目的:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）是肺纖維化（PF）后修復(fù)組織損傷部分的一種有效的干細(xì)胞來(lái)源,但療效有限,原因之一是歸巢并存活于肺纖維的BMSCs數(shù)量較少�；|(zhì)細(xì)胞衍生因子-1（SDF-1）與其特異性受體趨化因子受體4（CXCR4）構(gòu)成的SDF-1/CXCR4軸在BMSCs歸巢、定值到損傷部位參與修復(fù)的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。前期研究表明,麥門冬湯可以有效改善大鼠肺纖維化,且該作用可通過(guò)促進(jìn)BMSCs動(dòng)員、歸巢以及向肺泡上皮細(xì)胞定向分化而實(shí)現(xiàn)。本研究旨在進(jìn)一步探討麥門冬湯預(yù)處理的BMSCs是否通過(guò)SDF-1/CXCR4軸改善肺纖維化組織的修復(fù)。方法:第一部分將150只6-8周SD雌性大鼠隨機(jī)分為3組:空白組（n=50）,肺纖維化對(duì)照組（PF組）（n=50）,口服湯劑麥門冬湯組（MMD組）（n=50）,各組分別在1天、7天、14天、21天、28天處死取材,通過(guò)HE、MASSON染色、ELISA、RT-qPCR檢測(cè)纖維損傷肺組織SDF-1的動(dòng)態(tài)變化,選擇SDF-1表達(dá)高峰作為第二部分移植BMSCs或MMD-BMSCs的時(shí)間點(diǎn)。第二部分將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組:氣管注入同等劑量生理鹽水5mg/k... 

【文章來(lái)源】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

SD大鼠BMSCs不同傳代生長(zhǎng)情況（熒光顯微鏡100）

2 綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染的 BMSCs（熒光顯微鏡 100）3 麥門冬湯預(yù)處理 BMSCs 細(xì)胞存活率最佳劑量的選擇MTT 檢測(cè)不同濃度麥門冬湯提純物作用于 BMSCs 后在不同時(shí)間結(jié)果見(jiàn)表 4。從表中可以看出，與空白組比較，模型組細(xì)胞存活所降低，但無(wú)明顯差異。在 3.125～50mg/L 各濃度麥門冬湯孵育著濃度的增加，細(xì)胞存活率顯著提高（P<0.01）,表現(xiàn)出麥門冬處理 BMSCs 呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)，通過(guò)結(jié)果篩選在于 BMSCs 后在h 時(shí)間段濃度 3.125mg/L 為最佳劑量的選擇。見(jiàn)表 4。 4 麥門冬湯預(yù)處理 BMSCs 細(xì)胞存活率的最佳劑量及時(shí)間的篩選結(jié)果（x s，n=1Table1 4 The effect of MMD on viability of BMSCs （x s，n=6）

5.5 靜脈移植 BMSCs 的歸巢和存活情況如圖所示，在 DAY1、DAY7、DAY14、DAY28 四個(gè)時(shí)間點(diǎn)中，在第1 天中，BMSCs 組與 MMD-BMSCs 組中 GFP-BMSCs 顯著歸巢至肺組織（24.64 2.47vs.25.62 1.82，P>0.05）。并且我們發(fā)現(xiàn)在第 28 天中給予 MMD 預(yù)處理 BMSCs（MMD-BMSCs）組歸巢到纖維肺組織的 BMSCs顯著多于僅移植 BMSCs 組（16.39 3.79 vs.12.06 2.95，P<0.05）,進(jìn)一步提高了 BMSCs 的歸巢和存活；但給予 SDF-1/CXCR4 阻斷劑AMD3100 后，歸巢并存活于纖維肺組織的 BMSCs 明顯減少（P<0.05），在纖維區(qū)域我們沒(méi)有發(fā)現(xiàn) GFP 陽(yáng)性的細(xì)胞。上述結(jié)果提示，MMD 預(yù)處理 BMSCs 可以通過(guò) SDF-1/CXCR4 軸顯著提高 BMSCs 的歸巢和存活。


本文編號(hào)：2994461