EGCG是茶葉中含量最高,最具生物活性的兒茶素化合物,具有抗氧化、抗炎等功效。但EGCG不穩(wěn)定,容易發(fā)生氧化聚合,差相異構(gòu)或水解反應(yīng),除此以外,EGCG在攝入人體后在胃腸道消化過程中破壞嚴(yán)重,導(dǎo)致其生物利用率低下,因此制約了 EGCG在功能食品和醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用。本課題組前期研究表明米糠提取物能夠有效負(fù)載茶葉中主要兒茶素類成分EGCG,同時可以提高EGCG的生物利用率。本論文在前期研究的基礎(chǔ)上,通過自組裝制備微米級EGCG-RBAI復(fù)合物（RBAI:米糠白蛋白提取物）,研究其在pH7.4PBS溶液和模擬胃腸道消化液中的穩(wěn)定性;基于抗氧化能力優(yōu)化EGCG-RBAI復(fù)合物配方,用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn);建立IL-1β誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞炎癥模型,通過分組處理（IL-1β誘導(dǎo)模型組、對照組、EGCG、RBAI、EGCG-RBAI三種預(yù)處理組）研究和比較其抑制細(xì)胞炎癥發(fā)生的效果,采用qPCR法檢測MAPK、NF-κB和STAT炎癥相關(guān)信號通路及其下游基因的表達(dá)差異,采用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測細(xì)胞因子IL-8及PGE2水平驗(yàn)證炎癥發(fā)生,采用生化檢測試劑盒檢測抗氧化標(biāo)記物SOD活力和MDA濃度探究細(xì)胞氧化應(yīng)激響應(yīng)變... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 EGCG的理化性質(zhì)
    1.2 EGCG生物利用率
    1.3 微膠囊包埋技術(shù)提高EGCG穩(wěn)定性
    1.4 EGCG的抗炎作用及機(jī)理
        1.4.1 EGCG對機(jī)體氧化-還原狀態(tài)的調(diào)節(jié)作用
        1.4.2 EGCG對炎癥因子水平的調(diào)節(jié)作用
        1.4.3 EGCG對炎癥相關(guān)通路的調(diào)控作用
    1.5 炎癥性腸病的發(fā)生及防治
    1.6 本研究的目的、意義及主要內(nèi)容
第二章 RBAI負(fù)載對EGCG穩(wěn)定性的影響
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.2.3 RBAI的制備
        2.2.4 EGCG-RBAI復(fù)合物制備
        2.2.5 考馬斯亮藍(lán)法檢測蛋白質(zhì)濃度
        2.2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 體外模擬胃腸道消化實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 HPLC法檢測EGCG濃度
        2.2.9 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 RBAI的蛋白質(zhì)成分分析
        2.3.2 RBAI負(fù)載對EGCG在pH 7.4 PBS中穩(wěn)定性的影響
        2.3.3 RBAI負(fù)載對EGCG在模擬胃腸道消化液中穩(wěn)定性的影響
    2.4 小結(jié)
第三章 HT-29細(xì)胞炎癥模型建立及毒性檢測
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 材料和試劑
        3.2.2 儀器設(shè)備
        3.2.3 HT-29細(xì)胞培養(yǎng)方法
        3.2.4 MTT法檢測細(xì)胞存活率
        3.2.5 分組預(yù)處理實(shí)驗(yàn)和IL-1β誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞炎癥
        3.2.6 實(shí)時熒光定量PCR （qPCR）分析基因表達(dá)
        3.2.7 數(shù)據(jù)處理
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 不同濃度EGCG對HT-29細(xì)胞存活率的影響
        3.3.2 RBAI濃度對HT-29細(xì)胞存活率的影響
        3.3.3 EGCG- RBAI復(fù)合物配方對HT-29細(xì)胞存活率的影響
        3.3.4 EGCG預(yù)處理對炎癥生物標(biāo)記基因表達(dá)的影響
        3.3.5 RBAI預(yù)處理對炎癥生物標(biāo)記基因表達(dá)的影響
    3.4 小結(jié)
第四章 EGCG-RBAI復(fù)合物對炎癥相關(guān)信號通路激活的抑制作用
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 材料和試劑
        4.2.2 儀器設(shè)備
        4.2.3 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用不同配方EGCG-RBAI復(fù)合物的制備
        4.2.4 ORAC法檢測抗氧化能力
        4.2.5 細(xì)胞預(yù)處理實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 qPCR法定量檢測基因表達(dá)
        4.2.7 IL-8和PGE2濃度檢測方法
        4.2.8 數(shù)據(jù)處理
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用EGCG-RBAI配方篩選
        4.3.2 不同預(yù)處理對炎癥相關(guān)主要信號通路基因表達(dá)的影響
        4.3.3 不同預(yù)處理對通路下游炎癥相關(guān)基因表達(dá)的影響
        4.3.4 不同預(yù)處理對細(xì)胞上清液IL-8和PGE2水平的影響
        4.3.5 不同預(yù)處理對炎癥相關(guān)基因表達(dá)及炎癥因子分泌的影響分析
    4.4 小結(jié)
第五章 EGCG-RBAI復(fù)合物對細(xì)胞氧化應(yīng)激響應(yīng)的調(diào)節(jié)作用
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        5.2.4 細(xì)胞預(yù)處理實(shí)驗(yàn)
        5.2.5 qPCR法定量檢測Nrf2基因表達(dá)
        5.2.6 SOD活力檢測
        5.2.7 MDA含量檢測
        5.2.8 數(shù)據(jù)處理
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 不同預(yù)處理對細(xì)胞氧化應(yīng)激響應(yīng)的調(diào)節(jié)作用
        5.3.2 不同預(yù)處理對細(xì)胞氧化應(yīng)激響應(yīng)的影響分析
        5.3.3 IL-1β誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞炎癥發(fā)生機(jī)制探討
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3149262