表沒食子兒茶素沒食子酸酯對柔紅霉素與人血清白蛋白相互作用影響的光譜學及細胞毒性研究
發(fā)布時間：2021-03-07 22:32
茶多酚與抗腫瘤藥物聯(lián)用具有增效、減毒以及逆轉耐藥性的作用,可作為生化調節(jié)劑應用于臨床。通過熒光光譜、紫外-可見吸收光譜、圓二色光譜和動態(tài)光散射研究了柔紅霉素（DNR）與人血清白蛋白（HSA）在模擬生理條件下的相互作用以及表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）對DNR與HSA結合過程的影響。通過MTT法測定了DNR單一藥物、 EGCG+DNR組合藥物及其與HSA的復合物對人宮頸癌HeLa細胞系的細胞毒性。熒光猝滅結果與紫外-可見吸收差譜表明DNR與HSA之間形成靜態(tài)復合物。由熒光數(shù)據擬合得到猝滅常數(shù)、結合常數(shù)、結合位點數(shù)、焓變和熵變。正的焓變和熵變表明DNR與HSA的結合過程主要為熵驅動,且疏水作用為結合過程的主要驅動力。位點標記競爭實驗結合同步熒光光譜表明, DNR主要結合在HSA的IIA結構域,并且更接近色氨酸殘基。在HSA+EGCG+DNR三元體系中,建立了三元體系的熒光數(shù)據處理模型,并用Matlab擬合得到EGCG存在下DNR與HSA相互作用的結合位點數(shù)與結合常數(shù)均明顯減小,表明EGCG的存在降低了DNR與HSA的親和力。此外,在EGCG存在下, DNR與HSA作用的結合常數(shù)隨著溫...
【文章來源】：光譜學與光譜分析. 2020,40(06)北大核心
【文章頁數(shù)】：7 頁
【部分圖文】：
DNR (a)和EGCG (b)的分子結構圖
式(1)中, F0和F分別為加入猝滅劑前后HSA的熒光強度, KSV為猝滅常數(shù), kq為猝滅速率常數(shù), τ0為HSA的熒光壽命, 約為10-8 s[8], [Q]為猝滅劑的濃度。不同溫度下的F0/F對DNR濃度作圖均呈良好線性關系, 所得猝滅速率常數(shù)列于表1中。 由表1可見, 猝滅速率常數(shù)kq數(shù)量級均為1012, 遠遠大于各類猝滅劑對生物大分子的最大動態(tài)猝滅速率常數(shù)2.0×1010 L·mol-1·s-1, 并且可以看出在298.2, 302.2, 306.2和310.2 K下, 隨著溫度的升高HSA的猝滅常數(shù)減小, 由此可以推測出DNR與HSA形成復合物, 此過程為靜態(tài)猝滅過程。
紫外吸收光譜法用于DNR與HSA結合機制的驗證。 不同濃度DNR對HSA紫外吸收光譜的影響如圖3所示, 隨著DNR濃度的增加, HSA吸光度增大, 表明DNR與HSA之間形成復合物。 另外對于靜態(tài)猝滅來說, 蛋白的吸收強度由于生成復合物而改變, 動態(tài)猝滅則不會變化。 圖3中插圖所示為紫外差譜圖, 圖中(HSA+DNR)-DNR吸收譜線與HSA的吸收譜線存在差異, 該結果進一步表明DNR與HSA相互作用為靜態(tài)猝滅過程[9]。表1 不同溫度下DNR與HSA相互作用的猝滅速率常數(shù)、 結合常數(shù)、 結合位點數(shù)和吉布斯自由能變Table 1 Quenching rate constants, binding constants, the number of binding sites and Gibbs free energy changes for the interaction of DNR with HSA at different temperatures T/K kq/(×1012 L·mol-1·s-1) Ka/(×104 L·mol-1) n ΔG0/(kJ·mol-1) 298.2 1.76±0.02 2.60±0.06 1.04±0.02 -25.19±0.06 302.2 1.72±0.01 3.21±0.33 1.06±0.01 -26.05±0.26 306.2 1.64±0.02 3.97±0.30 1.07±0.01 -26.94±0.19 310.2 1.61±0.01 4.93±0.50 1.10±0.01 -27.85±0.26
【參考文獻】：
期刊論文
[1]桑色素與血清白蛋白相互作用熱力學行為[J]. 謝文,何歡,董家新,郭清蓮,劉義. 物理化學學報. 2019(07)
[2]人參皂苷Rh2與血清白蛋白相互作用立體選擇性的光譜及分子對接研究[J]. 李紅,許茜,鄭曉麗,許卉,陳庚,孟慶國. 光譜學與光譜分析. 2018(12)
[3]表沒食子兒茶素沒食子酸酯全乙�；苌飳θ峒t霉素致小鼠心臟毒性的影響[J]. 李麗,唐燕霞,歐冰凝,周煥第,陳潤麗,劉布鳴,梁鋼. 中國藥理學通報. 2014(03)
[4]茶多酚的分子作用靶點及其在抗腫瘤藥物實驗治療中的作用[J]. 陳淑珍,甄永蘇. 藥學學報. 2013(01)
[5]百草枯與牛血清白蛋白結合作用的熒光光譜[J]. 顏承農,張華新,劉義,梅平,李克華,童金強. 化學學報. 2005(18)
本文編號：3069918
【文章來源】：光譜學與光譜分析. 2020,40(06)北大核心
【文章頁數(shù)】：7 頁
【部分圖文】：
DNR (a)和EGCG (b)的分子結構圖
式(1)中, F0和F分別為加入猝滅劑前后HSA的熒光強度, KSV為猝滅常數(shù), kq為猝滅速率常數(shù), τ0為HSA的熒光壽命, 約為10-8 s[8], [Q]為猝滅劑的濃度。不同溫度下的F0/F對DNR濃度作圖均呈良好線性關系, 所得猝滅速率常數(shù)列于表1中。 由表1可見, 猝滅速率常數(shù)kq數(shù)量級均為1012, 遠遠大于各類猝滅劑對生物大分子的最大動態(tài)猝滅速率常數(shù)2.0×1010 L·mol-1·s-1, 并且可以看出在298.2, 302.2, 306.2和310.2 K下, 隨著溫度的升高HSA的猝滅常數(shù)減小, 由此可以推測出DNR與HSA形成復合物, 此過程為靜態(tài)猝滅過程。
紫外吸收光譜法用于DNR與HSA結合機制的驗證。 不同濃度DNR對HSA紫外吸收光譜的影響如圖3所示, 隨著DNR濃度的增加, HSA吸光度增大, 表明DNR與HSA之間形成復合物。 另外對于靜態(tài)猝滅來說, 蛋白的吸收強度由于生成復合物而改變, 動態(tài)猝滅則不會變化。 圖3中插圖所示為紫外差譜圖, 圖中(HSA+DNR)-DNR吸收譜線與HSA的吸收譜線存在差異, 該結果進一步表明DNR與HSA相互作用為靜態(tài)猝滅過程[9]。表1 不同溫度下DNR與HSA相互作用的猝滅速率常數(shù)、 結合常數(shù)、 結合位點數(shù)和吉布斯自由能變Table 1 Quenching rate constants, binding constants, the number of binding sites and Gibbs free energy changes for the interaction of DNR with HSA at different temperatures T/K kq/(×1012 L·mol-1·s-1) Ka/(×104 L·mol-1) n ΔG0/(kJ·mol-1) 298.2 1.76±0.02 2.60±0.06 1.04±0.02 -25.19±0.06 302.2 1.72±0.01 3.21±0.33 1.06±0.01 -26.05±0.26 306.2 1.64±0.02 3.97±0.30 1.07±0.01 -26.94±0.19 310.2 1.61±0.01 4.93±0.50 1.10±0.01 -27.85±0.26
【參考文獻】：
期刊論文
[1]桑色素與血清白蛋白相互作用熱力學行為[J]. 謝文,何歡,董家新,郭清蓮,劉義. 物理化學學報. 2019(07)
[2]人參皂苷Rh2與血清白蛋白相互作用立體選擇性的光譜及分子對接研究[J]. 李紅,許茜,鄭曉麗,許卉,陳庚,孟慶國. 光譜學與光譜分析. 2018(12)
[3]表沒食子兒茶素沒食子酸酯全乙�；苌飳θ峒t霉素致小鼠心臟毒性的影響[J]. 李麗,唐燕霞,歐冰凝,周煥第,陳潤麗,劉布鳴,梁鋼. 中國藥理學通報. 2014(03)
[4]茶多酚的分子作用靶點及其在抗腫瘤藥物實驗治療中的作用[J]. 陳淑珍,甄永蘇. 藥學學報. 2013(01)
[5]百草枯與牛血清白蛋白結合作用的熒光光譜[J]. 顏承農,張華新,劉義,梅平,李克華,童金強. 化學學報. 2005(18)
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