[實驗背景]骨骼肌萎縮最初是用來描述肌肉組織缺乏的術(shù)語,現(xiàn)在用來描述低肌肉質(zhì)量、力量與功能。骨骼肌的質(zhì)量由蛋白質(zhì)的合成與降解平衡所決定,過多的蛋白質(zhì)降解導(dǎo)致肌肉萎縮,同時增加發(fā)病率與死亡率。然而,在軀體運動過程或者某些病理條件下,骨骼肌容易受到損傷或者代謝過程中發(fā)生障礙。因此,尋找相應(yīng)骨骼肌治療與損失傷修復(fù)的方法,對于維持骨骼肌正常的生理活動,增強骨骼肌相關(guān)的運動機能具有非常重要的臨床意義與理論價值。人參作為一種具有很好醫(yī)學(xué)用途的草藥,在東方醫(yī)學(xué)中被廣泛用于各種疾病的預(yù)防,其主要成分之一人參皂苷Rg1是一種四環(huán)三萜類衍生物。近年來,人參皂苷Rg1經(jīng)常用來預(yù)防和防治相關(guān)疾病,如對抗炎,抗衰老,緩解疲勞等生理作用。多項研究表明,人參皂苷Rg1對人體健康具有重要的生理意義。然而,關(guān)于人參皂苷Rg1在骨骼肌損傷后的修復(fù)作用及相應(yīng)的分子機制卻知之甚少。因此,本實驗以小鼠骨骼肌C2C12細(xì)胞為模型研究Rg1對骨骼肌損傷后的修復(fù)作用及相應(yīng)的分子機制。[實驗方法]以小鼠骨骼肌C2C12細(xì)胞無血清培養(yǎng)組（饑餓處理）作為肌細(xì)胞損傷體外模型,用一定不同濃度的人參皂苷Rg1進行細(xì)胞孵育。通過顯微拍照、細(xì)胞計數(shù)... 

【文章來源】：東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 骨骼肌萎縮
    1.2 骨骼肌損傷修復(fù)
    1.3 C2C12細(xì)胞與肌損傷細(xì)胞模型
    1.4 人參皂苷Rg1及其功能
    1.5 核糖體蛋白S6激酶和4E結(jié)合蛋白
    1.6 PI3K-AKT-mTOR信號通路
    1.7 研究目的和意義
2 材料與方法
    2.1 儀器和設(shè)備
    2.2 細(xì)胞系
    2.3 材料和試劑
    2.4 試劑配制
    2.5 實驗方法及步驟
        2.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.5.2 細(xì)胞計數(shù)
        2.5.3 顯微拍照
        2.5.4 MTT法檢測細(xì)胞活力
        2.5.5 BCA法檢測蛋白質(zhì)表達(dá)
        2.5.6 Westernblot
    2.6 數(shù)據(jù)分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 C2C12細(xì)胞損傷模型
    3.2 Rg1對C2C12細(xì)胞損傷修復(fù)的影響
        3.2.1 Rg1對C2C12細(xì)胞形態(tài)的影響
        3.2.2 Rg1對C2C12細(xì)胞增殖的影響
        3.2.3 Rg1提高C2C12細(xì)胞活力的影響
    3.3 Rg1促進C2C12細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的影響
        3.3.1 Rg1促進C2C12細(xì)胞損傷蛋白合成
        3.3.2 Rg1促進PI3K蛋白表達(dá)
        3.3.3 Rg1促進Akt及mTOR蛋白表達(dá)
        3.3.4 Rg1促進P70S6K蛋白表達(dá)
        3.3.5 Rg1抑制4E-BP1蛋白表達(dá)
    3.4 Rg1 對 PI3K-Akt-m TOR 信號通路具有協(xié)同增效的作用
        3.4.1 PI3K抑制劑LY294002對蛋白信號調(diào)控的影響
        3.4.2 mTOR抑制劑雷帕霉素對蛋白信號調(diào)控的影響
4 討論
5 結(jié)論
6 創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
英文縮寫
致謝



本文編號：3172911