發(fā)布時(shí)間：2021-03-10 03:11

　　目的探討靛玉紅-3’-肟（IDM）對(duì)紅細(xì)胞的凋亡損傷影響及其可能機(jī)制。方法選擇300例健康獻(xiàn)血志愿者為研究對(duì)象,分別留取新鮮血樣,設(shè)立實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組和空白組,其中實(shí)驗(yàn)組包含不同濃度梯度的IDM（等比濃度梯度設(shè)立為3μM,6μM,12μM）。常規(guī)分離新鮮標(biāo)本得壓積紅細(xì)胞,各組配制成0.4%濃度的紅細(xì)胞懸液,并按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求分別加入不同濃度的IDM、DMSO等孵育24h。孵育后經(jīng)Annexin V-FITC熒光探針標(biāo)記,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞體積大小,用共聚焦激光掃描顯微鏡觀察并拍攝熒光標(biāo)記紅細(xì)胞形態(tài);再用Fluo 3-AM作為熒光探針標(biāo)記鈣離子,通過(guò)檢測(cè)熒光強(qiáng)度反映胞內(nèi)鈣離子濃度;然后用熒光探針DCFH-DA標(biāo)記胞內(nèi)活性氧類,通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化反映胞內(nèi)活性氧類的含量;最后用間接法檢測(cè)胞膜神經(jīng)酰胺含量。另外,于12μM IDM孵育24h的紅細(xì)胞中,分別設(shè)立能量缺乏、加入一定濃度的離子霉素（ionomycin）及叔丁基過(guò)氧化氫（t-BHP）等實(shí)驗(yàn)條件,觀察比較紅細(xì)胞凋亡是否被抑制及其程度。結(jié)果與空白、對(duì)照組比較,IDM降低了磷脂酰絲氨酸外翻的紅細(xì)胞比率（即凋亡率）(^**... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

IDM對(duì)紅細(xì)胞磷脂酰絲氨酸外翻率（即凋亡率）的影響

圖 2 IDM 對(duì)紅細(xì)胞體積大小的影響A. 最具代表性直方圖示紅細(xì)胞在孵育液中不含 IDM（黑線）及含有 12μM IDM（紅線）孵育 24h 后紅細(xì)胞體積的變化。B. 紅細(xì)胞體積大�。ㄇ跋蛏⑸浔硎荆┰诳瞻捉M（不含 IDM，白條圖）與實(shí)驗(yàn)組（3-12μM IDM，黑條圖）Ringer 溶液中孵育 24h 后的比較。為了更方便比較，還顯示了溶劑組（DMSO）的紅細(xì)胞體積大�。ㄇ跋蛏⑸浔硎荆ɑ覘l圖）。Fig2 結(jié)果：在Ringer林格氏孵育液中含有或不含有IDM（3-12μM IDM）的情況下孵育24h后，紅細(xì)胞體積（前向散射）未有明顯的差異。Figure 2. Effect of IDM on erythrocyte forward scatter.(A) A representative histogram of forward scatter of erythrocytes following exposure

(B) Arithmetic means ± SEM (n = 9) of the erythrocyte forward scatter followingincubation for 24 h in Ringer solution without (white bar) or with (black bars) IDM(3–12μM); N.S indicates no significant difference from the absence of IDM(ANOVA).3.3 靛玉紅-3'-肟（IDM）對(duì)紅細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度變化


本文編號(hào)：3073956