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天麻提取物對灰樹花胞外多糖理化特性、抗氧化及免疫活性影響的探究

發(fā)布時間:2021-04-29 20:03
  本文主要開展了天麻提取物對灰樹花胞外多糖組分、理化特性、結(jié)構(gòu)特點和生物活性等方面的研究。研究內(nèi)容主要包括:添加7%(v/v)天麻提取物參與灰樹花發(fā)酵過程中,確定天麻提取物的主要成分及其含量的變化,探究天麻提取物對灰樹花胞外多糖組分排布及含量的影響;以多糖主要組分為研究對象(EPS-2和REPS-2),確定多糖組分間多糖含量、蛋白質(zhì)含量、糖醛酸含量,分子量、單糖組成和糖苷鍵鍵合等方面的差異,探究天麻提取物對灰樹花胞外多糖結(jié)構(gòu)特點的影響;以體外抗氧化和小鼠體內(nèi)免疫實驗為研究目標(biāo),確定多糖組分間對超氧陰離子自由基清除率、DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、小鼠免疫器官指數(shù)、血清免疫因子和血清免疫球蛋白含量的變化,探究天麻提取物對灰樹花胞外多糖生物活性的影響,總結(jié)多糖結(jié)構(gòu)特點與生物活性差異的關(guān)聯(lián)。研究結(jié)果如下:研究并建立了天麻素、對羥基苯甲醇(HA)、對羥基苯甲醛(HBA)和巴利森甙定性和定量的檢測方法,分析了高溫高壓滅菌前后天麻提取物主要成分含量的變化及灰樹花對天麻提取物主要成分的利用率。結(jié)果表明,經(jīng)高溫高壓滅菌后,天麻提取物主要成分會發(fā)生改變,其中滅菌后的天麻提取物中天麻素含量增加... 

【文章來源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 灰樹花多糖的研究
    1.2 多糖分析方法的研究進展
        1.2.1 多糖的結(jié)構(gòu)及表征
        1.2.2 多糖分子量(純度)
        1.2.3 多糖的單糖組成
        1.2.4 化學(xué)結(jié)構(gòu)
    1.3 多糖的生物活性
        1.3.1 抗氧化作用
        1.3.2 抗腫瘤作用
        1.3.3 免疫調(diào)節(jié)作用
        1.3.4 其他生物活性作用
    1.4 多糖分子量、結(jié)構(gòu)特點及生物學(xué)活性的關(guān)聯(lián)
    1.5 本論文研究基礎(chǔ)及立題意義
    1.6 本論文研究的主要內(nèi)容
第二章 天麻提取物對灰樹花胞外多糖組分分布及含量變化的探究
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 菌種與天麻種類
        2.2.2 實驗藥品
        2.2.3 實驗儀器與設(shè)備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 培養(yǎng)基
            2.3.1.1 斜面種子培養(yǎng)基
            2.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            2.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        2.3.2 培養(yǎng)方法
            2.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            2.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            2.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        2.3.3 天麻提取物的制備
        2.3.4 天麻提取物及主要成分檢測
        2.3.5 DEAE-52 預(yù)處理
        2.3.6 Sephadex G-100 預(yù)處理
        2.3.7 胞外多糖的分離純化
        2.3.8 多糖含量的測定
        2.3.9 蛋白質(zhì)含量的測定
    2.4 糖醛酸含量的測定
        2.4.1 統(tǒng)計方法
    2.5 結(jié)果與討論
        2.5.1 天麻素標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.5.2 對羥基苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.5.3 對羥基苯甲醛標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.5.4 巴利森甙標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.5.5 天麻提取物主要成分的確定
        2.5.6 天麻提取物滅菌前后主要成分含量的變化
        2.5.7 灰樹花發(fā)酵過程中天麻提取物含量變化
        2.5.8 灰樹花胞外多糖(對照組)組分研究
        2.5.9 灰樹花胞外多糖(實驗組)組分研究
    2.6 多糖含量的測定
        2.6.1 蛋白質(zhì)含量的測定
        2.6.2 糖醛酸含量的測定
    2.7 本章小結(jié)
第三章 灰樹花多糖結(jié)構(gòu)解析
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 菌種與天麻種類
        3.2.2 實驗藥品
        3.2.3 實驗儀器與設(shè)備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 培養(yǎng)基
            3.3.1.1 斜面種子培養(yǎng)基
            3.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            3.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        3.3.2 培養(yǎng)方法
            3.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            3.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            3.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        3.3.3 天麻提取物的制備
        3.3.4 灰樹花多糖的制備
        3.3.5 多糖分子量測定
        3.3.6 單糖組成的測定
        3.3.7 傅里葉紅外光譜測定
        3.3.8 GC-MS甲基化測定
        3.3.9 統(tǒng)計方法
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 灰樹花多糖EPS-2和REPS-2 的分子量
        3.4.2 單糖混合標(biāo)準(zhǔn)品高效陰離子色譜圖
        3.4.3 灰樹花胞外多糖單糖組成分析
        3.4.4 傅里葉紅外光譜圖
        3.4.5 GC-MS甲基化
    3.5 本章小結(jié)
第四章 灰樹花多糖影響體外抗氧化活性的研究
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 菌種與天麻種類
        4.2.2 實驗藥品
        4.2.3 實驗儀器與設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 培養(yǎng)基
            4.3.1.1 斜面種子培養(yǎng)基
            4.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            4.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        4.3.2 培養(yǎng)方法
            4.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            4.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            4.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        4.3.3 天麻提取物的制備
        4.3.4 灰樹花多糖的制備
        4.3.5 超氧陰離子自由基的測定
        4.3.6 DPPH自由基的測定
        4.3.7 ABTS自由基的測定
        4.3.8 統(tǒng)計分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 超氧陰離子自由基的測定
        4.4.2 DPPH自由基的測定
        4.4.3 ABTS自由基的測定
    4.5 本章小結(jié)
第五章 灰樹花多糖影響小鼠免疫活性的研究
    5.1 引言
    5.2 實驗材料
        5.2.1 菌種與天麻種類
        5.2.2 實驗藥品
        5.2.3 實驗儀器與設(shè)備
    5.3 實驗方法
        5.3.1 培養(yǎng)基
            5.3.1.1 斜面種子培養(yǎng)基
            5.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            5.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        5.3.2 培養(yǎng)方法
            5.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            5.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            5.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        5.3.3 天麻提取物的制備
        5.3.4 灰樹花多糖的制備
        5.3.5 小鼠的喂養(yǎng)
        5.3.6 免疫缺陷型小鼠模型的構(gòu)建
        5.3.7 胸腺和脾臟指數(shù)的測定
        5.3.8 小鼠血清因子的測定
        5.3.9 統(tǒng)計分析
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 灰樹花多糖對免疫缺陷小鼠免疫器官指數(shù)的影響
        5.4.2 灰樹花多糖對免疫缺陷小鼠血清TNF-α和IFN-γ含量的影響
        5.4.3 灰樹花多糖對免疫缺陷小鼠血清免疫因子IL-2和IL-6 含量的影響
        5.4.4 灰樹花多糖對免疫缺陷小鼠血清免疫球蛋白Ig G和 Ig A含量的影響
    5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 論文創(chuàng)新點
    6.3 展望
致謝
主要參考文獻
碩士期間發(fā)表論文清單
附錄


【參考文獻】:
期刊論文
[1]灰樹花菌絲體β-葡聚糖提取工藝優(yōu)化[J]. 鐘敏,吳天祥,聶文強,蘆紅云.  中國釀造. 2017(08)
[2]灰樹花多糖抑制乙型肝炎病毒活性的研究[J]. 趙霏,宋雷,郭培燕,馬艷慶,楊克虎.  食品與生物技術(shù)學(xué)報. 2017(06)
[3]灰樹花多糖的分離純化及體外抗肝癌作用研究[J]. 張媛媛,孟夢,王明飛,王春玲.  食品研究與開發(fā). 2016(15)
[4]對羥基苯甲醛等3種天麻成分對灰樹花胞外多糖生物合成的影響[J]. 吳彩云,吳天祥,朱俊杰,劉昕,趙群麗.  食品科學(xué). 2016(07)
[5]對羥基苯甲醇對灰樹花產(chǎn)胞外多糖的影響及其發(fā)酵動力學(xué)[J]. 朱俊杰,吳天祥,吳彩云,劉昕,趙群麗.  食品科學(xué). 2016(19)
[6]灰樹花胞外多糖的結(jié)構(gòu)及免疫調(diào)節(jié)活性[J]. 韓麗榮,程代,王莉蕊,王春玲.  生物工程學(xué)報. 2016(05)
[7]多糖的化學(xué)修飾對其生物活性影響研究進展[J]. 孟思彤,徐艷芝,王振月.  天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2014(11)
[8]中藥天麻成分對灰樹花胞外多糖合成及相關(guān)關(guān)鍵酶的影響[J]. 賀宗毅,吳天祥,徐曉寶.  食品科學(xué). 2013(11)
[9]鹿茸多糖分離純化及抗氧化活性研究[J]. 趙玉紅,金秀明,韓睿.  食品工業(yè)科技. 2012(12)
[10]中藥黃芪對發(fā)酵生產(chǎn)靈芝多糖的影響[J]. 王玉紅,丁重陽,徐鵬,章克昌.  食品與生物技術(shù)學(xué)報. 2005(02)

博士論文
[1]猴頭菇多糖的結(jié)構(gòu)表征、免疫調(diào)節(jié)活性及其機理研究[D]. 伍芳芳.華南理工大學(xué) 2018

碩士論文
[1]灰樹花多糖對HT-29細胞的抗癌作用及機制研究[D]. 王艷停.天津科技大學(xué) 2017
[2]石耳子實體多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)解析及生物活性研究[D]. 陳陽陽.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號:3168089

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