目的:白鮮堿是一種從白鮮根中分離出來的天然生物堿,已被證明具有多種生物學功能,包括抗炎,抗真菌,抗血管生成和抗癌活性。然而,白鮮堿抑制腫瘤生長的機制尚不完全清楚。在本項研究中,我們探討了白鮮堿作為癌癥治療方法的有效性,并確定了其抗癌活性的潛在機制方法:1.采用分子對接試驗模擬了白鮮堿與HIF-1α或Slug之間的相互作用;2.運用蛋白免疫印跡法來檢測白鮮堿對HIF-1α、Slug蛋白表達影響;3.用免疫熒光實驗來檢測白鮮堿對HIF-1α、Slug在細胞核內(nèi)表達的影響;4.通過蛋白免疫印跡法證明白鮮堿是通過抑制HIF-1α蛋白的合成來降低HIF-1α的表達;5.采用蛋白免疫印跡法來檢測白鮮堿對mTOR/p70S6K/eIF4E和MAPK通路以及GSK-3β/Slug信號通路的影響;6.利用蛋白免疫印跡實驗和RT-PCR實驗在白鮮堿和靶向HIF-1α、Slug的siRNA處理的HCT116細胞中檢測對EMT相關蛋白在蛋白水平和mRNA水平上的影響;7.通過劃痕實驗來檢測白鮮堿對細胞遷移的影響;8.利用細胞侵襲實驗來檢測白鮮堿對細胞侵襲能力的影響;9.采用流式細胞術來檢測紫草素對細胞凋亡的影... 

【文章來源】：延邊大學吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１常氧和缺氧下ＨＩＦ－１調(diào)控機制圖??，生子（ＶＥＧＦ）、血紅素??

自動蛋白質(zhì)結(jié)構同源建模服務器ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ建立ＨＩＦ－ｌａ和Ｓｌｕｇ的三維??結(jié)構。使用Ａｕｔｏｄｏｃｋ?ｖｉｎａ?１．１．２進行分子對接研宄以探索白鮮堿與ＨＩＦ－ｌｃｉ或??Ｓｌｕｇ蛋白之間的結(jié)合模式。如圖３－１?Ａ所示白鮮堿與ＨＩＦ－ｌａ結(jié)合作用位點。??白鮮堿采用緊密構象結(jié)合ＨＩＦ－ｌａ位點。白鮮堿的ｆｕｒ〇［２，３－ｂ］喹啉支架位于疏??水袋中，被殘基Ｔｒｐｌ８９，?Ｖａｌｌ９１，?Ｇｌｙ２９８，?Ｖａｌ３２３和Ｔｙｒ３２５包圍，形成強疏水??鍵。重要的是，在白鮮堿和ＶａｌＩ９１之間觀察到氫鍵相互作用，這是ｆ－丨鮮堿和??ＨＩＦ－ｌａ之間的主要相互作用（圖３－１?Ａ）。所有這些相互作用有助于在白鮮堿與??ＨＩＦ－ｌｕ結(jié)合位點的敲定。白鮮堿與Ｓｌｕｇ結(jié)合位點的理論結(jié)合模式如圖３－１?Ｂ??所示，白鮮堿采用緊密構象結(jié)合Ｓｌｕｇ部位。在白鮮堿和Ｇｌｕ２６１之間觀察到氫??鍵相互作用，這是白鮮堿和Ｓｌｕｇ之間的主要相互作用（圖３－丨Ｂ）�？傊�??子模擬為白鮮堿和ＨＩＦ－１？或Ｓｌｕｇ之間的相互作用提供了解釋，這為進一步幵??發(fā)Ｈ１Ｆ－Ｉａ和Ｓｌｕｇ抑制劑提供了有價值的信息。??鑣??ｖ?—＊？％?０?ｉ，？ｒｓ??圖３－１白鮮堿與模擬ＨＩＦ－ｌｏｔ／Ｓｌｕｇ的分子相彳Ｉ：作用??３．?２在腫瘤細胞中白鮮

ＭＧ－１３２，單獨加入白鮮堿（］０（Ｈｉｍ〇ｌ／Ｌ），或者ＭＧ－１３２和白鮮堿（１００｜ａｎｉｏｌ／Ｌ）??共同處理細胞時為１°／。的氧氣條件，培養(yǎng)細胞］２小時后，進行核蛋丨＾１提収。??如圖３－３?Ａ所示，同在缺氧情況下，與對照組相比，加入ＭＧ－］３２處Ｍ后汙飩??２９??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]2015年浙江省腫瘤登記地區(qū)惡性腫瘤發(fā)病與死亡分析[J]. 王悠清,李輝章,龔巍巍,朱陳,陳瑤瑤,鐘節(jié)鳴,俞敏,杜靈彬.  中國腫瘤. 2019(01)
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本文編號：3044815