胡椒堿對C2C12肌管細(xì)胞胰島素抵抗模型糖代謝AMPK信號通路上游靶點(diǎn)的干預(yù)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-05 01:44
目的:胡椒堿是植物藥蓽茇的主要活性成分,能改善胰島素抵抗、糖代謝異常及調(diào)節(jié)單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號通路相關(guān)靶點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上,本課題建立C2C12肌管細(xì)胞胰島素抵抗模型,探索胡椒堿對該模型糖代謝異常的調(diào)節(jié)作用及對單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號通路單磷酸腺苷激活蛋白激酶α亞基及上游關(guān)鍵因子脂聯(lián)素受體1、肝激酶B1和銜接蛋白APPL1的干預(yù)作用,以闡明胡椒堿改善C2C12肌管細(xì)胞胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)的可能作用機(jī)理。方法:1.將C2C12小鼠成肌細(xì)胞用2%馬血清培養(yǎng)7-8天后分化為肌管細(xì)胞。除正常對照組外,用0.5mM棕櫚酸誘導(dǎo)16h建立胰島素抵抗C2C12肌管細(xì)胞模型,將其分為模型組、二甲雙胍組和胡椒堿組,胡椒堿組的給藥濃度為2.5、5、10、20、40μM,從給藥6h起,每12h測葡萄糖消耗量,總共測5個(gè)時(shí)間段,觀察不同濃度的胡椒堿在各個(gè)時(shí)間段對糖代謝紊亂的調(diào)節(jié)作用。2.收集細(xì)胞,熒光定量PCR法檢測單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號通路單磷酸腺苷激活蛋白激酶α亞基及上游靶點(diǎn)脂聯(lián)素受體1、銜接蛋白APPL1和肝激酶B1 mRNA的表達(dá),蛋白免疫印跡法檢測單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號通路單磷酸腺苷激活蛋白激酶...
【文章來源】:云南中醫(yī)藥大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號與說明
引言
第一章 C2C12小鼠成肌細(xì)胞的培養(yǎng)和IR模型的建立
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第二章 PIP對C2C12肌管細(xì)胞IR模型糖代謝紊亂的改善作用
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第三章 PIP對C2C12肌管細(xì)胞IR模型AdipoR1、APPL1、LKB1、AMPKα mRNA表達(dá)的影響
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第四章 PIP對C2C12肌管細(xì)胞IR模型AdipoR1、APPL1、LKB1、AMPKα、p-AMPK蛋白表達(dá)的影響
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝
本文編號:2957768
【文章來源】:云南中醫(yī)藥大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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引言
第一章 C2C12小鼠成肌細(xì)胞的培養(yǎng)和IR模型的建立
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第二章 PIP對C2C12肌管細(xì)胞IR模型糖代謝紊亂的改善作用
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第三章 PIP對C2C12肌管細(xì)胞IR模型AdipoR1、APPL1、LKB1、AMPKα mRNA表達(dá)的影響
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第四章 PIP對C2C12肌管細(xì)胞IR模型AdipoR1、APPL1、LKB1、AMPKα、p-AMPK蛋白表達(dá)的影響
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
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