目的:以黃芪多糖、甘草多糖及其復(fù)合多糖為研究對(duì)象,利用細(xì)胞和分子生物學(xué)技術(shù),選用小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞作為目標(biāo)細(xì)胞,從細(xì)胞水平、基因水平和蛋白水平,研究人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞對(duì)小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化和相關(guān)細(xì)胞因子分泌的影響;研究黃芪多糖和甘草多糖分別對(duì)與人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞共培養(yǎng)前后小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化和相關(guān)細(xì)胞因子分泌的影響;研究黃芪甘草復(fù)合多糖對(duì)共培養(yǎng)后小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化和相關(guān)細(xì)胞因子分泌的影響,并對(duì)黃芪多糖、甘草多糖和黃芪甘草復(fù)合多糖三者對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞影響程度進(jìn)行比較。深入探討其誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化和抗腫瘤活性的作用機(jī)制。方法:1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,確定細(xì)胞表型。2.CCK-8法檢測(cè)黃芪多糖、甘草多糖培養(yǎng)24h后小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的存活率,確定藥物的無(wú)細(xì)胞毒濃度范圍;在無(wú)細(xì)胞毒濃度范圍內(nèi),檢測(cè)給藥72h后小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的存活率,排除給藥時(shí)間對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞存活率的影響;檢測(cè)給藥72h后HCT-116細(xì)胞的存活率,排除共培養(yǎng)模型中藥物對(duì)HCT-116細(xì)胞存活率的影響。3.在無(wú)細(xì)胞毒濃度范圍內(nèi),Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡... 

【文章來(lái)源】：山西省中醫(yī)藥研究院山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖 1-4 細(xì)胞表型流式圖3.3APS、GP 對(duì) Tregs 細(xì)胞、HCT-116 細(xì)胞存活率的影響CCK8 法檢測(cè)經(jīng) APS、GP 處理 24h 后 Tregs 細(xì)胞的存活率，獲得細(xì)胞無(wú)毒性的安全劑量范圍。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：APS、GP 均在終濃度為 0.5-250μg/mL 的濃度范圍內(nèi)對(duì) Tregs 細(xì)胞沒(méi)有任何細(xì)胞毒性，見(jiàn)圖 1-5。選用 APS、GP 藥物終濃度為 0.5-50μg/mL 處理 Tregs 細(xì)胞和 HCT-116 細(xì)胞72h，驗(yàn)證在此濃度范圍內(nèi)，APS 和 GP 不影響細(xì)胞的存活率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：經(jīng) 72h APS、GP 藥物終濃度為 0.5-50μg/mL 處理后的 Tregs 細(xì)胞和 HCT-116 細(xì)胞的存活率與對(duì)照組比較沒(méi)有差異。見(jiàn)圖 1-6、1-7。

圖 1-5 APS、GP 處理 24h 對(duì) Tregs 細(xì)胞的影響（APS 與空白組比較 * ：P<0.01；**：P<0.05；GP 與空白組比較 ：P<0.01； ：P<0.05）


本文編號(hào)：2988318