目的:探討槲寄生素對人骨肉瘤U20S細(xì)胞的抑制作用,并探討其對磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/Akt/m TOR通路的調(diào)控作用。方法:對數(shù)期生長U20S細(xì)胞分為5組:空白組,陽性組,槲寄生素低劑量組、中劑量組、高劑量組,空白組、槲寄生素各劑量組分別用0、5、10、20 mg·L^-1槲寄生素溶液處理,陽性組用245 mg·L^-15-FU處理,干預(yù)24 h后比較各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;采用MTT法檢測并對比干預(yù)24、48、72 h后細(xì)胞增殖情況;分別采用Transwell法、流式細(xì)胞術(shù)檢測并對比干預(yù)48 h時(shí)穿膜細(xì)胞數(shù)、凋亡率;分別采用RT-qPCR、Western blot法檢測并對比干預(yù)48 h時(shí)細(xì)胞中PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白及磷酸化Akt（pAkt）蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:空白組細(xì)胞生長狀態(tài)良好,不同干預(yù)組細(xì)胞數(shù)量減少、輪廓及遮光性變差,部分細(xì)胞變圓,呈漂浮狀態(tài),其中槲寄生素高劑量干預(yù)組生長狀態(tài)最差。不同時(shí)刻各干預(yù)組MTT實(shí)驗(yàn)OD值從大至小、穿膜細(xì)胞數(shù)從多至少依次為:空白... 

【文章來源】：中醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,35(02)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞株
        1.1.2 藥物、主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 MTT法檢測各組細(xì)胞增殖能力
        1.2.3 Transwell法檢測穿膜細(xì)胞數(shù)
        1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況
        1.2.5 RT-qPCR檢測PI3K、Akt、m TOR m RNA表達(dá)
        1.2.6 Western blot法檢測b FGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表達(dá)
    1.3 觀察指標(biāo)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組U20S細(xì)胞形態(tài)學(xué)比較
    2.2 各組MTT實(shí)驗(yàn)OD值比較
    2.3 各組穿膜細(xì)胞數(shù)比較
    2.4 各組U20S細(xì)胞凋亡率比較
    2.5 各組U20S細(xì)胞PI3K、Akt、m TOR m RNA表達(dá)水平比較
    2.6 各組U20S細(xì)胞PI3K、m TOR蛋白表達(dá)及p Akt/Akt比較
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]UPLC-MS/MS法測定槲寄生抗腫瘤成分1,7-bis（4-hydroxyphenyl）-1,4-heptadien-3-one的含量[J]. 張照燕,龍猜,田秀敏,于治國,黨曉偉,趙云麗.  沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]局部復(fù)發(fā)性骨肉瘤臨床治療療效的系統(tǒng)文獻(xiàn)分析[J]. 王文劍,于秀淳.  中國骨與關(guān)節(jié)雜志. 2017(06)
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[6]槲寄生凝集素抗膽管癌的作用及機(jī)制研究[J]. 高旭亮,王佐權(quán),胡江波,詹俊宏.  陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2016(02)



本文編號：3006700