發(fā)布時間：2021-01-02 00:40

　　小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的免疫細(xì)胞。激活的小膠質(zhì)細(xì)胞會促進(jìn)多種促炎細(xì)胞因子、趨化因子及作用酶的轉(zhuǎn)錄和翻譯,并分泌到細(xì)胞外部,作用于其他小膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元,引起小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)一步激活,神經(jīng)元損傷死亡,進(jìn)而誘發(fā)神經(jīng)炎癥發(fā)生,損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng),這也是常見的神經(jīng)退行性疾病阿爾茲海默癥、帕金森病的引發(fā)因素之一。抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活是目前研究開發(fā)治療神經(jīng)退行性疾病的重要方向之一,有效的抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活的藥物的發(fā)現(xiàn),對于治療和減緩神經(jīng)退行性疾病具有重要作用。桃葉珊瑚苷（AU）是一種中草藥中提取出的天然活性物質(zhì),廣泛存在于杜仲、車前草、黨參、黃芪等常見重要中藥。本課題中利用LPS/IFN-g誘導(dǎo)BV2細(xì)胞發(fā)生激活,并使用桃葉珊瑚苷作用,研究AU對BV2細(xì)胞激活的抑制情況及作用機(jī)制。本課題研究內(nèi)容及結(jié)果如下:（1）BV2細(xì)胞模型構(gòu)建及AU細(xì)胞毒性分析:MTT法檢測未發(fā)現(xiàn)AU明顯具有細(xì)胞毒性。并確定最終構(gòu)建BV2細(xì)胞炎癥模型的給藥濃度為0.1mg/mL LPS+10 U/mL IFN-γ。（2）AU對BV2細(xì)胞炎癥模型的作用研究:通過檢測細(xì)胞活力、一氧化氮釋放量及一氧化氮合酶的活性、細(xì)胞培養(yǎng)上清中的白... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 神經(jīng)炎癥
    1.2 小膠質(zhì)細(xì)胞
        1.2.1 小膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)炎癥
        1.2.2 小膠質(zhì)細(xì)胞可能的激活機(jī)制
        1.2.3 小膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的神經(jīng)毒性物質(zhì)
    1.3 小膠質(zhì)細(xì)胞激活引發(fā)的神經(jīng)退行性疾病
        1.3.1 阿爾茲海默癥
        1.3.2 帕金森病
        1.3.3 肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥
    1.4 桃葉珊瑚苷
        1.4.1 抗炎作用
        1.4.2 神經(jīng)保護(hù)作用
        1.4.3 抗氧化作用
        1.4.4 保肝作用
        1.4.5 抗糖尿病作用
        1.4.6 促進(jìn)骨形成
    1.5 本課題的研究目的、內(nèi)容及意義
        1.5.1 本課題研究目的及意義
        1.5.2 本課題的研究內(nèi)容
2 BV2 細(xì)胞炎癥模型構(gòu)建及桃葉珊瑚苷對其作用研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 主要試劑及配方
        2.2.4 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 MTT法檢測細(xì)胞活力
        2.3.2 Griess法檢測NO
        2.3.3 ROS活性氧檢測
        2.3.4 DAPI染色
        2.3.5 蘇木素-伊紅染色
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.5.1 AU對 BV2 細(xì)胞毒性作用
        2.5.2 AU對 H9C2及SH-SY5Y細(xì)胞毒性作用
        2.5.3 BV2 細(xì)胞炎癥模型構(gòu)建
        2.5.4 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型細(xì)胞活力影響
        2.5.5 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型ROS水平影響
        2.5.6 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型的形態(tài)學(xué)影響
    2.6 討論
    2.7 小結(jié)
3 桃葉珊瑚苷對炎癥模型中促炎細(xì)胞因子及介質(zhì)的抑制作用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        3.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 主要試劑及配方
        3.2.4 主要儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 Griess法檢測NO
        3.3.2 ELISA法檢測炎癥因子
        3.3.3 細(xì)胞蛋白提取
        3.3.4 蛋白定量
        3.3.5 NOS含量檢測
        3.3.6 實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）
    3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.5.1 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型NO釋放量的影響
        3.5.2 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型促炎細(xì)胞因子釋放的影響
        3.5.3 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型NOS的影響
        3.5.4 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型的促炎細(xì)胞因子mRNA水平的影響
    3.6 討論
    3.7 小結(jié)
4 桃葉珊瑚苷對BV2 細(xì)胞炎癥抑制作用機(jī)制研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        4.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.3 主要試劑及配方
        4.2.4 主要儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白提取
        4.3.2 免疫印跡法
        4.3.3 分子對接
    4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.5.1 AU對 BV2 細(xì)胞炎癥模型的NF-κB通路的影響
        4.5.2 AU抑制NF-κB通路的靶點(diǎn)
    4.6 討論
    4.7 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄A 縮略詞表
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Tregs通過IL-10/STAT3誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞M2型極化減輕腦出血炎癥損傷[J]. 李秋萌,張文倩,譚贏,趙貫建,張翔,張鵬,程遠(yuǎn).  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(16)



本文編號：2952304