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黃芪甲苷調(diào)節(jié)miR-125a-5p抑制髓核細胞凋亡的實驗研究

發(fā)布時間:2021-01-14 21:12
  目的:建立髓核細胞退變的細胞模型,在前期研究基礎(chǔ)上進一步驗證miRNA-125a-5p的表達與椎間盤退變性疾病的關(guān)系,并檢測髓核細胞中miRNA-125a-5p介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達變化。通過黃芪甲苷干預(yù)IL-1誘導(dǎo)退變的髓核細胞,探討黃芪甲苷對miRNA-125a-5p及其靶基因介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達影響,揭示黃芪甲苷對髓核細胞凋亡的影響。方法:采用IL-1誘導(dǎo)髓核細胞的退變,試驗共分為五組:(1)正常對照組;(2)IL-1β模型組;(3)IL-1β+20mg/L黃芪甲苷組;(4)IL-1β+40mg/L黃芪甲苷組;(5)IL-1β+80mg/L黃芪甲苷組;CCK-8法檢測黃芪甲苷對人髓核細胞增殖的作用;RT-PCR檢測黃芪甲苷對miRNA-125a-5p及其靶基因介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達影響;Western blot檢測髓核細胞中P21、Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表達變化結(jié)論:黃芪甲苷對促進人髓核細胞增殖作用明顯,且這種增殖作用受到黃芪甲苷的濃度及干預(yù)時間的影響,其中以IL-1β+80mg/L黃芪甲苷組干預(yù)72h后對髓核細胞的增殖作用最明顯。黃芪甲苷可以調(diào)控m... 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻研究
    第一節(jié) 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對椎間盤退變性疾病的認識
        一、椎間盤退變理論起源、發(fā)展及流行病學(xué)
        二、椎間盤組織結(jié)構(gòu)與功能概要
        三、椎間盤退變的病因的研究進展
        四、椎間盤退變疾病治療的研究進展
        五、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對椎間盤退變性疾病的防治展望
    第二節(jié) 中醫(yī)對椎間盤退變性疾病的認識
        一、中醫(yī)對椎間盤退變性疾病的病因病機認識
        二、中醫(yī)藥對椎間盤退變性疾病的防治
        三、小結(jié)與展望
    第三節(jié) MICRORNA的研究進展
        一、MiRNA的生物學(xué)起源
        二、miR-125a的生物學(xué)作用
        三、基于MiRNA的前期研究進展
        四、小結(jié)與展望
    第四節(jié) 黃芪甲苷的研究進展
        一、中藥黃芪的藥理作用及臨床運用
        二、黃芪甲苷的研究進展
        三、小結(jié)與展望
第二章 實驗研究
    第一節(jié) 研究背景
    第二節(jié) 實驗材料
        一、實驗對象
        二、主要試驗試劑與材料(見表2)
        三、主要實驗儀器
    第三節(jié) 試驗方法
        一、人髓核細胞株的復(fù)蘇、傳代及模型構(gòu)建
        二、CCK-8檢測細胞活力
        三、Westernblot檢測相關(guān)蛋白
        四、PCR檢測相關(guān)基因表達
        五、統(tǒng)計學(xué)處理
    第四節(jié) 實驗結(jié)果
        一、CCK-8檢測細胞活力
        二、髓核細胞中miRNA-125a-5p的表達變化
        三、髓核細胞中基因表達變化
        四、髓核細胞中蛋白表達變化
    第五節(jié) 討論與小結(jié)
結(jié)語
參考文獻
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
附件


【參考文獻】:
期刊論文
[1]補腎活血方對沙鼠增齡過程中腰椎軟骨終板鈣化干預(yù)作用的初步研究[J]. 朱立國,張平,宋慶慧,張萬強,朱宏偉,楊麗平,朱巖,王源,李玲慧.  中國骨傷. 2017(10)
[2]黃芪甲苷治療慢性腎臟疾病研究進展[J]. 韓海燕.  長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2017(04)
[3]黃芪甲苷研究進展[J]. 梅周芳,施天昀,都勇,何煒,陳鴻軍,揭志軍.  臨床醫(yī)藥文獻電子雜志. 2017(03)
[4]miR-21通過下調(diào)ADAMTS-1表達促進大鼠肺纖維化[J]. 劉理靜,尹輝明,黃民江,賀兼斌,易高眾,王在巖,錢紅.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(12)
[5]黃芪甲苷的臨床應(yīng)用及心肌保護研究進展[J]. 李璐,習(xí)瑾昆,朱瑩,賀永貴.  中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2016(08)
[6]黃芪甲苷通過SIRT1/PGC-1α通路促進退變的髓核細胞增殖[J]. 馮仲鍇,孫永強,劉汝銀,岳宗進,王新立.  西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(05)
[7]黃芪甲苷對Wnt/β-catenin信號通路活化的人滑膜細胞和人軟骨細胞共培養(yǎng)體系MMP-7、CTX-Ⅱ、COMP的調(diào)控作用[J]. 王德剛,許傳勇,姜玉祥,闞衛(wèi)兵,肖志鋒,姚麗,劉婉,謝殿洪,湯豪,張玉婷.  中國中醫(yī)急癥. 2016(05)
[8]椎旁神經(jīng)阻滯對中醫(yī)綜合治療腰椎間盤突出癥的增效作用[J]. 張曉磊,薛小軍,楊智強,鄭文亮.  牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2016(01)
[9]黃芪甲苷聯(lián)用維生素D3對二維回轉(zhuǎn)培養(yǎng)大鼠原代成骨細胞增殖的影響[J]. 王婷梅,梅其炳,曲麗娜,李瑩輝.  化學(xué)與生物工程. 2016(02)
[10]用中藥離子導(dǎo)入療法和中醫(yī)正骨手法治療腰椎間盤突出癥的效果探析[J]. 劉繼巍.  當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2015(23)



本文編號:2977558

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