目的:探索短葉老鸛草素的抗腫瘤活性及其作用機制,為其在腫瘤治療的開發(fā)應(yīng)用方面提供科學(xué)依據(jù)。方法:以人肺癌A549細胞、人肝癌HepG2細胞、人宮頸癌Hela細胞、人黑色素瘤A875細胞、小鼠結(jié)腸癌CT26細胞為受試對象,采用MTT法檢測不同濃度的短葉老鸛草素作用48 h對A549、HepG2、Hela、A875、CT26細胞增殖的影響;選擇抑制效果較好的CT26細胞作為研究對象,利用BALB/c小鼠建立CT26實體瘤模型,觀察短葉老鸛草素對小鼠體重、CT26腫瘤生長和臟器指數(shù)的影響;免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織cleaved-caspase-3及LC3-Ⅱ的表達情況;應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測短葉老鸛草素處理CT26細胞72 h后細胞的凋亡情況;Western Blot分析不同濃度的短葉老鸛草素對CT26細胞凋亡及自噬相關(guān)蛋白表達的影響;激光共聚焦觀察短葉老鸛草素作用下CT26細胞自噬標志蛋白LC3的表達和分布。結(jié)果:短葉老鸛草素對人肺癌A549細胞、人肝癌HepG2細胞、人宮頸癌Hela細胞、人黑色素瘤A875細胞、小鼠結(jié)腸癌CT26細胞均有較好的增殖抑制作用,并... 

【文章來源】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞釋義
前言
研究思路與技術(shù)路線
第一章 綜述
    1 短葉老鸛草素抗腫瘤研究概況
        1.1 短葉老鸛草素抑制腫瘤細胞增殖
        1.2 短葉老鸛草素促進腫瘤細胞凋亡
        1.3 短葉老鸛草素逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥作用
        1.4 短葉老鸛草素對核基因NF-κB的影響
    2 結(jié)腸癌研究進展
        2.1 結(jié)腸癌的流行病學(xué)研究概況
        2.2 結(jié)腸癌的分類
        2.3 結(jié)腸癌的致病因素
        2.4 結(jié)腸癌的分子機制
    3 抗腫瘤作用機制研究
        3.1 誘導(dǎo)細胞凋亡
        3.2 誘導(dǎo)細胞自噬
        3.3 抑制腫瘤細胞轉(zhuǎn)移
        3.4 免疫調(diào)節(jié)
        3.5 其他抗腫瘤機制
    4 本論文研究意義
第二章 短葉老鸛草素的提取分離
    1 試驗材料
        1.1 試驗藥材
        1.2 主要儀器設(shè)備及試劑
    2 提取分離
    3 結(jié)構(gòu)鑒定
    4 討論
第三章 短葉老鸛草素體外抗腫瘤活性研究
    1 試驗材料
        1.1 細胞株
        1.2 受試藥物
        1.3 主要儀器與試劑
        1.4 常用試劑及試藥的配制
    2 試驗方法
        2.1 細胞復(fù)蘇
        2.2 細胞培養(yǎng)與傳代
        2.3 細胞凍存
        2.4 MTT法檢測短葉老鸛草素對腫瘤細胞增殖的影響
        2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3 結(jié)果
    4 討論
第四章 短葉老鸛草素體內(nèi)抗小鼠結(jié)腸癌CT26活性研究
    1 試驗材料
        1.1 細胞株
        1.2 試驗動物
        1.3 受試藥物
        1.4 主要儀器與試劑
    2 試驗方法
        2.1 腫瘤模型的建立
        2.2 分組與給藥
        2.3 小鼠體重與瘤重
        2.4 器官系數(shù)
        2.5 組織切片
        2.6 免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織cleaved-caspase-3 和LC3-Ⅱ的表達水平
    3 試驗結(jié)果
        3.1 小鼠一般情況觀察
        3.2 短葉老鸛草素抑制腫瘤生長
        3.3 短葉老鸛草素對荷瘤小鼠器官的影響
        3.4 短葉老鸛草素對腫瘤組織細胞cleaved-caspase-3、LC3-Ⅱ表達的影響
    4 討論
第五章 短葉老鸛草素抗腫瘤作用機制研究
    1 試驗材料
        1.1 細胞株
        1.2 受試藥物
        1.3 主要儀器設(shè)備及試劑
        1.4 常用試劑的配制
    2 試驗方法
        2.1 流式細胞術(shù)檢測小鼠結(jié)腸癌CT26細胞的凋亡
        2.2 Western Blot檢測細胞凋亡及自噬相關(guān)蛋白
        2.3 激光共聚焦觀察小鼠結(jié)腸癌CT26細胞的自噬
    3 結(jié)果
        3.1 短葉老鸛草素誘導(dǎo)CT26細胞凋亡
        3.2 短葉老鸛草素促進CT26細胞凋亡蛋白的表達
        3.3 短葉老鸛草素促進CT26細胞自噬蛋白的表達
    4 討論
        4.1 短葉老鸛草素誘導(dǎo)細胞凋亡
        4.2 短葉老鸛草素誘導(dǎo)細胞自噬
結(jié)語與創(chuàng)新
參考文獻
已發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]鵝不食草化學(xué)成分及抗腫瘤活性研究[D]. 朱艷平.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2012
[2]鵝不食草乙酸乙酯部位抗腫瘤活性成分的研究[D]. 劉玉艷.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2010



本文編號：3161005