目的:以阿膠為原料,經(jīng)蛋白酶酶解和氯化亞鐵（FeCl₂·4H₂O）處理,制備具有補血活性的阿膠肽-鐵螯合物,并對阿膠肽-鐵螯合物進行初步藥效學(xué)研究及初步穩(wěn)定性考察。方法:以水解度、分子量分布為指標(biāo),優(yōu)選阿膠肽的酶解工藝;采用放血法致小鼠血虛模型及環(huán)磷酰胺致小鼠白細胞減少模型,考察阿膠及阿膠肽的補血升白作用;以螯合率、分子量為指標(biāo),考察阿膠肽-鐵螯合物的螯合工藝;采用缺鐵性貧血小鼠模型,考察阿膠肽-鐵螯合物的補血效果;采用影響因素、加速法進行阿膠肽-鐵螯合物的初步穩(wěn)定性試驗研究。結(jié)果:阿膠肽-鐵螯合液的制備工藝:取阿膠烊化液,調(diào)節(jié)pH=7,加入5%菠蘿蛋白酶,在50℃、轉(zhuǎn)速45⁵0 r/min、酶解2 h,調(diào)節(jié)pH=7.5,加入2%胰蛋白酶,在40℃、轉(zhuǎn)速45⁵0 r/min、酶解3 h,煮沸15 min,冷卻至室溫,低溫冷藏（0⁴℃）6 h,4500 r/min離心10 min,取上清液,加入0.1%的抗壞血酸,調(diào)節(jié)pH=5,按每1 g阿膠加入10 mgFe²⁺

【文章來源】：山東中醫(yī)藥大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
提要
Abstract
引言
課題思路圖
第一章 緒論
    1 阿膠的研究進展
        1.1 阿膠的化學(xué)成分
        1.2 阿膠的藥理作用
    2 生物活性肽-鐵螯合物的研究進展
        2.1 生物活性肽
        2.2 微量元素-鐵
        2.3 肽-鐵螯合物
    3 缺鐵性貧血的研究進展
        3.1 中醫(yī)學(xué)對缺鐵性貧血的認識
        3.2 缺鐵性貧血的病因病機
        3.3 補鐵劑的應(yīng)用現(xiàn)狀
第二章 阿膠酶解工藝研究
    1 儀器與材料
        1.1 實驗儀器
        1.2 材料與試劑
    2 阿膠酶解液質(zhì)量考察
        2.1 含水量測定
        2.2 得膏率的測定
        2.3 原子吸收光度法測定阿膠中的微量元素
        2.4 水解度的測定
        2.5 總肽含量測定
    3 酶種類的篩選
        3.1 酶種類篩選方法
        3.2 酶種類篩選結(jié)果
    4 阿膠酶解液制備工藝思路
    5 阿膠酶解工藝單因素考察
        5.1 加酶量對酶解工藝的影響實驗
        5.2 溫度對酶解工藝的影響實驗
        5.3 時間對酶解工藝的影響實驗
        5.4 pH對酶解工藝的影響實驗
    6 阿膠酶解質(zhì)量考察結(jié)果
        6.1 水分測定結(jié)果
        6.2 得膏率測定結(jié)果
        6.3 微量元素測定結(jié)果
        6.4 總肽含量測定結(jié)果
    7 本章小結(jié)
第三章 阿膠酶解液相對分子質(zhì)量分布及補血升白的作用對比研究
    1 儀器與材料
        1.1 儀器與試劑
        1.2 動物
    2 實驗方法及標(biāo)準曲線的建立
        2.1 色譜條件
        2.2 標(biāo)記物溶液的制備
        2.3 標(biāo)準曲線的測定
    3 供試品的制備及分子量測定
        3.1 供試品的制備
        3.2 阿膠各酶解液分子量的測定
    4 阿膠酶解液補血升白藥理活性研究
        4.1 受試樣品的制備
        4.2 對尾部放血所致小鼠血虛模型的影響
        4.3 對環(huán)磷酰胺所致小鼠所致白細胞減少模型的影響
    5 本章小結(jié)
第四章 阿膠肽-鐵螯合物的工藝研究及中試生產(chǎn)
    1 儀器與材料
        1.1 實驗儀器
        1.2 材料與試劑
    2 阿膠肽-鐵螯合物的質(zhì)量檢查
        2.1 螯合率的測定
        2.2 阿膠肽-鐵螯合物的定性檢測—硫化鈉法
        2.3 阿膠肽-鐵總肽量測定
        2.4 阿膠肽-鐵螯合液的總氮量測定
        2.5 分子量分布測定
    3 阿膠肽-鐵螯合物的制備工藝思路
    4 阿膠肽-鐵螯合物螯合工藝優(yōu)化
        4.1 鐵源的選擇
        4.2 醇沉濃度對阿膠肽-鐵螯合率的影響實驗
2+的加入量對阿膠肽-鐵螯合率的影響實驗">        4.3 Fe²⁺的加入量對阿膠肽-鐵螯合率的影響實驗
        4.4 pH 對阿膠肽-鐵螯合率的影響實驗
        4.5 溫度對阿膠肽-鐵螯合率的影響實驗
        4.6 時間對阿膠肽-鐵螯合率的影響實驗
        4.7 阿膠肽-鐵螯合液的正交試驗工藝
    5 阿膠肽-鐵螯合物中試驗證試驗
        5.1 主要儀器與設(shè)備
        5.2 阿膠肽-鐵螯合物的制備工藝
        5.3 驗證實驗結(jié)果
    6 阿膠肽-鐵螯合物質(zhì)量考察結(jié)果
        6.1 螯合率測定結(jié)果
        6.2 螯合液定性測定結(jié)果
        6.3 螯合液的含肽量測定結(jié)果
        6.4 螯合液含氮量測定結(jié)果
        6.5 阿膠肽-鐵螯合液相對分子量分布測定結(jié)果
    7 本章小結(jié)
第五章 阿膠肽-鐵螯合物對缺鐵性貧血小鼠的初步藥效學(xué)研究
    1 儀器與材料
        1.1 實驗儀器
        1.2 實驗材料
        1.3 實驗動物
    2 供試品的制備
        2.1 阿膠原液的制備
        2.2 阿膠酶解液的制備
        2.3 阿膠肽-鐵螯合液的制備
    3 受試樣品的制備
        3.1 陽性對照藥劑量設(shè)計
        3.2 受試藥物計量設(shè)計
    4 對缺鐵性貧血小鼠模型的影響
        4.1 實驗方法
        4.2 實驗結(jié)果
    5 本章小結(jié)
第六章 阿膠肽-鐵螯合物的初步穩(wěn)定性考察
    1 穩(wěn)定性考察
        1.1 試驗內(nèi)容
        1.2 試驗方法
    2 穩(wěn)定性考察結(jié)果
結(jié)語
參考文獻
致謝
論文著作


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[5]可口革囊星蟲多肽對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[D]. 項歡.寧波大學(xué) 2014
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本文編號：3056096