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小葉女貞糖基轉(zhuǎn)移酶xynzUGT的克隆與原核表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-03-26 17:05
  紅景天苷(化學(xué)名:對(duì)羥基苯乙基-β-D-葡萄糖苷,Salidroside),是酪醇(化學(xué)名:對(duì)羥基苯乙醇)的葡萄糖苷。紅景天苷及其苷元酪醇首先發(fā)現(xiàn)于紅景天中,是紅景天屬植物最重要的藥效成分,隨后也發(fā)現(xiàn)存在于女貞屬、杜鵑屬、越桔屬等植物中。藥理學(xué)研究顯示,紅景天苷具有良好的抗疲勞、抗缺氧、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)心血管等多種功效。紅景天及其主要成分紅景天苷同樣在許多特殊環(huán)境下使用,用來抵抗惡劣環(huán)境,提高機(jī)體免疫力,在軍事、航天、運(yùn)動(dòng)及保健醫(yī)學(xué)等方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值,同時(shí)也作為原料藥和添加劑在化妝品、食品、保健品、藥品等工業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。論文以小葉女貞(Ligustrum quihoui Carr)葉片為實(shí)驗(yàn)材料,通過轉(zhuǎn)錄組測序,并與已報(bào)道的紅景天植物中催化紅景天苷合成的葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因進(jìn)行比對(duì),從中篩選出同源性高度相似的序列,利用cDNA末端快速克隆的技術(shù)(RACE)克隆得到小葉女貞中的糖基轉(zhuǎn)移酶基因xynzUGT,將該基因與原核表達(dá)載體pET-28a進(jìn)行連接,所得重組質(zhì)粒再轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞BL21(DE3),獲得原核表達(dá)工程菌BL21-UGT-28a,工程菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),目的蛋白SDS... 

【文章來源】:湖南中醫(yī)藥大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

小葉女貞糖基轉(zhuǎn)移酶xynzUGT的克隆與原核表達(dá)


圖1.2pET-28a質(zhì)粒圖譜??Figure?1.2?pET-28a?atlas??4??

流程圖,文庫構(gòu)建,流程圖,低質(zhì)量


圖2.1文庫構(gòu)建流程圖??Figure?2.1?flow?diagram?of?library??與組裝??始測序數(shù)據(jù)中含有接頭(adapter)、低質(zhì)量或過多N的r

長度分布,長度分布圖,長度分布,總長


群再次組裝共獲得?157,450?條?unigene,平均長?734?bp,總長?115,496,072bp(115.49?Mb),??N50為1510bp,其中小于200bp、200?3000bp、3000bp以上的各占27.12%、69.92%、??2.96%,具體長度分布見圖2.2B。??9??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
[1]滇重樓糖基轉(zhuǎn)移酶基因及細(xì)胞色素P450基因的表達(dá)研究[D]. 董栩.云南中醫(yī)學(xué)院 2016
[2]擬南芥糖基轉(zhuǎn)移酶基因UGT76E12的克隆及其參與逆境適應(yīng)性的作用分析[D]. 董瑞瑞.山東大學(xué) 2015
[3]小葉女貞果實(shí)的化學(xué)成分及其活性研究[D]. 宋志遠(yuǎn).哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2013
[4]擬南芥糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆、載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因植物的研制[D]. 渠曉霞.山東大學(xué) 2012
[5]小葉女貞活性部位的分離及篩選[D]. 呂述權(quán).福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[6]擬南芥細(xì)胞分裂素O-糖基轉(zhuǎn)移酶基因功能分析[D]. 馬新梅.山東大學(xué) 2011
[7]高山紅景天苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 高東堯.吉林大學(xué) 2006



本文編號(hào):3101942

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