一株海洋來源真菌的次生代謝產(chǎn)物及其抗水產(chǎn)類致病菌研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-28 00:25
生態(tài)環(huán)境對(duì)真菌的次生代謝產(chǎn)物有很大的影響,海洋真菌在寡營養(yǎng)、弱堿性的含鹽海洋環(huán)境中,產(chǎn)生了有別于陸生和淡水真菌的多種次生代謝產(chǎn)物,其中一些肽類化合物對(duì)鰻弧菌具有較好的抑制作用。本論文一共分成四個(gè)部分,第一章為緒論,綜述了海洋真菌次生代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)以及對(duì)水產(chǎn)類致病菌的研究進(jìn)展。第二章為實(shí)驗(yàn)部分,采用了 OSMAC策略,通過改變培養(yǎng)基條件,對(duì)采集自近海紅樹林土壤的曲霉進(jìn)行培養(yǎng)條件的篩選,通過HPLC,TLC等檢測(cè)方法確定條件進(jìn)行放大實(shí)驗(yàn),共從浸膏中分離得到10個(gè)化合物。第三章為化合物1-10的結(jié)構(gòu)鑒定,通過NMR、UV等波譜手段確定化合物為(-)-Cyclopenol、(-)-Cyclopenin、3-ethylidene-6-isopropyl-piperazine-2,5-dione、Cyclo(L-Pro-L-Leu)、xylariolide D、roquefortine C、Cyclo(D-Pro-L-Tyr)、Cyclo(Phe-Ala)、Cyclo(Val-Ala)、Cyclo(4-hydroxy-proline-isoleucine)。第四章以恩諾沙星作為陽性對(duì)照藥,評(píng)價(jià)化合...
【文章來源】:浙江工業(yè)大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
aspergillus-1.1號(hào)培養(yǎng)基(人工海水組)254tuv下的HPLC譜圖
培養(yǎng)基的處理:在28°C條件下發(fā)酵兩個(gè)星期,濾去菌絲體,濾液用乙酸乙酯萃??取三遍,比例為濾液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相減壓濃縮。菌絲體置于丙酮??中浸泡超聲8h,濾去菌絲體,將丙酮減壓濃縮除去,余下的水相用乙酸乙酯萃??取三遍,比例為濾液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相減壓濃縮濃縮,得到的部分??并入之前的浸膏,用TLC、HPLC-DAD分析方法對(duì)得到的40組浸膏進(jìn)行分析。??實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析:菌種在液體培養(yǎng)基中4-5天能夠長滿,形成墨綠色圓形菌餅漂浮??在培養(yǎng)基表面,液體渾濁。在小麥麩培養(yǎng)基和玉米柏培養(yǎng)基中生長良好,4-5天??能夠長滿固體培養(yǎng)基表面,菌體呈墨綠色。HPLC-DAD對(duì)萃取物進(jìn)行分析,得??到各條件下的代謝物液相指紋圖譜,取每株菌種次生代謝產(chǎn)物最豐富的一組進(jìn)行??展示,其余見附錄。液相的條件是流動(dòng)相甲醇:水=15:?85至100:?0,溫度為??28°C,流速lmL/min,?—共運(yùn)行50分鐘。???Absorbance?62>4077?mAU?Tnw:?00:21^2??
浙;t工夂大孝碩士嗲忮洽夂??圖2-3?aspergillus-3A、3號(hào)培養(yǎng)基(蒸餾水組)254腦下的HPLC譜圖??Figure?2-3?aspergillus-3A>?medium?No.3?(distilled?water)?HPLC?chromatogram?(254nm)??Absorbaace:?133.7681?mAU?f?ne:?00:00?0??166?i????????r:6?〇以;舶^——^—???14〇?7?U?21?2t?35?42?49?????P?6nitte?l?????.????圖2-4?aspergillus-3B、2號(hào)培養(yǎng)基(蒸館水組)254nm下的HPLC譜圖??Figure?2-4?aspergillus-3B、medium?No.2?(distilled?water)?HPLC?chromatogram?(254nm)??結(jié)果分析:在本小節(jié)中,一共有4株菌株,使用了?5種培養(yǎng)基,每種培養(yǎng)基設(shè)置??了人工海水組和蒸館水組,根據(jù)HPLC-DAD數(shù)據(jù)顯示,aspergillus-]、1號(hào)培養(yǎng)??基(人工海水組),aspergillus-2、4號(hào)培養(yǎng)基(蒸館水組),aspergillus-3A、3號(hào)??培養(yǎng)基(蒸餾水組)和aspergillus-3B、2號(hào)培養(yǎng)基(蒸餾水組)這四組是每株菌??株中產(chǎn)物較為豐富的組別。從圖1可以看出aspergillus-1在人工海水組的1號(hào)培??養(yǎng)基中代謝產(chǎn)物較少,且峰型對(duì)稱度不高,出峰時(shí)間集中在7-14分鐘和28-40??分鐘之間
本文編號(hào):3004011
【文章來源】:浙江工業(yè)大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
aspergillus-1.1號(hào)培養(yǎng)基(人工海水組)254tuv下的HPLC譜圖
培養(yǎng)基的處理:在28°C條件下發(fā)酵兩個(gè)星期,濾去菌絲體,濾液用乙酸乙酯萃??取三遍,比例為濾液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相減壓濃縮。菌絲體置于丙酮??中浸泡超聲8h,濾去菌絲體,將丙酮減壓濃縮除去,余下的水相用乙酸乙酯萃??取三遍,比例為濾液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相減壓濃縮濃縮,得到的部分??并入之前的浸膏,用TLC、HPLC-DAD分析方法對(duì)得到的40組浸膏進(jìn)行分析。??實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析:菌種在液體培養(yǎng)基中4-5天能夠長滿,形成墨綠色圓形菌餅漂浮??在培養(yǎng)基表面,液體渾濁。在小麥麩培養(yǎng)基和玉米柏培養(yǎng)基中生長良好,4-5天??能夠長滿固體培養(yǎng)基表面,菌體呈墨綠色。HPLC-DAD對(duì)萃取物進(jìn)行分析,得??到各條件下的代謝物液相指紋圖譜,取每株菌種次生代謝產(chǎn)物最豐富的一組進(jìn)行??展示,其余見附錄。液相的條件是流動(dòng)相甲醇:水=15:?85至100:?0,溫度為??28°C,流速lmL/min,?—共運(yùn)行50分鐘。???Absorbance?62>4077?mAU?Tnw:?00:21^2??
浙;t工夂大孝碩士嗲忮洽夂??圖2-3?aspergillus-3A、3號(hào)培養(yǎng)基(蒸餾水組)254腦下的HPLC譜圖??Figure?2-3?aspergillus-3A>?medium?No.3?(distilled?water)?HPLC?chromatogram?(254nm)??Absorbaace:?133.7681?mAU?f?ne:?00:00?0??166?i????????r:6?〇以;舶^——^—???14〇?7?U?21?2t?35?42?49?????P?6nitte?l?????.????圖2-4?aspergillus-3B、2號(hào)培養(yǎng)基(蒸館水組)254nm下的HPLC譜圖??Figure?2-4?aspergillus-3B、medium?No.2?(distilled?water)?HPLC?chromatogram?(254nm)??結(jié)果分析:在本小節(jié)中,一共有4株菌株,使用了?5種培養(yǎng)基,每種培養(yǎng)基設(shè)置??了人工海水組和蒸館水組,根據(jù)HPLC-DAD數(shù)據(jù)顯示,aspergillus-]、1號(hào)培養(yǎng)??基(人工海水組),aspergillus-2、4號(hào)培養(yǎng)基(蒸館水組),aspergillus-3A、3號(hào)??培養(yǎng)基(蒸餾水組)和aspergillus-3B、2號(hào)培養(yǎng)基(蒸餾水組)這四組是每株菌??株中產(chǎn)物較為豐富的組別。從圖1可以看出aspergillus-1在人工海水組的1號(hào)培??養(yǎng)基中代謝產(chǎn)物較少,且峰型對(duì)稱度不高,出峰時(shí)間集中在7-14分鐘和28-40??分鐘之間
本文編號(hào):3004011
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