發(fā)布時間：2021-01-09 20:06

　　目的黃地安消膠囊為安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院治療2型糖尿�。═2DM）的特色醫(yī)院制劑。處方由枇杷葉、葛根、麥冬、生地等六味中藥組成,臨床應(yīng)用多年,療效確切,但其對胰島素抵抗及其信號通路的作用尚不清楚。本課題旨在研究黃地安消膠囊對胰島素IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信號通路的調(diào)控作用,探討其改善胰島素抵抗可能的分子機制。方法1黃地安消膠囊對自發(fā)性T2DM模型GK大鼠IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信號通路的調(diào)控作用GK大鼠尾靜脈消毒后測血糖,以隨機血糖大于11.1mmol/L作為T2DM模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。取符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠隨機分為模型組、參芪降糖顆粒（1.08 g/kg）組、黃地安消膠囊（12.0、6.0、3.0 g/kg）組,每組10只,另取10只Wistar大鼠為正常對照組。各組給藥6周后,測定大鼠的空腹血糖（FBG）、隨機血糖（RBG）、血清胰島素含量（FINS）、空腹血清血糖（FPG）、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、并進行糖耐量試驗（OGTT）;對血脂（TC、TG、LDL-C）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）、胰島素樣生長因子（... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略詞（Abbreviation）
前言
實驗一 黃地安消膠囊對自發(fā)性T2DM模型GK大鼠胰島素IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信號通路的調(diào)控作用
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試驗藥物
        1.3 試劑
        1.4 儀器
    2 實驗方法
        2.1 黃地安消膠囊樣品的制備
        2.2 動物模型的制備及給藥方案
        2.3 大鼠一般形態(tài)學(xué)觀察
        2.4 大鼠體質(zhì)量檢測
        2.5 大鼠空腹血糖（FBG）和隨機血糖（RBG）
        2.6 大鼠血脂（TG、TC、LDL-C）檢測
        2.7 空腹血清血糖（FPG）,血清胰島素（FINS）及胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）的計算
        2.8 糖化血紅蛋白（HbA1C）、胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）、胰島素樣生長因子（IGF-1）的測定
        2.9 糖耐量實驗（OGTT）的影響
        2.10 大鼠胰腺組織和肝臟組織病理學(xué)觀察
        2.11 PAS染色觀察大鼠肝臟組織糖原合成情況
        2.12 免疫熒光組織化學(xué)染色法檢測肝組織p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表達(dá)
        2.13 RT-qPCR檢測大鼠肝組織INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GSmRNA的表達(dá)
        2.14 蛋白免疫印跡法檢測肝組織INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β、GS蛋白的表達(dá)
    3 統(tǒng)計學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 黃地安消膠囊對GK大鼠形態(tài)學(xué)的影響
        4.2 黃地安消膠囊對GK大鼠體質(zhì)量的影響
        4.3 黃地安消膠囊對GK大鼠隨機血糖（RBG）和空腹血糖（FBG）的影響
        4.4 黃地安消膠囊對GK大鼠血脂TG、TC、LDL-C的影響
        4.5 黃地安消膠囊對GK大鼠FPG、FINS、HOMA-IR的影響
        4.6 黃地安消膠囊對GK大鼠HbA1c、GLP-1、IGF-1的影響.
        4.7 黃地安消膠囊對GK大鼠OGTT實驗的影響
        4.8 黃地安消膠囊對GK大鼠病理形態(tài)學(xué)的影響
        4.9 PAS染色觀察黃地安消膠囊對GK大鼠肝糖原合成的影響
        4.10 黃地安消膠囊對GK大鼠肝組織INSRmRNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.11 黃地安消膠囊對GK大鼠肝組織IRS-1mRNA和p-IRS-1蛋白表達(dá)的影響
        4.12 黃地安消膠囊對GK大鼠肝組織PI3KmRNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.13 黃地安消膠囊對GK大鼠肝組織AktmRNA和p-Akt蛋白表達(dá)的影響
        4.14 黃地安消膠囊對GK大鼠肝組織GSK-3βmRNA和p-GSK-3β蛋白表達(dá)的影響
        4.15 黃地安消膠囊對GK大鼠肝組織GSmRNA和蛋白表達(dá)的影響
    5 討論
        5.1 動物模型的選擇
        5.2 給藥劑量選擇依據(jù)
        5.3 肝臟IR指標(biāo)選擇依據(jù)
        5.4 肝臟IR與IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信號通路
實驗二 黃地安消膠囊含藥血清對高糖高胰島素誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信號通路的調(diào)控作用
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥物
        1.3 細(xì)胞株
        1.4 試劑
        1.5 儀器
        1.6 溶液配制
    2 實驗方法
        2.1 黃地安消膠囊含藥血清的制備
        2.2 HepG2細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3 MTT法篩選黃地安消膠囊含藥血清最佳濃度和作用時間
        2.4 HepG2細(xì)胞分組與干預(yù)
        2.5 RT-qPCR檢測INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GSmRNA的表達(dá)
        2.6 WB檢測INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表達(dá)
        2.7 免疫熒光技術(shù)檢測INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表達(dá)
    3 統(tǒng)計學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 黃地安消膠囊含藥血清最佳濃度和作用時間的篩選
        4.2 黃地安消膠囊含藥血清對HepG2細(xì)胞中INSRmRNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.3 黃地安消膠囊含藥血清對HepG2細(xì)胞中IRS-1mRNA和p-IRS-1蛋白表達(dá)的影響
        4.4 黃地安消膠囊含藥血清對HepG2細(xì)胞中PI3KmRNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.5 黃地安消膠囊含藥血清對HepG2細(xì)胞中AktmRNA和p-Akt蛋白表達(dá)的影響
        4.6 黃地安消膠囊含藥血清對HepG2細(xì)胞中GSK-3βmRNA和p-GSK-3β蛋白表達(dá)的影響
        4.7 黃地安消膠囊含藥血清對HepG2細(xì)胞中GSmRNA和蛋白表達(dá)的影響
    5 討論
        5.1 中藥血清藥物化學(xué)
        5.2 黃地安消膠囊對HepG2細(xì)胞糖代謝的影響
        5.3 黃地安消膠囊對IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信號通路的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個人簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]地黃功效考證[J]. 秦燕,朱建光.  中醫(yī)學(xué)報. 2018(01)
[2]針灸對肥胖型多囊卵巢綜合征患者脂聯(lián)素、瘦素及胰島素抵抗的影響[J]. 張亞琴.  中醫(yī)學(xué)報. 2017(11)
[3]白子菜對HepG2細(xì)胞胰島素抵抗作用的分子機制[J]. 韋乃球,郝二偉,冼寒梅,覃文慧,覃驪蘭,李琦,柳俊輝.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2018(02)
[4]知柏地黃丸對糖尿病前期陰虛燥熱證人群干預(yù)的臨床研究[J]. 龔敏,劉蔚,鄒麗妍,白春英,周淑君.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(11)
[5]針灸配合化痰祛瘀方治療2型糖尿病胰島素抵抗臨床研究[J]. 楊衛(wèi)杰,曹晶晶,曹軼.  中醫(yī)學(xué)報. 2017(10)
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[9]渴樂寧膠囊治療氣陰兩虛型糖尿病的臨床效果觀察[J]. 利順欣,李書文,龐景三.  中藥藥理與臨床. 2017(03)
[10]黃芪注射液對糖尿病患者血清胰島素樣生長因子-1水平與頸動脈內(nèi)膜中層厚度的影響[J]. 劉麗楠,王素莉,王穎,李敬華,姥勇,程晨.  現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(16)



本文編號：2967313