目的:觀察鹽酸小檗堿對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞釋放外泌體的干預(yù)作用,探討其對(duì)癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移能力的影響。方法:將HeLa細(xì)胞分為對(duì)照組和低、中、高劑量鹽酸小檗堿組,分別采用0、10、20和40mg·L^-1鹽酸小檗堿干預(yù)HeLa細(xì)胞24h,高速離心提取外泌體,Western blotting法檢測(cè)外泌體標(biāo)志物CD81和CD63及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白質(zhì)絲氨酸蘇氨酸激酶（Akt）信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平,MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞體外生長(zhǎng)抑制率,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移率,Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)穿膜細(xì)胞數(shù)。結(jié)果:與對(duì)照組比較,低、中和高劑量鹽酸小檗堿組細(xì)胞外泌體中外泌體標(biāo)志物CD81和CD63蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.05）,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率明顯升高（P<0.05）,細(xì)胞遷移率和穿膜細(xì)胞數(shù)明顯降低（P<0.05）,細(xì)胞中PI3K、Akt和磷酸化Akt （p-Akt）蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.05）。與低劑量鹽酸小檗堿組比較,中和高劑量鹽酸小檗堿組細(xì)胞外泌體中CD81和CD63蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.05）,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,46(04)北大核心

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【部分圖文】：

各組HeLa細(xì)胞外泌體中CD81和CD63蛋白表達(dá)電泳圖

宮頸癌是女性常見(jiàn)惡性腫瘤，在中國(guó)具有高發(fā)病率和死亡率[9]。近年來(lái)研究[10-11]顯示：鹽酸小檗堿可抑制腫瘤細(xì)胞增殖，如乳腺細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞等。本研究結(jié)果表明：隨著鹽酸小檗堿劑量的增加，宮頸癌HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率明顯升高，具有劑量依賴(lài)性，說(shuō)明鹽酸小檗堿可明顯抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)，與有關(guān)研究[12-13]結(jié)果一致。腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)涉及多因素、多步驟和多機(jī)制，是目前研究的重點(diǎn)。本研究結(jié)果顯示：不同劑量鹽酸小檗堿干預(yù)后，宮頸癌HeLa細(xì)胞的遷移、侵襲能力與對(duì)照組比較均明顯降低，且具有劑量依賴(lài)性，與李娜等[14]報(bào)道的鹽酸小檗堿具有抑制宮頸癌侵襲能力的結(jié)果一致。圖4 各組HeLa細(xì)胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表達(dá)電泳圖

圖2 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組HeLa細(xì)胞遷移能力外泌體是近年來(lái)熱門(mén)生物學(xué)研究領(lǐng)域之一，其對(duì)腫瘤的遷移和侵襲有明顯影響[15-16]。研究[17]顯示：外泌體中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白能夠促進(jìn)癌細(xì)胞的遷移能力。本研究采用超速離心法分離宮頸癌HeLa細(xì)胞外泌體，Western blotting法檢測(cè)結(jié)果顯示：不同劑量鹽酸小檗堿組癌細(xì)胞外泌體中CD81和CD63蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組比較明顯降低，且具有劑量依賴(lài)性，說(shuō)明鹽酸小檗堿能夠抑制宮頸癌細(xì)胞外泌體，從而降低細(xì)胞遷移和侵襲能力。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]糖尿病小鼠血清外泌體在H9C2心肌細(xì)胞損傷調(diào)控中的作用及機(jī)制[J]. 侯智為,李玉瑩,宋海旭,李佳蔭,邢瑞楠,劉丹,劉晶,閆承慧,田孝祥.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2019(10)
[2]腫瘤外泌體在微環(huán)境細(xì)胞間通訊中的作用及其作為腫瘤標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J]. 王留軍,曾韜,王越.  臨床檢驗(yàn)雜志. 2019(05)
[3]宮頸癌病情進(jìn)展過(guò)程中PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的變化及靶基因的探究[J]. 陳鳳霞.  海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(19)
[4]肝癌細(xì)胞分泌的外泌體microRNA-103通過(guò)靶向連接蛋白增加血管通透性并促進(jìn)癌轉(zhuǎn)移[J]. Fang JH,朱澤民,劉飛,郭子依.  臨床肝膽病雜志. 2018(05)
[5]宮頸癌細(xì)胞分泌外泌體介導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化提高癌前細(xì)胞侵襲能力的體外研究[J]. 易紅艷,周琛斐,梁莉,王薇,魏文斐,陳曉靜,吳湘光,嚴(yán)瑞明,劉國(guó)炳,陳春林,鐘梅,余艷紅.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2017(03)
[6]2004～2011年上海市盧灣區(qū)戶(hù)籍人口常見(jiàn)婦科惡性腫瘤發(fā)病和死亡趨勢(shì)分析[J]. 周建軍,傅忠星,王燁菁,高淑娜,王玨,杜琰.  中國(guó)腫瘤. 2016(11)
[7]鹽酸小檗堿對(duì)MCF-7乳腺癌小鼠體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 曾智豪,陳小伍,朱達(dá)堅(jiān),羅仲燃,楊敏.  河北醫(yī)學(xué). 2016(06)
[8]白藜蘆醇通過(guò)Pi3K/AKT通路抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖和遷移[J]. 孫龍和,夏建國(guó),錢(qián)春華,湯民,錢(qián)明蘭.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2016(17)
[9]外泌體與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)研究進(jìn)展[J]. 王超群,孫豪庭,欽倫秀.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(01)
[10]鹽酸小檗堿對(duì)人宮頸癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)移侵襲研究[J]. 李娜,尹艷英,劉錦輝.  中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2014(03)



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