目的:通過研究補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再生障礙性貧血（以下簡(jiǎn)稱“再障”）模型小鼠 Th1/Th2 比值與 IFN-γ/T-bet、IL-4/STAT6 信號(hào)通路、T-bet、GATA-3 的關(guān)系以及IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10因子表達(dá)的等細(xì)胞情況,來探討Th1/Th2平衡在再障發(fā)病機(jī)制中的作用以及補(bǔ)腎健脾祛障顆粒治療再障的作用靶點(diǎn)和機(jī)制,為臨床更好地治療再障提供理論依據(jù)和支持,并在前期研究基礎(chǔ)上觀察補(bǔ)腎健脾祛障顆粒治療本病的臨床療效。方法:（1）基礎(chǔ)研究:清潔級(jí)BALB/c小鼠,90只,雌性,隨機(jī)選取其中的15只為正常對(duì)照組,剩余75小鼠通過免疫介導(dǎo)方法復(fù)制免疫介導(dǎo)再障小鼠模型,造模成功后（根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,造模后第7天檢測(cè)結(jié)果符合造模成功判定標(biāo)準(zhǔn),造模成功率100%）剔除死亡小鼠10只,剩余65只小鼠隨機(jī)分為模型組、中藥低劑量組（0.78 g/（kg.d））、中藥中劑量組（1.56 g/（kg.d））、中藥高劑量組（3.12 g/（kg.d））及CsA（山地明）組（0.5ml/只）,每組13只。于造模后第7天檢測(cè)血象和骨髓病理示造模成功后開始用藥,中藥低劑量組、中藥... 

【文章來源】：山東中醫(yī)藥大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
提要
Abstract
引言
第一部分 理論探討
    1 中醫(yī)學(xué)對(duì)再生障礙性貧血的認(rèn)識(shí)
        1.1 再生障礙性貧血的中醫(yī)溯源
        1.2 再生障礙性貧血的病因病機(jī)
        1.3 再生障礙性貧血的治療
    2 Th1/Th2平衡偏移與再障關(guān)系的研究
        2.1 Th1/Th2對(duì)再障發(fā)病的影響
        2.2 Th1/Th2與IFN-γ/T-bet、IL-4/STAT-6信號(hào)通路的關(guān)系
        2.3 Th1/Th2與T-bet、GATA-3的關(guān)系
        2.4 Th1/Th2與相關(guān)細(xì)胞因子的關(guān)系
    3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒相關(guān)研究
        3.1 應(yīng)用依據(jù)
        3.2 組方分析
        3.3 主要藥物的現(xiàn)代藥理研究
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
    實(shí)驗(yàn)一 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠的作用研究
        材料
            1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2 實(shí)驗(yàn)藥物及制備方法
            3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
            4 主要儀器
        方法
            1 免疫介導(dǎo)再障小鼠模型建立
                1.1 造模方法
                1.2 造模成功的判定標(biāo)準(zhǔn)
                1.3 造模成功外周血及骨髓病理體現(xiàn)
            2 分組
            3 給藥方法
            4 取材
            5 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
            6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        結(jié)果
            1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠一般狀態(tài)的影響
                1.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠體重的影響
            2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠外周血細(xì)胞的影響
                2.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠外周血白細(xì)胞的影響
                2.2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠外周血紅細(xì)胞的影響
                2.3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠外周血血紅蛋白的影響
                2.4 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠血小板的影響
            3 骨髓及肝脾病理切片觀察
                3.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠骨髓病理狀態(tài)的影響
                3.2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠肝臟病理狀態(tài)的影響
                3.3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠脾臟病理狀態(tài)的影響
    實(shí)驗(yàn)二 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠骨髓及外周血單個(gè)核細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)的影響
        1 測(cè)定小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞T-bet、GATA-3實(shí)時(shí)定量PCR（Real-time PCR）
            1.1 主要試劑與儀器
            1.2 目的基因mRNA引物序列
            1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2. Western Blot
            2.1 主要試劑,儀器
            2.2 主要試劑配制
            2.3 制備蛋白樣品
            2.4 BCA法測(cè)蛋白濃度
            2.5 凝膠制備與上樣
            2.6 電泳
            2.7 凝膠轉(zhuǎn)膜及其檢測(cè)
        3 ELISA
            3.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
            3.2 步驟
        4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        結(jié)果
            1 PCR結(jié)果
                1.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞T-bet mRNA表達(dá)的影響
                1.2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞GATA-3 mRNA表達(dá)的影響
                1.3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞STAT-6 mRNA表達(dá)的影響
            2 Western Blot結(jié)果
                2.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞T-bet蛋白表達(dá)的影響
                2.2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞GATA-3蛋白表達(dá)的影響
                2.3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞STAT-6蛋白表達(dá)的影響
            3 ELISA結(jié)果
第三部分 臨床研究
    1 資料與方法
        1.1 病例來源
        1.2 樣本量的估算
        1.3 隨機(jī)化分組
        1.4 診斷標(biāo)準(zhǔn)
        1.5 納入標(biāo)準(zhǔn)
        1.6 排除標(biāo)準(zhǔn)
        1.7 剔除標(biāo)準(zhǔn)
        1.8 脫落病例處理
    2 治療方法
        2.1 給藥方法
        2.2 療程
    3 觀察指標(biāo)
        3.1 主要指標(biāo)
        3.2 安全性觀察
        3.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn)
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    5 結(jié)果
    6 不良反應(yīng)
討論（一）
    1 免疫介導(dǎo)再障小鼠模型的建立
        1.1 免疫介導(dǎo)再障小鼠模型
        1.2 免疫介導(dǎo)再障模型機(jī)理初探
    2 “補(bǔ)腎健脾法”的確立
    3 對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠一般狀態(tài)的影響
    4 對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠血常規(guī)的影響
    5 對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠骨髓及肝脾病理的影響
    6 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)再障模型小鼠Th1/Th2作用機(jī)制研究
        6.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠IFN-γ/T-bet、IL-4/STAT6信號(hào)通路的影響
        6.2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠Th1/Th2比值的影響
        6.3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠T-bet、GATA-3表達(dá)的影響
        6.4 對(duì)免疫介導(dǎo)再障模型小鼠相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
    7 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒治療再障意義簡(jiǎn)析
        7.1 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒研究意義
        7.2 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒低、中、高劑量療效分析
        7.3 補(bǔ)腎健脾祛障顆粒配伍意義分析
討論（二）
    1 再生障礙性貧血受試者基線資料的分析
    2 臨床療效分析
    3 血常規(guī)分析
    4 骨髓增生程度的改善
    5 安全性評(píng)價(jià)
結(jié)語(yǔ)（一）
結(jié)語(yǔ)（二）
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
查新報(bào)告
發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]補(bǔ)腎活髓顆粒對(duì)慢性再生障礙性貧血患者骨髓血清中bFGF的影響[J]. 鄭雪晨,楊琦,臧婷婷,王樹慶.  新中醫(yī). 2014(11)
[4]貧血性疾病中醫(yī)病名探討[J]. 段赟,李雪松,夏小軍,開金龍,龍青.  中醫(yī)研究. 2014(03)
[5]補(bǔ)腎活髓通絡(luò)顆粒對(duì)非重型再生障礙性貧血患者血清成骨生長(zhǎng)肽表達(dá)的影響[J]. 于麗娜,王樹慶.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2014(02)
[6]從“脾主運(yùn)化”和“運(yùn)脾生血”理論探討慢性病貧血的中醫(yī)病機(jī)和治療[J]. 羅梅宏.  中醫(yī)雜志. 2013(18)
[7]周郁鴻治療慢性再生障礙性貧血經(jīng)驗(yàn)[J]. 吳迪炯,周郁鴻.  中醫(yī)雜志. 2013(04)
[8]PI3K/AKT/mTOR signaling pathway inhibitors in proliferation of retinal pigment epithelial cells[J]. Na Cai,Shun-Dong Dai,Ning-Ning Liu,Li-Min Liu,Ning Zhao,Lei Chen.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2012(06)
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碩士論文
[1]參膠益髓方聯(lián)合西藥治療慢性再生障礙性貧血臨床觀察[D]. 曹小雄.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3156125