目的通過(guò)觀察異常山堿對(duì)食管癌EC9706細(xì)胞的增殖、凋亡、周期、能量代謝及能量代謝通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,探討其治療食管癌的分子機(jī)制。方法常規(guī)培養(yǎng)ECC9706細(xì)胞,用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性,篩選藥物濃度,選擇1、2μg/mL 2個(gè)質(zhì)量濃度;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞凋亡、周期的影響,能量代謝檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞能量代謝的影響,Westernblotting檢測(cè)細(xì)胞中哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、磷酸化乙酰輔酶A羧化酶（p-ACC）、腺苷磷酸激活蛋白激酶（AMPK）蛋白表達(dá)。結(jié)果不同質(zhì)量濃度異常山堿作用48h后能有效抑制EC9706細(xì)胞增殖,呈劑量依賴性（P<0.01）,可以將EC9706細(xì)胞阻滯于S期和G₂/M期（P<0.05）,有效促進(jìn)細(xì)胞凋亡（P<0.05）,且明顯抑制細(xì)胞糖酵解及線粒體代謝能力（P<0.01）,與對(duì)照組比較,異常山堿組細(xì)胞AMPK蛋白表達(dá)水平上升,mTOR、p-mTOR、p-ACC蛋白表達(dá)水平降低（P<0.05）。結(jié)論異常山堿可能... 

【文章來(lái)源】：中草藥. 2020,51(17)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細(xì)胞
    1.2 藥物
    1.3 試劑
    1.4 儀器
2 方法
    2.1 藥物制備
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.3 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞活性的影響
    2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期
    2.6 能量代謝分析系統(tǒng)檢測(cè)EC9706細(xì)胞能量代謝
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞活性的影響
    3.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變
    3.3 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞凋亡的影響
    3.4 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞周期的影響
    3.5 異常山堿對(duì)EC9706能量代謝的影響
        3.5.1 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞糖酵解速率的影響
        3.5.2 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞線粒體壓力的影響
    3.6 異常山堿對(duì)EC9706細(xì)胞mTOR、p-mTOR、p-ACC、AMPK蛋白表達(dá)的影響
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]常山中常山堿和異常山堿的同步測(cè)定研究[J]. 張繼遠(yuǎn),劉梓晗,劉曉謙,馮偉紅,楊立新,王智民,李春.  中國(guó)中藥雜志. 2017(09)
[2]六君子湯提取物抑制食管癌Ec9706細(xì)胞增殖及其對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子3信號(hào)通路的影響[J]. 崔姍姍,高小玲,王慧慧,吳耀松,尹素改,陳玉龍.  中國(guó)全科醫(yī)學(xué). 2016(24)
[3]Halofuginone for fibrosis, regeneration and cancer in the gastrointestinal tract[J]. Mark Pines.  World Journal of Gastroenterology. 2014(40)
[4]基于周仲瑛辨治經(jīng)驗(yàn)的食管癌病機(jī)要素?cái)?shù)據(jù)分析[J]. 何若瑜,周瑛,吳勉華,郭仁清,趙智強(qiáng).  中醫(yī)雜志. 2014(02)
[5]常山堿和異常山堿的合成研究進(jìn)展[J]. 張?jiān)?杜會(huì)茹,王永國(guó),牛玉環(huán).  河北師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(04)

碩士論文
[1]常山堿類似物的合成研究[D]. 張金進(jìn).廣東工業(yè)大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3163151