發(fā)布時(shí)間：2021-03-09 19:43

　　目的:本課題組在前期行體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)了片仔癀可以通過抑制骨肉瘤細(xì)胞中ABCB1、ABCG2的表達(dá),有效抑制骨肉瘤的生長并逆轉(zhuǎn)其耐藥性的基礎(chǔ)上,通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討片仔癀對人骨肉瘤CSCs裸鼠移植瘤的作用及對ABCB1、ABCG2蛋白表達(dá)的影響。方法:1、人骨肉瘤腫瘤干細(xì)胞移植瘤模型的建立對數(shù)期MG63/ADM細(xì)胞胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,采用無血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)的方式,連續(xù)傳代3次,富集MG63/ADM細(xì)胞中的腫瘤干細(xì)胞。48只裸鼠皮下接種腫瘤干細(xì)胞建立人骨肉瘤腫瘤干細(xì)胞移植瘤模型。依照隨機(jī)數(shù)字表法將其分為對照組、阿霉素組、片仔癀組、片仔癀與阿霉素聯(lián)合組。2、測量瘤體體積及稱重,計(jì)算腫瘤體積及重量抑制率末次給藥24h后頸椎脫臼處死裸鼠,剝離裸鼠皮下瘤體,測量瘤體體積及稱重,計(jì)算腫瘤體積、重量抑制率。3、HE觀察瘤體病理情況使用HE染色,在光鏡下觀察各組瘤體病理情況。4、免疫組織組化學(xué)法（SP法）及western blot檢測瘤體內(nèi)ABCB1、ABCGG2的表達(dá)。采用免疫組織化學(xué)法檢測不同組間瘤體中ABCB1、ABCG2陽性積分光密度的表達(dá)情況;Western blot法檢測不同組間瘤體中... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞
引言
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞株
        1.2 實(shí)驗(yàn)動物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
        1.5 主要試劑配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 骨肉瘤干細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 骨肉瘤腫瘤干細(xì)胞裸鼠移植瘤模型建立及分組
        2.3 標(biāo)本采集及計(jì)算腫瘤抑制率
        2.4 瘤體包埋、HE染色觀察瘤體病理情況
        2.5 免疫組化檢測移植瘤內(nèi)ABCB1、ABCG2的表達(dá)情況
        2.6 Westen blot檢測瘤體內(nèi)ABCB1、ABCG2的表達(dá)
        2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2.8 技術(shù)路線圖
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 片仔癀對骨肉瘤腫瘤干細(xì)胞裸鼠移植瘤體積及重量的影響
        3.2 HE下觀察骨肉瘤細(xì)胞的病理情況
        3.3 免疫組化檢測片仔癀對裸鼠移植瘤ABCB1、ABCG2表達(dá)的影響
        3.4 western blot檢測片仔癀對裸鼠移植瘤ABCB1、ABCG2表達(dá)的影響
    4 討論
        4.1 手術(shù)聯(lián)合新輔化療治療骨肉瘤
        4.2 腫瘤干細(xì)胞與骨肉瘤耐藥的關(guān)系
        4.3 ABCB1、ABCG2與骨肉瘤干細(xì)胞及其耐藥的關(guān)系
        4.4 中醫(yī)藥治療腫瘤多藥耐藥
        4.5 片仔癀在骨肉瘤治療的應(yīng)用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 骨肉瘤耐藥機(jī)制及逆轉(zhuǎn)耐藥策略
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[6]骨肉瘤干細(xì)胞及其多藥耐藥性的體內(nèi)外相關(guān)研究[D]. 司萌.山東大學(xué) 2013
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碩士論文
[1]片仔癀干預(yù)骨肉瘤干細(xì)胞ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白逆轉(zhuǎn)耐藥的機(jī)制研究[D]. 林海英.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]人甲狀腺癌中腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[D]. 譚燦亮.南方醫(yī)科大學(xué) 2015
[3]片仔癀逆轉(zhuǎn)大腸癌多藥耐藥的作用機(jī)制研究[D]. 沈阿靈.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014



本文編號：3073370