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紫果西番蓮葉中四種黃酮成分對α-葡萄糖苷酶、SGLT1和GLUT2抑制作用的研究

發(fā)布時間:2021-04-20 06:06
  2型糖尿病(T2DM)是當(dāng)今危害人類健康的重大疾病之一,主要病理學(xué)表征為持續(xù)性高血糖。研究表明,除促進胰島素分泌、改善胰島素抵抗等方式降低血糖外,延緩葡萄糖的吸收對降低餐后血糖也起到重要作用。大量研究證實,天然來源的黃酮類活性成分在改善胰島素抵抗、促進胰島素分泌等方面發(fā)揮一定作用,但針對黃酮類活性成分影響葡萄糖吸收方面的研究較少。根據(jù)目前研究現(xiàn)狀,結(jié)合課題組研究方向,本論文對紫果西番蓮葉中木犀草素、異葒草素、異牡荊素和牡荊素四種黃酮成分進行了含量測定,并探討了這四種黃酮成分對葡萄糖吸收過程中α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用及葡萄糖轉(zhuǎn)運載體表達的影響,結(jié)果如下:1、采用兩種方法測定了紫果西番蓮葉中木犀草素、異葒草素、異牡荊素、牡荊素的含量,檢測出四種黃酮的保留時間分別為在15、12、20、17min;測得四種黃酮平均含量分別為為0.0154、0.2114、0.0621、0.1022mg/g。2、采用PNPG法發(fā)現(xiàn),濃度范圍在12.5-200μM的四種黃酮均對α-葡萄糖苷酶的活性具有一定抑制作用,其IC50值分別為19.39、102.03、163.34、209.57μM。... 

【文章來源】:華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 2型糖尿病概述
    1.2 α-葡萄糖苷酶及抑制劑概述
    1.3 SGLT1和GLUT2概述
    1.4 黃酮類活性成分降血糖作用的研究進展
        1.4.1 改善胰島素抵抗
        1.4.2 促進胰島素分泌
    1.5 本課題研究的主要內(nèi)容及意義
        1.5.1 本課題研究意義
        1.5.2 本課題研究內(nèi)容
第二章 HPLC法測定紫果西番蓮葉中四種黃酮成分含量
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 供試品溶液的制備
        2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備
        2.2.3 色譜條件
        2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 四種黃酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.2 四種黃酮的保留時間
        2.3.3 精密度實驗
        2.3.4 重復(fù)性實驗
        2.3.5 穩(wěn)定性實驗
        2.3.6 加樣回收率實驗
        2.3.7 樣品含量測定
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第三章 四種黃酮對α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 溶液的配制
        3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.2.3 四種黃酮對α-葡萄糖苷酶抑制率的測定
        3.2.4 四種黃酮對α-葡萄糖苷酶抑制動力學(xué)研究
        3.2.5 統(tǒng)計分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 對硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.3.2 四種黃酮對α-葡萄糖苷酶抑制率的測定
        3.3.3 四種黃酮對α-葡萄糖苷酶抑制類型判斷
        3.3.4 四種黃酮對α-葡萄糖苷酶抑制動力學(xué)研究
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第四章 四種黃酮對Caco-2細(xì)胞中α-葡萄糖苷酶及葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的影響
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗試劑
        4.1.2 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 不同濃度黃酮溶液的配制
        4.2.2 Caco-2細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.2.3 CCK-8法評價四種黃酮對Caco-2細(xì)胞的存活率影響
        4.2.4 測定四種黃酮對Caco-2細(xì)胞中α-葡萄糖苷酶抑制率
        4.2.5 RT-qPCR實驗
        4.2.6 Westernblotting實驗
        4.2.7 統(tǒng)計分析
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 四種黃酮對Caco-2細(xì)胞的存活率影響
        4.3.2 四種黃酮對Caco-2細(xì)胞中蔗糖酶和麥芽糖酶抑制率的測定
        4.3.3 RT-qPCR實驗檢測S-I、SGLT1、GLUT2的mRNA相對表達量
        4.3.4 WesternBlotting實驗檢測SGLT1、GLUT2的蛋白相對表達量
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    1、結(jié)論
    2、創(chuàng)新點
    3、展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號:3149125

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