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水飛薊素通過(guò)調(diào)控Nrf2抗氧化通路抑制NLRP3炎癥小體改善非酒精性脂肪性肝病

發(fā)布時(shí)間:2021-04-12 23:12
  目的探究水飛薊素(Silymarin)影響非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)病變進(jìn)展的機(jī)制。方法溶劑、(PA+LPS)、(PA+LPS+Silymarin)3種方式干預(yù)人肝癌HepG2細(xì)胞后,分別用Western blot、qPCR及熒光探針法檢測(cè)Nrf2、SIRT2、NLRP3以及其下游Casp1 P45、Casp1 P20蛋白的表達(dá)水平以及Nrf2、HO-1、NQO-1的細(xì)胞mRNA表達(dá)水平以及ROS代謝水平的影響。(PA+LPS+siNC)、(PA+LPS+Silymarin+siNrf2)、(PA+LPS+Silymarin+siNC)、(PA+LPS+siNrf2)四種方式干預(yù)HepG2細(xì)胞后,再次檢測(cè)上述蛋白和mRNA等指標(biāo)。溶劑、HFD和(HFD+Silymarin)3種方式干預(yù)小鼠后,對(duì)肝臟HE病理切片進(jìn)行評(píng)估,IHC檢測(cè)肝臟石蠟包埋切片的NLRP3蛋白的組織表達(dá)水平的改變。結(jié)果 Silymarin可明顯升高HepG2細(xì)胞的Nrf2和SIRT2表達(dá)水平,降低NLRP3、Casp1 P20和ROS表達(dá)水平,以及降低小鼠肝臟的NLRP3表達(dá)水平。用Nrf2-siRNA特異性抑... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料
    1.1 藥物與試劑
    1.2 儀器
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 轉(zhuǎn)染處理
    2.3 藥物處理
    2.4 Western blot檢測(cè)Nrf2、SIRT2、NLRP3、pro Caspase-1及cleaved caspase-1 P20蛋白
    2.5 qPCR檢測(cè)Nrf2、NQO-1、HO-1的mRNA表達(dá)水平
    2.6 ROS檢測(cè)
    2.7 動(dòng)物飼養(yǎng)與處理
    2.8 小鼠肝臟形態(tài)學(xué)觀察
    2.9 IHC檢測(cè)
    2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 Silymarin對(duì)于HepG2中Nrf2,ROS以及NLRP3炎癥小體通路的影響
    3.2 SiRNA的篩選與Silymarin對(duì)于HepG2中HO-1、NQO-1表達(dá)的影響
    3.3 siNrf2對(duì)于Silymarin抑制NLRP3炎癥小體作用的影響
    3.4 Silymarin對(duì)于小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)與肝臟病理改變的影響
    3.5 Silymarin對(duì)于小鼠肝臟中NLRP3蛋白表達(dá)的影響
4 討論



本文編號(hào):3134147

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