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胡椒堿對(duì)C2C12肌管細(xì)胞胰島素抵抗模型糖代謝AMPK信號(hào)通路上游靶點(diǎn)的干預(yù)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-05 01:44
  目的:胡椒堿是植物藥蓽茇的主要活性成分,能改善胰島素抵抗、糖代謝異常及調(diào)節(jié)單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號(hào)通路相關(guān)靶點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上,本課題建立C2C12肌管細(xì)胞胰島素抵抗模型,探索胡椒堿對(duì)該模型糖代謝異常的調(diào)節(jié)作用及對(duì)單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號(hào)通路單磷酸腺苷激活蛋白激酶α亞基及上游關(guān)鍵因子脂聯(lián)素受體1、肝激酶B1和銜接蛋白APPL1的干預(yù)作用,以闡明胡椒堿改善C2C12肌管細(xì)胞胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)的可能作用機(jī)理。方法:1.將C2C12小鼠成肌細(xì)胞用2%馬血清培養(yǎng)7-8天后分化為肌管細(xì)胞。除正常對(duì)照組外,用0.5mM棕櫚酸誘導(dǎo)16h建立胰島素抵抗C2C12肌管細(xì)胞模型,將其分為模型組、二甲雙胍組和胡椒堿組,胡椒堿組的給藥濃度為2.5、5、10、20、40μM,從給藥6h起,每12h測(cè)葡萄糖消耗量,總共測(cè)5個(gè)時(shí)間段,觀察不同濃度的胡椒堿在各個(gè)時(shí)間段對(duì)糖代謝紊亂的調(diào)節(jié)作用。2.收集細(xì)胞,熒光定量PCR法檢測(cè)單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號(hào)通路單磷酸腺苷激活蛋白激酶α亞基及上游靶點(diǎn)脂聯(lián)素受體1、銜接蛋白APPL1和肝激酶B1 mRNA的表達(dá),蛋白免疫印跡法檢測(cè)單磷酸腺苷激活蛋白激酶信號(hào)通路單磷酸腺苷激活蛋白激酶... 

【文章來(lái)源】:云南中醫(yī)藥大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號(hào)與說(shuō)明
引言
第一章 C2C12小鼠成肌細(xì)胞的培養(yǎng)和IR模型的建立
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第二章 PIP對(duì)C2C12肌管細(xì)胞IR模型糖代謝紊亂的改善作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第三章 PIP對(duì)C2C12肌管細(xì)胞IR模型AdipoR1、APPL1、LKB1、AMPKα mRNA表達(dá)的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第四章 PIP對(duì)C2C12肌管細(xì)胞IR模型AdipoR1、APPL1、LKB1、AMPKα、p-AMPK蛋白表達(dá)的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號(hào):2957768

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