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從Wnt/β-catenin通路探討益氣養(yǎng)血方干預膝骨關節(jié)炎大鼠軟骨退變的機制研究

發(fā)布時間:2021-02-21 12:52
  目的從Wnt/β-catenin信號通路調控作用角度探討益氣養(yǎng)血方對大鼠膝骨關節(jié)炎(KOA)膝關節(jié)軟骨退變的影響,揭示其治療骨關節(jié)炎的部分分子機制,為客觀評價益氣養(yǎng)血方治療OA提供理論依據(jù)。方法1.采用碘乙酸鈉、木瓜蛋白酶、Ⅱ型膠原蛋白酶、手術Hulth法等方法建立KOA模型,HE染色,形態(tài)學觀察,以篩選動物模型。2.110只大鼠隨機分為益氣養(yǎng)血方低、中、高劑量組、陽性對照組、模型組、正常組及假手術組,每組15只,除正常組和假手術組,其余大鼠采用改良Hulth法構建KOA模型,假手術組僅切開關節(jié)囊,不切斷韌帶和半月板。造模成功后除正常組外分別予益氣養(yǎng)血方低劑量(1.89g/kg.d)、中劑量(3.78g/kg.d)、高劑量(7.56g/kg.d)、雙氯芬酸鈉腸溶片混懸液(4mg/kg.d)、生理鹽水(2.5ml.d)灌胃,另假手術組予生理鹽水(2.5ml.d),正常組不予任何藥物。連續(xù)給藥8周,取右膝關節(jié),進行形態(tài)學觀察,HE染色,并進行病理評分;應用實時熒光定量PCR檢測軟骨組織中β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2m RNA的表達;腹主動脈取血,ELISA法檢測... 

【文章來源】:云南中醫(yī)藥大學云南省

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
前言
第一部分 KOA模型建立與評價
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 結果
    4 小結
第二部分 益氣養(yǎng)血方通過Wnt/β-catenin信號通路對大鼠KOA軟骨退變的作用及機制研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 動物造模
        2.2 模型評價
        2.3 動物給藥
        2.4 標本制備
        2.5 檢測指標及方法
            2.5.1 形態(tài)學觀察
            2.5.2 RT-PCR檢測軟骨組織中β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2mRNA的表達
            2.5.3 ELISA法檢測血清Wnt4、Wnt5、SFRP3、DKK-1、WIF-1、Wnt3水平
        2.6 統(tǒng)計方法
    3 結果
        3.1 形態(tài)學觀察
        3.2 益氣養(yǎng)血方對KOA大鼠模型膝關節(jié)軟骨組織β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2mRNA表達的影響
        3.3 益氣養(yǎng)血方對KOA大鼠模型血清Wnt3、Wnt4、Wnt5、WIF-1、DKK-1、SFRP3的影響
    4 小結
分析與討論
結論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
附錄
研究生期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]獨活寄生湯對膝骨性關節(jié)炎患者關節(jié)液炎癥因子、療效及膝關節(jié)功能狀況的影響分析[J]. 蘆丹,汪亞群,孫迪.  中華中醫(yī)藥學刊. 2017(04)
[2]基于分子對接的獨活寄生湯治痿和治痹藥效物質基礎研究[J]. 鄭春松,嚴培晶,付長龍,葉蕻芝,吳廣文,李西海,劉獻祥.  風濕病與關節(jié)炎. 2017(03)
[3]獨活寄生湯對膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者關節(jié)功能及血清炎性因子的影響[J]. 陳卓.  中國中醫(yī)藥科技. 2017(02)
[4]淫羊藿苷對成骨細胞成骨分化的影響及Wnt/-catenin信號系統(tǒng)的關系研究[J]. 涂艷,熊莉娜,柳湘潔,雷超,李凝旭,張瑞蕓.  中國中醫(yī)急癥. 2017(03)
[5]黃芪甲苷對Wnt/β-catenin信號通路活化的人滑膜及軟骨細胞共培養(yǎng)體系相關因子的調控作用[J]. 王德剛,許傳勇,姜玉祥,闞衛(wèi)兵,肖志鋒,姚麗,劉婉,謝殿洪,湯豪,張玉婷.  廣東醫(yī)學. 2017(03)
[6]骨碎補總黃酮對骨質疏松癥大鼠BMP-2蛋白表達及血清骨鈣素水平的影響[J]. 黃松,陳敬有,高皓.  中國當代醫(yī)藥. 2017(04)
[7]針灸聯(lián)合獨活寄生湯治療膝關節(jié)骨性關節(jié)炎療效觀察及對微炎性反應指標的影響[J]. 任景,李濤,于苗,智勇.  世界中醫(yī)藥. 2016(10)
[8]獨活寄生湯對膠原性關節(jié)炎大鼠膝關節(jié)軟骨細胞退變的干預作用[J]. 陳朝蔚,鄭潔,楊沛林,周樹云,楊梅,戴琪萍.  上海中醫(yī)藥大學學報. 2016(06)
[9]獨活寄生湯治療膝關節(jié)骨性關節(jié)炎臨床療效及對膝關節(jié)液炎癥因子的影響[J]. 楊劍標.  河北中醫(yī). 2016(08)
[10]WNT信號通路抑制因子-1和β連環(huán)蛋白在腎透明細胞癌中的表達及臨床意義[J]. 李波,宋永勝,張超,司青樂.  疑難病雜志. 2016(07)

博士論文
[1]鹿茸歸經(jīng)靶向調控骨關節(jié)炎TGF-β/Smads信號通路機制研究[D]. 孫志濤.廣州中醫(yī)藥大學 2013

碩士論文
[1]骨性關節(jié)炎患者膝關節(jié)等速測試與Q角測量研究[D]. 程亞博.成都體育學院 2012



本文編號:3044372

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