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和厚樸酚對高糖誘導的足細胞氧化應激及凋亡的影響

發(fā)布時間:2021-01-11 01:13
  目的探討和厚樸酚對高糖誘導的足細胞氧化應激、凋亡的影響及其機制。方法實驗分為對照組(常規(guī)培養(yǎng))、高糖組(30 mmol·L-1 D-葡萄糖)、低劑量實驗組(低劑量和厚樸酚)、中劑量實驗組(中劑量和厚樸酚)、高劑量實驗組(高劑量和厚樸酚)、第1轉(zhuǎn)染組(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p陽性對照質(zhì)粒)、第2轉(zhuǎn)染組(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p過表達質(zhì)粒)、第3轉(zhuǎn)染組(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+NOX4陰性對照質(zhì)粒)、第4轉(zhuǎn)染組(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+NOX4抑制表達質(zhì)粒)、第5轉(zhuǎn)染組(10μmol·L-1和厚樸酚+30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p陰性對照質(zhì)粒)、第6轉(zhuǎn)染組(10μmol·L-1和厚樸酚+30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p抑制表達質(zhì)粒)。用試劑盒檢測丙二醛(mal... 

【文章來源】:中國臨床藥理學雜志. 2020,36(13)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 細胞轉(zhuǎn)染前分組與處置
        2.2 細胞轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)染后分組[3]
    3 檢測指標
        3.1 用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
        3.2 用試劑盒檢測MDA含量和SOD活性
        3.3 用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)檢測miR-182-5p和NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)mRNA的相對表達量
        3.4 用免疫蛋白印跡法(Western blot)檢測B細胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma / leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、NOX4蛋白相對表達量
        3.5 熒光素酶報告基因檢測實驗檢測miR-182-5p對NOX4的靶向調(diào)控
    4 統(tǒng)計學處理
結(jié) 果
    1 各組細胞凋亡率比較
    2 各組細胞MDA含量和SOD活性比較
    3 各組細胞中miR-182-5p和NOX4 mRNA的相對表達量比較
    4 各組細胞中Bcl-2、Bax、NOX4蛋白相對表達量的比較
    5 miR-182-5p靶向調(diào)控NOX4的表達
討 論



本文編號:2969776

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