目的:基于Caco-2細胞模型對蒼術(shù)中的三種單體化合物的跨膜轉(zhuǎn)運進行研究,明確三種單體化合物的跨膜轉(zhuǎn)運機理,為蒼術(shù)藥材的吸收機制的深入研究提供了實驗基礎(chǔ)。材料與方法:材料:蒼術(shù)藥材:為湖北英山產(chǎn),經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學藥用植物教研室王冰教授鑒定為菊科植物茅蒼術(shù)（Atractylodes lancea（Thunb.）DC.）的根莖。方法:蒼術(shù)藥材采用80%乙醇滲漉提取,依次采用石油醚（60-90℃）、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,采用柱色譜、制備薄層、制備液相等手段對蒼術(shù)石油醚層中的化學成分進行系統(tǒng)分離,制備與純化,并采用理化性質(zhì)、1H-NMR、13C-NMR譜數(shù)據(jù)等方法鑒定化合物的化學結(jié)構(gòu);采用“21天造模法”建立Caco-2細胞單層模型,并通過細胞形態(tài)學考察,堿性磷酸酶活性測定,測量跨膜電阻值,標志物測漏檢查的方法對Caco-2細胞模型的完整性進行考察與評價。采用CCK-8法檢測不同濃度的炮制前后蒼術(shù)水煎液,乙醇提取液以及幾種蒼術(shù)單體化合物對人結(jié)腸癌細胞Caco-2增殖活性的抑制作用,分別計算不同藥物對人結(jié)腸癌Caco-2細胞存活率的影響。采用Caco-2細胞模型對蒼術(shù)中三種單體化合物進行了... 

【文章來源】：遼寧中醫(yī)藥大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Caco-2細胞生長至21d的顯微鏡照片

圖 2-1 Caco-2 細胞生長至 21d 的顯微鏡照片2.跨膜電阻的測定結(jié)果：于第 4、7、10、14、21 d，用細胞電阻儀測定 TEER，Caco-2 細胞電阻值逐漸增加，培養(yǎng)至 21d 時，TEER 為 367±24 Ω/cm-2，大于 300 Ω/cm-2，表明 Caco-2細胞模型足夠的完整，且緊密連接。（圖 2-2）

Caco-2細胞對生蒼術(shù)乙醇提取液的敏感程度

【參考文獻】：
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本文編號：3111065