目的腫瘤疾病是一種嚴重危害人類健康的疾病。美洲大蠊活性部位C-Ⅱ 3在細胞實驗和動物實驗方面都表現出良好的細胞毒和腫瘤抑制活性;潰瘍性結腸炎具有病程遷移、易反復發(fā)作、癌變傾向等特點,被世界衛(wèi)生組織列為現代難治疾病之一。同樣源于美洲大蠊的活性部位TF在整體動物實驗中顯示了對潰瘍性結腸炎的治療有良好的效果。本課題以美洲大蠊粗浸膏為實驗原料,分別對抗腫瘤肽類活性部位C- Ⅱ3和抗?jié)冃越Y腸炎活性部位TF進行化學成分研究,并探討其主要成分肽類物質的分離純化方法,為其后續(xù)純化工藝優(yōu)化和藥效學評價提供參考和物質基礎。方法采用了系統(tǒng)分離純化方法,探索抗腫瘤活性部位CⅡ-3中多肽物質的最佳分離純化方案,包括:采用電泳方法對C-Ⅱ3進行實驗,初步確定樣品分子量區(qū)間;采用凝膠色譜法對樣品C-Ⅱ1 3進行實驗,探索分離樣品C-Ⅱ 3使用的凝膠色譜填料及其分離條件;將葡聚糖凝膠初步分離的樣品進行脫鹽處理,采用離子交換柱進行試驗,探索其最佳分離純化條件;采用反相高壓液相色譜對樣品C - Ⅱ 3用葡聚糖凝膠分離后的組分再次分離,研究樣品反相高壓液相的分離工藝。先采用茚三酮顯色法和福林酚法分別測定美洲大蠊抗?jié)冃越Y... 

【文章來源】：大理大學云南省

【文章頁數】：90 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ｃ－ＩＩ?３在分離膠濃度為１２％，濃縮膠濃度為３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??

Ｃ－Ｉｔ３（ｔＤＴＴ）?Ｃ－ＩＩ３（不含?ＤＴＴ）??圖１－３?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度為１５％，濃縮膠濃度為３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??由圖１－３可得，在考馬斯亮藍Ｒ－２５０的染色條件下，即使上樣濃度增加一倍??也沒有較大分子量的蛋白多肽條帶顯出，含有ＤＴＴ的樣品和不含ＤＴＴ的樣品也??保持一致。??圖１－２和圖１－３均表明，樣品Ｃ－ＩＩ?３的分子量大部分都在ｌＯＫＤａ以下，僅??有很少量的蛋白多肽分子量在２５ＫＤａ左右，這個結果顯示樣品可以用反相高??壓液相色譜進行分離而不會引起蛋白多肽得結構變化，從而導致樣品失活。但??此結果并不足確定用來進行分離純化實驗的葡聚糖凝膠，如需進一步確定樣品??多肽分子量區(qū)間，就要運用Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳體系。??２０．１ＫＤ３?ｎｍｍ??１４．４ＫＤａ?—??７．８ＫＤａ??５．８ＫＤａ??３．３ＫＤａ??Ｍａｒｋｅｒ?粗浸音?Ｃ－ＩＩ３??圖１－４?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度２０％，間隙膠濃度為１０％，濃縮膠濃度為３．５％的??Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?電泳圖??樣品上樣量為２０ＵＬ

?ｉ〇ｉｉｔ??Ｃ－Ｉｔ３（ｔＤＴＴ）?Ｃ－ＩＩ３（不含?ＤＴＴ）??圖１－３?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度為１５％，濃縮膠濃度為３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??由圖１－３可得，在考馬斯亮藍Ｒ－２５０的染色條件下，即使上樣濃度增加一倍??也沒有較大分子量的蛋白多肽條帶顯出，含有ＤＴＴ的樣品和不含ＤＴＴ的樣品也??保持一致。??圖１－２和圖１－３均表明，樣品Ｃ－ＩＩ?３的分子量大部分都在ｌＯＫＤａ以下，僅??有很少量的蛋白多肽分子量在２５ＫＤａ左右，這個結果顯示樣品可以用反相高??壓液相色譜進行分離而不會引起蛋白多肽得結構變化，從而導致樣品失活。但??此結果并不足確定用來進行分離純化實驗的葡聚糖凝膠，如需進一步確定樣品??多肽分子量區(qū)間，就要運用Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳體系。??２０．１ＫＤ３?ｎｍｍ??１４．４ＫＤａ?—??７．８ＫＤａ??５．８ＫＤａ??３．３ＫＤａ??Ｍａｒｋｅｒ?粗浸音?Ｃ－ＩＩ３??圖１－４?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度２０％


本文編號：3026034