目的芪藤消濁顆粒是國家級名老中醫(yī)曹恩澤根據(jù)慢性腎小球腎炎（CGN）“脾虛、濕停、血瘀”的基本病機,提出“健脾、行水、化瘀”的治法,創(chuàng)制的特色中藥制劑,臨床主治CGN療效確切,但其具體的分子學機制尚不清楚。本研究旨在研究芪藤消濁顆粒對Syk/Ras/c-Fos信號通路的調(diào)控作用,探討芪藤消濁顆粒防治CGN的潛在分子學機制。方法1芪藤消濁顆粒對ADR誘導的CGN大鼠Syk/Ras/c-Fos信號通路的調(diào)控作用采用尾靜脈注射阿霉素（ADR）復(fù)制CGN大鼠模型,取造模成功大鼠分為模型組、芪藤消濁顆粒不同劑量組（21.6、10.8、5.4 g/kg）組和黃葵膠囊（1.0 g/kg）組,每組10只,另取10只正常大鼠作為對照組。除模型組外,其余各組給藥30天后,HE染色觀察C GN大鼠腎小球病變情況,測定24h尿蛋白、N-乙酰氨基糖苷酶（NAG）含量和血清中尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、胱抑素（Cys-c）和視黃醇結(jié)合蛋白（RBP）的含量,RT-q PCR檢測Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2和c-Fos m RNA表達情況,免疫組化法和Western blot（WB）法檢測p-Syk... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學安徽省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略詞（Abbreviation）
前言
實驗一 芪藤消濁顆粒對阿霉素誘導的慢性腎小球腎炎大鼠Syk/Ras/c-Fos信號通路的調(diào)控作用
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥物
        1.3 試劑
        1.4 儀器
    2 實驗方法
        2.1 慢性腎小球腎炎動物模型的建立及給藥方案
        2.2 大鼠的一般形態(tài)學觀察
        2.3 大鼠的體質(zhì)量檢測
        2.4 大鼠 24 h尿蛋白含量和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）活力的測定
        2.5 大鼠血清中尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、視黃醇結(jié)合蛋白（RBP）、胱抑素（Cys-c）含量測定
        2.6 大鼠腎臟指數(shù)的測定
        2.7 大鼠腎皮質(zhì)病理組織學觀察
        2.8 免疫組化法檢測CGN大鼠腎皮質(zhì)p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-Fos蛋白的表達
        2.9 RT-qPCR檢測CGN大鼠腎皮質(zhì)Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-Fos mRNA的表達
        2.10 蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測CGN大鼠腎皮質(zhì)p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-Fos蛋白的表達
    3 統(tǒng)計學分析
    4 結(jié)果
        4.1 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠行為狀態(tài)的影響
        4.2 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠體質(zhì)量的影響
        4.3 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠 24h尿蛋白和NAG的影響
        4.4 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠BUN、Scr、Cys-c、RBP的影響
        4.5 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠臟器指數(shù)的影響
        4.6 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠腎皮質(zhì)病理組織學的影響
        4.7 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠腎皮質(zhì)Syk mRNA和p-Syk蛋白表達的影響
        4.8 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠腎皮質(zhì)Ras mRNA和蛋白表達的影響
        4.9 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠腎皮質(zhì)MEK1/2 mRNA和p-MEK1/2 蛋白表達的影響
        4.10 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠腎皮質(zhì)ERK1/2 mRNA和p-ERK1/2 蛋白表達的影響
        4.11 芪藤消濁顆粒對CGN大鼠腎皮質(zhì)c-Fos mRNA和蛋白表達的影響
    5 討論
        5.1 動物模型的選擇依據(jù)
        5.2 腎功能指標與CGN
        5.3 CGN與Syk/Ras/c-Fos信號通路
實驗二 芪藤消濁顆粒含藥血清對LPS誘導的腎小球系膜細胞中Syk/Ras/c-Fos信號通路的調(diào)控作用
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥物
        1.3 細胞株
        1.4 試劑
        1.5 儀器
        1.6 溶液配制
    2 實驗方法
        2.1 芪藤消濁顆粒含藥血清的制備
        2.2 腎小球系膜細胞的培養(yǎng)
        2.3 MTT法篩選芪藤消濁顆粒含藥血清最佳濃度和最佳作用時間
        2.4 細胞實驗分組及干預(yù)
        2.5 RT-qPCR檢測Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-Fos mRNA的表達
        2.6 WB檢測p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-Fos蛋白的表達
    3 統(tǒng)計學分析
    4 結(jié)果
        4.1 芪藤消濁顆粒含藥血清最佳濃度和最佳作用時間的篩選
        4.2 芪藤消濁顆粒含藥血清對腎小球系膜細胞中Syk mRNA和p-Syk蛋白表達的影響
        4.3 芪藤消濁顆粒含藥血清對腎小球系膜細胞中Ras mRNA和蛋白表達的影響
        4.4 芪藤消濁顆粒含藥血清對腎小球系膜細胞中MEK1/2mRNA和p-MEK1/2 蛋白表達的影響
        4.5 芪藤消濁顆粒含藥血清對腎小球系膜細胞中ERK1/2mRNA和p-ERK1/2 蛋白表達的影響
        4.6 芪藤消濁顆粒含藥血清對腎小球系膜細胞中c-Fos mRNA和蛋白表達的影響
    5 討論
        5.1 血清藥理學
        5.2 芪藤消濁顆粒對GMCs增殖的影響
        5.3 芪藤消濁顆粒對Syk/Ras/c-Fos信號通路的影響
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
個人簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3063416