目的:通過觀察通絡糖泰方對高糖培養(yǎng)的SD大鼠施旺細胞（Schwann Cells,SCs）成髓化的影響,從而證實通絡糖泰可促進髓鞘調控因子的表達,改善糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)生發(fā)展;同時研究高糖缺氧對背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元（dorsal root ganglion neuron,DRGn）培養(yǎng)的最適條件,為糖尿病周圍神經(jīng)病變（Diabetic peripheral neuropathy DPN）的基礎研究提供一定的科學理論依據(jù)。方法:1.選新生3-5d的SD大鼠,取坐骨神經(jīng),原代培養(yǎng)SCs,取第三代生長良好的SCs作為研究對象。用50mM高糖培養(yǎng)72h,建立DPN SCs模型。加入通絡糖泰含藥血清干預,在前期研究的基礎上,通過Western Blot法檢測髓鞘調控因子P0在高糖條件下的SCs 24h、48h、72h三個時間點的表達。2.選新生3d的SD大鼠,取背根神經(jīng)節(jié),原代培養(yǎng)背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元,取生長良好的神經(jīng)元作為研究對象。通過光鏡下觀察細胞形態(tài)、ROS表達法及CCK-8法檢測0、6h、24h時間點不同濃度高糖、缺氧對DRGn的誘導損傷,以期建立DPN背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元模型。結果:1.S-1... 

【文章來源】：成都中醫(yī)藥大學四川省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞
前言
一 通絡糖泰方對高糖培養(yǎng)SD大鼠施旺細胞髓鞘調控因子P0蛋白的影響
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物研究
        1.2 實驗用藥
        1.3 主要實驗試劑及儀器
    2 實驗方法
        2.1 SCs原代培養(yǎng)、純化、傳代及鑒定
        2.2 通絡糖泰含藥血清制備
        2.3 實驗分組
        2.4 Westernblot法測定6組3個復孔培養(yǎng)SCs24h、48h、72h的P0蛋白的表達
        2.5 統(tǒng)計學方法
    3 結果
        3.1 S-100免疫熒光鑒定
        3.2 Westernblot檢測髓鞘調控因子P0的表達
    4 討論
        4.1 SCs原代培養(yǎng)、純化及鑒定方案選擇的依據(jù)
        4.2 選用高糖培養(yǎng)SCs的依據(jù)
        4.3 中醫(yī)學對DPN的認識
        4.4 通絡糖泰方立方依據(jù)
        4.5 中藥血清藥理學
        4.6 通絡糖泰對SD大鼠SCs髓鞘調控因子P0表達的影響
二 高糖缺氧條件下SD大鼠DRGn培養(yǎng)方法研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物研究
        1.2 主要實驗試劑與儀器
    2 實驗方法
        2.1 DRGn的原代培養(yǎng)、純化及鑒定
        2.2 高糖和(或)缺氧終濃度確定
        2.3 ROS檢測方法
        2.4 CCK-8法檢測方法
        2.5 統(tǒng)計分析
    3 結果
        3.1 DRGn形態(tài)學觀察
        3.2 DRGn免疫熒光鑒定
        3.3 高糖缺氧損傷后的細胞形態(tài)學觀察
        3.4 檢測細胞內活性氧(ROS)水平摸索高糖缺氧損傷對DRGn的最適條件
        3.5 CCK-8法摸索高糖缺氧損傷對DRGn活性的最適條件
    5 討論
        5.1 背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元(DRGn)的原代培養(yǎng)、純化及鑒定
        5.2 建立高糖缺氧模型的依據(jù)及結果
        5.3 ROS法檢測依據(jù)
        5.4 CCK-8法檢測依據(jù)
結論
問題與展望
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
附件1


【參考文獻】：
期刊論文
[1]筋脈通含藥血清對高糖培養(yǎng)大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元氧化應激及UCP3、IGF-1表達的影響[J]. 王超,梁曉春,楊丹,吳亞楠.  世界中西醫(yī)結合雜志. 2017(06)
[2]黃芪多糖保護胰島β細胞改善大鼠2型糖尿病[J]. 唐思夢,楊澤民,陳偉強,袁前發(fā),陳思羽,李紅枝.  第二軍醫(yī)大學學報. 2017(04)
[3]“當歸四逆湯”治療寒凝血瘀型糖尿病周圍神經(jīng)病變優(yōu)效性的臨床觀察[J]. 王平,崔鵬,洪楊洋.  中華中醫(yī)藥學刊. 2017(03)
[4]赤芍提取物對早期糖尿病腎病大鼠血糖、血脂及腎功能的影響[J]. 陳焱.  中華中醫(yī)藥學刊. 2017(01)
[5]紅花注射液聯(lián)合依帕司他治療2型糖尿病周圍神經(jīng)病變療效觀察[J]. 劉愛林,袁志軍,趙濤,張皎月.  陜西中醫(yī). 2016(10)
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[7]通絡糖泰方對糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠JNK信號轉導通路及炎性細胞因子的影響[J]. 張翕宇,謝春光,杜聯(lián).  中醫(yī)藥導報. 2016(17)
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[9]小檗堿對高糖培養(yǎng)的背根神經(jīng)節(jié)中疼痛相關因子的影響[J]. 李琰,彭振紅,陳磊.  山西醫(yī)藥雜志. 2016(15)
[10]中藥筋脈通對糖尿病大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元超微結構影響的研究[J]. 楊丹,梁曉春,屈嶺,吳群勵,吳亞楠,石玥,戴威.  環(huán)球中醫(yī)藥. 2016(06)

碩士論文
[1]缺氧誘導因子-1α在2型糖尿病及其周圍神經(jīng)病變中的變化及意義的研究[D]. 唐楓燕.蘇州大學 2013



本文編號：3175087