發(fā)布時(shí)間：2021-04-21 17:22

　　研究背景:卡瓦胡椒（Piper methysticum G.Forst）是太平洋島嶼上的一種傳統(tǒng)作物,在太平洋地區(qū)被廣泛食用。大量的研究發(fā)現(xiàn),太平洋島國(guó)的前列腺癌和肺癌的發(fā)病率較低,人們推測(cè)群體中較低的癌癥發(fā)病率可能與他們飲食卡瓦胡椒有關(guān)。Flavokawain A（FKA）是植物卡瓦胡椒中的一種新型查爾酮類化合物,已有研究報(bào)道其對(duì)乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌等多種腫瘤細(xì)胞有顯著的抑制作用,且對(duì)正常細(xì)胞損害較小。前列腺癌（PCa）是男性最常見(jiàn)的泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,美國(guó)2019年腫瘤統(tǒng)計(jì)報(bào)告顯示,前列腺癌在男性中的新增發(fā)病率居首位,死亡率排名第2。近年來(lái),我國(guó)中老年人口中前列腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯持續(xù)增長(zhǎng)態(tài)勢(shì),前列腺癌的預(yù)防及治療引起了人們的極大關(guān)注。研究目的:本課題主要研究FKA對(duì)前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C3的抑制作用,并對(duì)其分子機(jī)制進(jìn)行探究。研究方法:（1）采用MTT法檢測(cè)FKA對(duì)PC3細(xì)胞增殖的影響;（2）采用流式細(xì)胞術(shù)分析FKA對(duì)PC3細(xì)胞凋亡及周期的影響;（3）通過(guò)蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western blot）測(cè)定FKA對(duì)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白β-tubulin及Survivin表達(dá)的影響;（4... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
第一章 FKA的抗前列腺癌藥理活性研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 儀器和設(shè)備
        1.2 試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)相關(guān)溶液的配制
        2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3 MTT法檢測(cè)FKA對(duì) PC3 細(xì)胞增殖的影響
        2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)FKA對(duì) PC3 細(xì)胞凋亡的影響
        2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)FKA對(duì) PC3 細(xì)胞周期分布的影響
        2.6 免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FKA對(duì) PC3 細(xì)胞tubulin蛋白分布的影響
        2.7 蛋白免疫印跡（Western blot）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FKA對(duì)PC3細(xì)胞tubulin及 Survivin蛋白表達(dá)的影響
        2.8 分子對(duì)接
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 FKA對(duì) PC3 細(xì)胞增殖的影響
        3.2 FKA對(duì) PC3 細(xì)胞凋亡的影響
        3.3 FKA對(duì) PC3 細(xì)胞周期的影響
        3.4 FKA對(duì)微管蛋白分布的影響
        3.5 FKA對(duì)PC3細(xì)胞中β-tubulin和 Survivin蛋白表達(dá)的影響
        3.6 分子對(duì)接模擬分析
    4 討論
    5 本章小結(jié)
第二章 FKA對(duì) PC3 細(xì)胞代謝重編程的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 儀器和設(shè)備
        1.2 試劑與試藥
        1.3 主要軟件
        1.4 主要網(wǎng)站
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞樣品的收集及處理
        2.2 色譜條件
        2.3 質(zhì)譜條件
        2.4 樣品分析及質(zhì)量控制
        2.5 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 前列腺癌細(xì)胞PC3樣品代謝組分析結(jié)果
        3.2 差異代謝物的篩選及鑒定
        3.3 差異代謝物的鑒定結(jié)果
        3.4 代謝通路分析
    4 討論
    5 本章小結(jié)
第三章 前列腺癌組織代謝重編程的研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 儀器和設(shè)備
        1.2 主要試劑
        1.3 主要軟件
        1.4 主要網(wǎng)站
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 臨床組織樣品的收集及處理
        2.2 超高效液相色譜條件
        2.3 質(zhì)譜條件
        2.4 樣品分析及質(zhì)量控制
        2.5 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 前列腺癌組織樣品代謝組學(xué)分析結(jié)果
        3.2 差異代謝物的篩選及鑒定
        3.3 差異代謝物的鑒定結(jié)果
        3.4 代謝通路分析
    4 討論
    5 本章小結(jié)
第四章 前列腺癌差異基因的獲取及代謝組學(xué)數(shù)據(jù)的進(jìn)一步研究
    1 材料與方法
        1.1 儀器和設(shè)備
        1.2 試劑與試藥
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 數(shù)據(jù)的收集及預(yù)處理
        2.2 差異基因的篩選
        2.3 基因功能及通路分析
        2.4 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)一步挖掘
        2.5 代謝通路的驗(yàn)證
        2.6 ELISA實(shí)驗(yàn)
        2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS（活性氧）含量
    3 結(jié)果
        3.1 基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        3.2 GO分析及KEGG分析結(jié)果
        3.3 差異基因與差異代謝物聯(lián)合分析
        3.4 谷胱甘肽代謝途徑中GSH含量,GSS及 GSTP1 活性的測(cè)定
        3.5 FKA作用于PC3 細(xì)胞后活性氧（ROS）含量的變化
    4 討論
    5 本章小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]基于質(zhì)譜技術(shù)的細(xì)胞代謝組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 汪思媛,趙星陽(yáng),徐瑋蔚,劉慧雯.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2017(08)
[3]2013年中國(guó)老年人群惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬(wàn)青,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),赫捷.  中華腫瘤雜志. 2017 (01)
[4]鞘氨醇激酶信號(hào)通路[J]. 劉佳麗,劉曉惠.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2016(06)
[5]中國(guó)前列腺癌發(fā)病現(xiàn)狀和流行趨勢(shì)分析[J]. 韓蘇軍,張思維,陳萬(wàn)青,李長(zhǎng)嶺.  臨床腫瘤學(xué)雜志. 2013(04)
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碩士論文
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本文編號(hào)：3152172