第一部分目的:鞘氨醇激酶（sphingosine kinases,SphKs）是生物體內(nèi)催化鞘氨醇（sphingosine,Sp）并將其轉(zhuǎn)化為生物活性物質(zhì)1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）的關(guān)鍵酶。SphKs包含SphK1和SphK2兩個(gè)亞型,調(diào)控S1P/神經(jīng)酰胺（ceramide,Cer）的動(dòng)態(tài)平衡,其在生物體內(nèi)表達(dá)及活性的變化與多種疾病密切相關(guān)。目前SphK2在非酒精性脂肪肝（Non Alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD）疾病中的具體作用及相關(guān)分子機(jī)制尚不明確。本課題旨在探究SphK2在高脂飲食（high-fat diet,HFD）誘導(dǎo)小鼠肝臟脂質(zhì)代謝紊亂及NAFLD疾病進(jìn)程中的具體作用及分子機(jī)制,為NAFLD的防治及新型藥物靶點(diǎn)的篩選提供前期實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1、本研究采用野生型WT小鼠與肝細(xì)胞特異敲除SphK2基因(SphK2^Hep-/-)小鼠HFD誘導(dǎo)20周。動(dòng)物水平上探索SphK2與NAFLD的相關(guān)性及其在NAFLD進(jìn)程中的作用;2、體外細(xì)胞水平,提取WT小鼠、SphK2^H... 

【文章來(lái)源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肝臟特異性敲除SphK2小鼠DNA鑒定

圖 2-1：肝臟特異性敲除 SphK2 小鼠 DNA 鑒定。尾鑒定小鼠基因型，分別鑒定 SphK2 Flox/Flox 基因和 Alb-cre 基因，明確小鼠穩(wěn)定構(gòu)Fig.2.1. DNA identification of SphK2Hep-/-mice. Mice tail was used to identify the mousgenotype, and stable silencing of SphK2 gene was determined.

圖 2-3：肝臟特異性敲除 SphK2 加重 HFD 誘導(dǎo)小鼠肝臟脂質(zhì)沉積和肝臟損傷（A）小鼠 HFD 誘導(dǎo) 20 周后肝臟切片 HE、油紅 O 病理染色圖（B）小鼠血清 ALT、FFA表達(dá)水平及肝臟 FFA、TG 水平。WT ND 組（n=5）、WT HFD 組（n=6）、SphK2Hep-/-ND組（n=5）、SphK2Hep-/-HFD 組（n=5）。*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001。Fig.2.3. SphK2Hep-/-HFD mice aggravated liver lipid deposition and liver injury induced by HFDin mice.(A) Liver tissue section stained by HE and Oil red O. (B) Serum ALT and FFA level and liverFFA,TG level in mice. WT ND group (n=5), WT HFD group (n=6), SphK2Hep-/-ND group(n=5),SphK2Hep-/-HFD group (n=5).*p < 0.05,**p < 0.01,***p < 0.001.


本文編號(hào)：3006858