【目的】建立吳茱萸質(zhì)量標(biāo)志物（Q-Markers）的研究方法,確定其功效/毒性Q-Markers;建立相關(guān)Q-Markers的HPLC含測(cè)方法,為吳茱萸的質(zhì)量控制提供依據(jù)�！痉椒ā�1.采用超高效液相-四級(jí)桿-飛行質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）對(duì)吳茱萸進(jìn)行全成分分析。根據(jù)化合物的色譜保留、準(zhǔn)確分子量、特征碎片離子等信息進(jìn)行質(zhì)譜解析,明確化學(xué)歸屬。2.應(yīng)用中藥血清藥物化學(xué)研究方法,確定吳茱萸的入血成分。結(jié)合實(shí)驗(yàn)室前期的全成分分析、譜效關(guān)系研究結(jié)果,初步篩選出吳茱萸的功效與毒性成分,明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ),初步框定吳茱萸功效/毒性Q-Markers。3.引入網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法,以初步確定的吳茱萸Q-Markers作為網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究對(duì)象,采用靶點(diǎn)預(yù)測(cè)及GO富集等技術(shù)發(fā)掘其鎮(zhèn)痛、止嘔與毒性作用的關(guān)鍵靶點(diǎn),解析其主要作用通路與生物學(xué)過程,進(jìn)而探討吳茱萸成分-靶點(diǎn)-通路的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系,明晰其鎮(zhèn)痛、止嘔及毒性的作用機(jī)制,獲得作用機(jī)制明確的Q-Markers。4.采用HPLC色譜指紋定性與多指標(biāo)含量測(cè)定相結(jié)合的方法,對(duì)初步確定的吳茱萸Q-Markers進(jìn)行可測(cè)性評(píng)價(jià),建立主要Q-Markers的HPLC含... 

【文章來源】：江西中醫(yī)藥大學(xué)江西省

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

吳茱萸的負(fù)模式(A)和正模式(B)的總離子流圖

3.2.1 生物堿類化合物的質(zhì)譜解析通過對(duì)課題組已建立的吳茱萸化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫進(jìn)行系統(tǒng)判別[27]，并根據(jù)質(zhì)譜中化合物的結(jié)構(gòu)特征和典型的碎片離子特征信息，從吳茱萸醇提取物中共測(cè)得生物堿類成分 45 個(gè)，包括吲哚類、喹諾酮類和糖苷類生物堿。吲哚類生物堿通常具有 6-5-6-6-6 五環(huán)結(jié)構(gòu)，含有 3 個(gè)氮原子，在 ESI（+）模式下易發(fā)生 Retro Diels-Alder（PDA）裂解，以去氫吳茱萸堿為例，峰 37 的保留時(shí)間為 18.969 化學(xué)式為 C19H15N3O，準(zhǔn)分子離子峰為 m/z 302.2[M+H]+，其二級(jí)質(zhì)譜主要為一個(gè)碎片 m/z 286.0936，且為基峰。由圖 1.2 推斷的結(jié)果顯示 m/z286.0936 的碎片為去氫吳茱萸堿脫掉-CH3，且去氫離子后形成一個(gè)完整結(jié)構(gòu)為一共軛體系的離子，故此碎片較牢固，不易斷裂形成子碎片，而導(dǎo)致去氫吳茱萸堿的二級(jí)質(zhì)譜簡(jiǎn)單只有一個(gè)碎片離子 m/z 286.0936。

圖 1.3 吳茱萸卡品堿的二級(jí)圖譜和斷裂途徑Figure 1.3 MS/MS spectrum and proposed fragmenation pathways of Evocarpine3.2.2 檸檬苦素類化合物的質(zhì)譜解析在正離子模式和負(fù)離子模式下，吳茱萸藥材樣品中檢測(cè)到 8 個(gè)檸檬苦素類化合物。以化合物 47 和化合物 50 為例，其特征裂解途徑如圖 1.4 所示。在保留時(shí)間 29.32 min，正離子模式下給出明顯的 m/z 471.2038 [M+H]+準(zhǔn)分子離子峰。對(duì)m/z 471.2038 的[M+H]+準(zhǔn)分子離子峰進(jìn)行 MS 裂解分析，二級(jí)質(zhì)譜給出了425.1978 和 161.0603 的碎片離子。425.1898 是母離子 471.1952 丟失一個(gè)羧基產(chǎn)生的特征離子碎片，與文獻(xiàn)[27]報(bào)道的檸檬苦素（Limonin）的質(zhì)譜數(shù)據(jù)相同，故推測(cè)化合物 50 為檸檬苦素�；衔�47，在tR=23.520 min處檢測(cè)到化學(xué)式為C26H30O8，m/z 485.1835 [M-H]-為其準(zhǔn)分子離子峰。該成分在 MS2圖中有 259.1359，423.1829，383.1521，365.1409和 166.0286，說明在質(zhì)譜碰撞電壓轟擊下發(fā)生了 Diels-Alder 斷裂，形成了特征

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2950261