胃,摸索總結(jié)出... 

【文章來(lái)源】:安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】:124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
前言
第一部分 RA肺功能降低的國(guó)內(nèi)外研究概況
    1 RA肺功能降低的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.1 RA患者存在肺功能降低
        1.2 Notch/Treg信號(hào)通路表達(dá)異常致使RA免疫炎癥失調(diào)
            1.2.1 Notch信號(hào)通路可調(diào)控Treg表達(dá)
            1.2.2 Treg免疫耐受能力降低可能直接導(dǎo)致免疫炎癥產(chǎn)生
            1.2.3 Notch信號(hào)通路過激活致調(diào)控Treg失衡可能是導(dǎo)致RA肺功能降低的機(jī)制之一
        1.3 ROS介導(dǎo)的PKC/NF-κB通路表達(dá)異常致使RA氧化應(yīng)激失衡
            1.3.1 ROS介導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷可導(dǎo)致氧化應(yīng)激失衡
            1.3.2 ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路可調(diào)控氧化應(yīng)激反應(yīng)
            1.3.3 ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路過激活致氧化應(yīng)激失衡可能是導(dǎo)致RA肺功能降低的機(jī)制之一
        1.4 Notch/Treg和ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路Cross-talk可能是RA肺功能降低的重要因素
    2 RA肺功能降低的中醫(yī)病機(jī)分析
        2.1“從脾治痹”理論溯源
        2.2“脾虛濕盛,氣血虧虛,痰瘀互結(jié)”是痹證的重要證候特征
        2.3“脾虛濕盛、痰瘀阻肺”是痹證相關(guān)肺病的重要病機(jī)特點(diǎn)
        2.4“益氣健脾、化濕通絡(luò)、培土生金”是痹證相關(guān)肺病的重要治療手段
    3. 現(xiàn)代中醫(yī)對(duì)RA肺功能降低的機(jī)制研究
        3.1 臨床實(shí)驗(yàn)研究
        3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
    參考文獻(xiàn)
第二部分 RA肺功能降低的實(shí)驗(yàn)研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 藥品及試劑
            1.2.1 藥品
            1.2.2 主要試劑
            1.2.3 主要儀器設(shè)備:
        1.3 方法
            1.3.1 動(dòng)物模型復(fù)制及給藥
            1.3.2 大鼠足跖腫脹度、關(guān)節(jié)炎指數(shù)的測(cè)算
            1.3.3 肺功能檢測(cè)
            1.3.4 關(guān)節(jié)及肺臟病理觀察
            1.3.5 ELISA法檢測(cè)大鼠血清NO、iNOS、HIF-1、NADPH等氧化應(yīng)激指標(biāo)的表達(dá)
            1.3.6 ELISA法檢測(cè)大鼠血清IL-6、IL-10、IL-17、IL-35、MMP-9、Rantes等細(xì)胞因子的表達(dá)
            1.3.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)大鼠外周血CD4~+CD25~+Notch1~+Treg, CD4~+CD25~+Notch3~+Treg.
            1.3.8 免疫組化法檢測(cè)AA大鼠肺組織CD4、FoxP3、PKC、NF-κB表達(dá)
            1.3.9 熒光定量PCR法檢測(cè)大鼠肺組織Notch1、delta1、HES1mRNA
            1.3.10 Western blot法檢測(cè)大鼠肺組織Notch4、Jagged1、Jagged2蛋白表達(dá)
            1.3.11 熒光定量PCR法檢測(cè)大鼠肺組織Rac-1、PKC、NF-κB mRNA
            1.3.12 Western blot法檢測(cè)大鼠肺組織Rac-1、PKC、NF-κB蛋白表達(dá)
        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2 研究結(jié)果
        2.1 AA大鼠關(guān)節(jié)癥狀、肺功能及新風(fēng)膠囊對(duì)其的影響
            2.1.1 AA大鼠體質(zhì)量、足趾腫脹度和AI變化及XFC對(duì)其影響
            2.1.2 AA大鼠肺功能變化及XFC對(duì)其影響
            2.1.3 AA大鼠關(guān)節(jié)病理形態(tài)學(xué)變化及XFC對(duì)其影響
            2.1.4 AA大鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)變化及XFC對(duì)其影響
        2.2 AA大鼠外周血細(xì)胞因子、氧化應(yīng)激指標(biāo)變化及新風(fēng)膠囊對(duì)其的影響
            2.2.1 XFC對(duì)AA大鼠外周血細(xì)胞因子的影響
            2.2.2 XFC對(duì)AA大鼠外周血NO、iNOS、HIF-1、NADPH影響
            2.2.3 XFC對(duì)AA大鼠外周血CD4~+CD25~+Notch1~+Treg, CD4~+CD25~+ Notch3~+Treg的影響
        2.3 AA大鼠肺組織Notch/Treg信號(hào)通路變化及新風(fēng)膠囊對(duì)其的影響
            2.3.1 AA大鼠肺組織CD4、FoxP3表達(dá)變化及XFC的影響
            2.3.2 AA大鼠肺組織Notch相關(guān)基因表達(dá)變化及XFC的影響
            2.3.3 AA大鼠肺組織Notch相關(guān)蛋白表達(dá)變化及XFC的影響
        2.4 AA大鼠肺組織ROS-PKC/NF-κB通路變化及新風(fēng)膠囊對(duì)其的影響
            2.4.1 AA大鼠肺組織PKC、NF-kB表達(dá)變化及XFC的影響
            2.4.2 AA大鼠肺組織Rac-1、PKC、NF-κBmRNA的表達(dá)及XFC的影響
            2.4.3 AA大鼠肺組織Rac-1、PKC、NF-κB蛋白的表達(dá)及XFC的影響
        2.5 AA大鼠肺組織Notch/Treg信號(hào)通路和ROS-PKC/NF-κB通路與肺功能參數(shù)的關(guān)系
            2.5.1 AA大鼠肺功能參數(shù)與肺組織Notch/Treg通路的關(guān)系
            2.5.2 AA大鼠肺功能參數(shù)與肺組織ROS-PKC/NF-κB通路的關(guān)系
            2.5.3 AA大鼠肺組織Notch和ROS通路的關(guān)系
    討論
        1 實(shí)驗(yàn)?zāi)P秃蛯?duì)照藥物的選擇
        2 主要指標(biāo)的選擇意義
            2.1 大鼠肺功能參數(shù)
            2.2 大鼠Notch信號(hào)通路相關(guān)指標(biāo)
            2.3 大鼠外周血細(xì)胞因子
            2.4 大鼠ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)指標(biāo)
            2.5 大鼠外周血氧化應(yīng)激指標(biāo)
        3 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠肺功能的療效和機(jī)制分析
            3.1 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠體質(zhì)量、關(guān)節(jié)和肺功能
            3.2 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠細(xì)胞因子及氧化應(yīng)激指標(biāo)
            3.3 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠Notch/Treg信號(hào)通路
            3.4 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路
            3.5 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠Notch/Treg通路和ROS-PKC/NF-κB通路的Crosstalk
        4 新風(fēng)膠囊調(diào)節(jié)AA大鼠肺功能的機(jī)制探討
            4.1 整體調(diào)節(jié)免疫功能,改善肺組織病理?yè)p傷
            4.2 增強(qiáng)抗氧化能力,清除氧自由基,減輕肺組織氧化損傷
            4.3 平衡細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò),緩解炎癥,減輕肺組織免疫炎癥
            4.4 基于Notch/Treg和ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路的串話改善肺功能
    結(jié)論
        1 新風(fēng)膠囊能緩解關(guān)節(jié)炎癥,改善肺功能參數(shù)
        2 新風(fēng)膠囊能改善肺組織病理學(xué)變化
        3 新風(fēng)膠囊能平衡氧化與抗氧化,減輕氧化應(yīng)激損傷,從而改善肺功能
        4 新風(fēng)膠囊能平衡細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò),減輕免疫炎癥損傷,從而改善肺功能
        5 新風(fēng)膠囊能調(diào)節(jié)Notch/Treg信號(hào)通路和ROS-PKC/NF-κB信號(hào)通路的crosstalk,調(diào)節(jié)效應(yīng)免疫細(xì)胞,從而改善肺功能
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]新風(fēng)膠囊對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者肺功能的影響[J]. 孫玥,劉健,萬(wàn)磊.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2016(07)
[3]新風(fēng)膠囊通過調(diào)節(jié)Keapl-Nrf2/ARE信號(hào)通路改善佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠肺功能研究[J]. 孫玥,劉健,萬(wàn)磊,王芳,齊亞軍,鄭力.  中華中醫(yī)藥雜志. 2016(05)
[4]Improving Effects of Astragalus Polysaccharides on Cardiac Function via Keap1/Nrf2-ARE Signal Pathway in Adjuvant Arthritis Rats[J]. Yue Sun,Jian Liu,Lei Wan,Fang Wang,Xiao-jun Zhang,Ya-jun Qi.  Chinese Herbal Medicines. 2016(02)
[5]基于“性味理論”探討雷公藤配伍減生殖毒性的研究進(jìn)展[J]. 許坡,孟楣,張靜,唐利宇,江瑩,王芳,張賀.  中國(guó)藥房. 2016(10)
[6]黃芪甲苷抑制慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá)[J]. 蔣洪強(qiáng),張金國(guó).  新醫(yī)學(xué). 2016(01)
[7]佐劑關(guān)節(jié)炎大鼠心臟病變與TLR4/NF-κB信號(hào)通路活化有關(guān)[J]. 汪元,劉健,黃傳兵,萬(wàn)磊,曹云祥,王亞黎,孫玥.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(11)
[8]雷公藤甲素對(duì)佐劑關(guān)節(jié)炎肺功能降低大鼠Notch通路受體和配體基因表達(dá)的影響[J]. 萬(wàn)磊,劉健,黃傳兵,諶曦,汪元,張皖東,劉磊,程園園,馮云霞.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(10)
[9]Efficacy and safety of Xinfeng capsule in patients with rheumatoid arthritis:a multi-center parallel-group double-blind randomized controlled trial[J]. Liu Jian,Wang Yuan,Huang Chuanbing,Xu Jianhua,Li Zhijun,Xu Liang,He Liyun,Sun Yue,Wang Yali,Xu Shengqian,Zhao Ping,Mao Tongjun,Tan Bin,Zhu Fubing,Zhang Pingheng,Fang Li.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2015(05)
[10]活性氧介導(dǎo)氧化應(yīng)激在心血管應(yīng)激及運(yùn)動(dòng)中對(duì)心肌線粒體和自噬作用的新進(jìn)展[J]. 原陽(yáng),潘珊珊.  體育科學(xué). 2015(05)

碩士論文
[1]基于Keap1-Nrf2/ARE信號(hào)通路探討中藥新風(fēng)膠囊改善類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎心肺功能的機(jī)制研究[D]. 孫玥.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[2]線粒體氧化應(yīng)激信號(hào)通路參與缺糖缺氧誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡調(diào)控機(jī)制研究[D]. 劉璐璐.浙江大學(xué) 2010



本文編號(hào):3184064

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