酒精是繼肝炎病毒之后導致肝損害的第二大誘因,開發(fā)安全有效的藥物對酒精肝損傷的預防與治療具有重要意義。粗毛纖孔菌是一種珍貴的藥用真菌,在民間常用于治療各種肝病、胃病等,然而這些功效大多缺乏系統(tǒng)的實驗數(shù)據(jù)來支撐,這在很大程度上限制了該菌的進一步開發(fā)和利用。多糖是粗毛纖孔菌的主要活性成分之一,在其生物活性上發(fā)揮著重要作用,但粗毛纖孔菌子實體一年生,難以快速并大量地獲取,而液體發(fā)酵技術能夠快速大量生產(chǎn)多糖物質,易于實現(xiàn)工業(yè)化。為促進粗毛纖孔菌的開發(fā)利用,本研究先對1株寄生于棗樹的疑似粗毛纖孔菌的菌株進行種屬鑒定,然后分析了粗毛纖孔菌液體發(fā)酵胞外多糖對小鼠酒精肝損傷的保護作用及藥理作用機制,在明確粗毛纖孔菌胞外多糖具有改善酒精肝損傷活性后,進一步優(yōu)化了粗毛纖孔菌胞外多糖發(fā)酵工藝。主要研究內容與結果如下:（1）通過形態(tài)學特征和ITS20rDNA序列分析,對寄生棗樹的野生疑似粗毛纖孔菌菌株進行鑒定;基于ITS1-5.8S-ITS2序列的長度、堿基構成和變異程度,對粗毛纖孔菌遺傳多樣性進行分析。研究結果表明,該野生菌株為粗毛纖孔菌（Inonotus20hispidus）,其在自然界中具有豐富的遺傳多樣... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學福建省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1 課題研究背景及意義
    2 粗毛纖孔菌概述
    3 粗毛纖孔菌多糖藥理活性研究進展
    4 酒精肝損傷概述
    5 藥用真菌多糖對酒精肝損傷的保護作用研究進展
    6 研究目標、研究內容和研究技術路線
        6.1 研究目標
        6.2 研究內容
        6.3 研究技術路線
第二章 寄生棗樹的野生粗毛纖孔菌的鑒定
    1 實驗材料、試劑和儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 主要儀器與試劑
    2 實驗方法
        2.1 野生菌株的分離
        2.2 菌株的形態(tài)學鑒定
        2.3 菌株的分子鑒定
        2.4 粗毛纖孔菌遺傳多樣性分析
        2.5 數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結果與分析
        3.1 野生菌株的形態(tài)學鑒定
        3.2 野生菌株的分子鑒定
        3.3 粗毛纖孔菌遺傳多樣性分析
    4 討論與小結
        4.1 討論
        4.2 小結
第三章 粗毛纖孔菌胞外多糖的分離純化及其理化性質
    1 實驗材料、試劑和儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 主要儀器與試劑
    2 實驗方法
        2.1 粗毛纖孔菌胞外粗多糖的制備
        2.2 粗毛纖孔菌胞外粗多糖的分離純化
        2.3 IHEPS多糖含量測定
        2.4 IHEPS蛋白含量測定
        2.5 IHEPS紫外-可見吸收光譜測定
        2.6 IHEPS紅外吸收光譜測定
        2.7 IHEPS單糖組成測定
        2.8 數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結果與分析
        3.1 粗毛纖孔菌胞外粗多糖分離純化
        3.2 IHEPS多糖及蛋白含量
        3.3 IHEPS紫外-可見光吸收光譜
        3.4 IHEPS紅外吸收光譜
        3.5 IHEPS單糖組成
    4 討論與小結
        4.1 討論
        4.2 小結
第四章 IHEPS對小鼠酒精肝損傷的保護作用
    1 實驗材料、試劑和儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 主要儀器與試劑
    2 實驗方法
        2.1 動物分組與處理
        2.2 小鼠醉酒與醒酒時間測定
        2.3 小鼠肝指數(shù)測定
        2.4 小鼠血清AST和 ALT指標的測定
        2.5 小鼠肝臟ADH、CAT、SOD和 MDA指標的測定
        2.6 肝臟病理組織學分析
        2.7 實時熒光定量PCR測定肝組織mRNA的轉錄水平
        2.8 數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結果與分析
        3.1 IHEPS對小鼠醉酒、醒酒時間的影響
        3.2 IHEPS對小鼠肝指數(shù)的影響
        3.3 IHEPS對小鼠血清AST、ALT活力的影響
        3.4 IHEPS對小鼠肝ADH、CAT、SOD和 MDA活力的影響
        3.5 IHEPS對小鼠肝臟組織形態(tài)學的影響
        3.6 Nrf2 介導的抗氧化信號通路mRNA的轉錄水平
    4 討論與小結
        4.1 討論
        4.2 小結
第五章 粗毛纖孔菌胞外多糖液體發(fā)酵工藝優(yōu)化
    1 實驗材料、試劑和儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 主要儀器與試劑
    2 實驗方法
        2.1 發(fā)酵液胞外多糖含量的測定
        2.2 扁桃斑鳩菊粉末及其發(fā)酵基礎培養(yǎng)基制備
        2.3 粗毛纖孔菌液體菌種制備
        2.4 扁桃斑鳩菊葉對粗毛纖孔菌胞外多糖產(chǎn)量的影響
        2.5 單因素實驗
        2.6 正交優(yōu)化實驗
        2.7 胞外多糖紅外光譜分析
        2.8 胞外多糖抗氧化活性分析
        2.9 數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結果與分析
        3.1 扁桃斑鳩菊葉對粗毛纖孔菌胞外多糖產(chǎn)量的影響
        3.2 單因素實驗結果
        3.3 正交優(yōu)化實驗結果
        3.4 添加扁桃斑鳩菊與未添加扁桃斑鳩菊發(fā)酵胞外多糖產(chǎn)量對比
        3.5 胞外多糖紅外光譜分析
        3.6 胞外多糖抗氧化活性分析
    4 討論與小結
        4.1 討論
        4.2 小結
第六章 總結與展望
    1 總結
        1.1 寄生棗樹的野生粗毛纖孔菌的鑒定
        1.2 粗毛纖孔菌胞外多糖的制備及其理化性質
        1.3 IHEPS對小鼠酒精肝損傷的保護作用
        1.4 粗毛纖孔菌胞外多糖液體發(fā)酵工藝優(yōu)化
    2 本研究特色和創(chuàng)新之處
    3 展望
參考文獻
攻讀學位期間的學術論文與研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]狗肝菜多糖P1D，P2D和P4D的結構分析及其保肝活性初步研究[D]. 許丹華.廣東藥科大學 2016
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[5]羊肚菌與鐵皮石斛原球莖的雙向發(fā)酵[D]. 徐丹丹.大連工業(yè)大學 2015
[6]銅色牛肝菌多糖提取、分離純化及抗氧化性研究[D]. 王心詩.昆明理工大學 2015
[7]電針對急性酒精性肝損傷小鼠肝血流灌注及氧化應激反應的影響研究[D]. 唐麗梅.中國中醫(yī)科學院 2014
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[10]狗肝菜多糖分離純化及保肝作用研究[D]. 趙沁元.廣東藥學院 2013



本文編號：3176464