目的:通過構(gòu)建急性心肌梗死大鼠模型及體外培養(yǎng)人臍靜脈性內(nèi)皮細胞（HUVEC細胞）,觀察黃芪甲苷（AS-IV）促進心肌梗死后血管新生及相關(guān)心臟保護作用,并探討促血管新生作用與PTEN/PI3K/Akt信號通路之間的關(guān)系,明確作用機制。方法:1.體內(nèi)實驗應(yīng)用左心室前降支（LAD）結(jié)扎術(shù)構(gòu)建大鼠心肌梗死動物模型,隨機分為:假手術(shù)組（Sham,n=15）、心肌梗死模型組（Model,n=15）、AS-Ⅳ 低劑量組（AS-20mg/kg,n=15）、AS-Ⅳ高劑量組（AS-Ⅳ 50mg/kg,n=15）;假手術(shù)組與心肌梗死模型組灌胃等量生理鹽水。給藥及觀察時間為2周。干預(yù)2周后心超檢測心臟功能;TTC法染色觀察心肌梗死面積;H-E染色以及Masson染色觀察梗死組織病理變化以及纖維化程度;α-SMA免疫組化評估心肌梗死邊緣組織血管新生情況;TUNEL法觀察梗死灶邊緣細胞凋亡的情況;電鏡評估心肌組織線粒體、肌絲、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)病變情況;Western Blot方法檢測 PTEN、PI3K、t-Akt、p-AKT、VEGF、Bcl-2、Bax 等蛋白表達。2.體外實驗（1）通過設(shè)置對照組,采用CC... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１?ＡＳ－ＩＶ干預(yù)后各組大鼠心臟功能檢測??心臟超聲提示：與假手術(shù)組（Ｓｈａｍ）相比，心肌梗死組（Ｍｏｄｅｌ）心室間隔和心尖收??縮程度減弱，ＬＶＥＦ和ＬＶＦＳ?

ＡＳ－ＩＶ?２０ｍｇ／ｋｇ?ＡＳ－ＩＶ?５０ｍｇ／ｋｇ??圖２各組大鼠心臟大體觀??戊巴比妥鈉麻醉大鼠，腹主動脈采血處死后離斷心臟大血血，剔除其他組織，用濾紙擦干多余水分。大體觀可見假異常，穿過ＬＡＤ未結(jié)扎縫線仍殘留于心肌內(nèi)；模型組（Ｍ死灶明顯，呈灰白色，伴有左室前壁變薄，塌陷，考慮室壁模型組稍小，心肌梗死灶較模型組有所減小，左室前壁塌后各組梗死范圍檢測??肌梗死模型成模后，各組干預(yù)２周，之后戊巴比妥鈉麻醉，后放入超低溫冰箱冷凍，取同一切面行ＴＴＣ染色觀察假手、ＡＳ－ＩＶ高劑量組的梗死范圍。??

圖３各組梗死范圍??染色后多聚甲醛固定，正常心肌活細胞線粒體內(nèi)的玻珀酸脫氫酶與ＴＴＣ發(fā)生反應(yīng)，故??呈磚紅色，梗死心肌因組織壞死脫氫酶活力喪失，故呈蒼白色。軟件評估梗死面積：白色??面積／左室總面積＝梗死面積。假手術(shù)組（Ｓｈａｍ）大鼠心肌呈磚紅色，未發(fā)現(xiàn)明顯梗死灶；??心肌梗死模型組（Ｍｏｄｅｌ）大鼠心臟左室壁變薄，室間隔増厚，考慮心肌梗死后大鼠心肌??代償所致；低劑量（ＡＳ－ＩＶ２０ｍｇ／ｋｇ）組大鼠心肌梗死面積有所減少，心室擴張程度較模型??組有所改善，而高劑量（ＡＳ－ＩＶ?５０ｍｇ／ｋｇ）可以進一步減少梗死面積及改善心室重塑。??＊＊Ｐ＜０．０１ＶＳ假手術(shù)組，＃＃Ｐ＜０．０１ＶＳ模型組。??５．各組大鼠心肌組織ＨＥ染色病理變化??將保存在多聚甲醛中的各組心肌組織進行石蠟包埋、切片，并進行Ｈ－Ｅ染色評估各組??大鼠心肌組織的病變情況。??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3075992