牡丹皮是我國傳統(tǒng)中藥材,《神農(nóng)本草經(jīng)》記載味辛、寒,無毒。大花黃牡丹（Paeonia ludlowii）為芍藥科、芍藥屬植物,僅見于西藏東南部林芝地區(qū)米林縣,當?shù)夭孛裨缭趲装倌昵伴_始用其根皮治療婦科、皮膚疾病和心腦血管等方面疾病。但是,對西藏大花黃牡丹根皮的化學成分和活性研究至今未見報道。本文期望提取獲得大花黃牡丹根皮的揮發(fā)油（the essential oil from the root of P.ludlowii,PEO）,分析化學成分,研究揮發(fā)油及其主要成分的抗腫瘤、抗真菌、抗氧化活性,并尋找可能的作用機理。首先利用水蒸氣蒸餾法、冷浸法和回流法對PEO進行提取,通過GC-MS分析化學成分,比較三種方法的試驗結(jié)果,確定本研究的最佳提取方法。然后對PEO及其主要成分抗人肺癌A549細胞的作用進行研究。通過CCK-8（cell counting kit-8）法和克隆形成試驗檢測A549細胞的增殖水平;倒置顯微鏡、熒光顯微鏡和透射電鏡檢測A549細胞的形態(tài)學改變;細胞免疫熒光觀察微管蛋白（Tubulin）和細胞色素c（Cytochrome C,Cyt c）的分布;共聚焦顯微鏡觀察ROS的... 

【文章來源】：黑龍江大學黑龍江省

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大花黃牡丹分布和形態(tài)

第 2 章 材料與方法2.2 試驗方法本文采取三種方法對大花黃牡丹根皮的揮發(fā)油進行提取，并對其化學成分進行鑒定，對其主以及要成分丹皮酚的生物活性進行研究，技術(shù)路線如圖 2-1 所示。

圖 2-2 揮發(fā)油的提取Fig 2-2 Extraction of essential oils.2.2 水蒸氣蒸餾法精確稱 40 g 粉碎后樣品，置于 1 000 mL 的圓底燒瓶中，加入蒸餾水室溫浸泡 h。安裝連接蒸餾裝置，樣品蒸餾處理 4 h，控制溫度使圓底燒瓶里的混合液保持沸狀態(tài)，持續(xù)有水蒸汽蒸出，經(jīng)過冷凝裝置，回收蒸餾液，選乙醚為萃取相進三次萃取，回收萃取液后進行過濾。濾體至于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在低于 40℃條件將乙醚相減壓蒸發(fā)，瓶中得到物質(zhì)就是 PEO，精密稱量，計算 PEO 的提取率（%）。提取率= 100%gg 樣品重量（）揮發(fā)油量（）.2.3 有機溶劑冷浸法準確稱量樣品 40 g，加入乙醚溶液置于 1 000 mL 的圓底燒瓶中，室溫條件下


本文編號：3098969