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蒼耳子抑制乳腺癌細(xì)胞和1型單純皰疹病毒活性成分的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-31 03:17
  蒼耳子(Fructus Xanthii)是菊科植物蒼耳(Xanthium sibiricum Patr.ex Widd.)成熟帶總苞的干燥果實(shí),被歷代中國(guó)藥典收載,在我國(guó)分布廣泛,是一種常用來(lái)治療鼻科疾病和風(fēng)寒頭痛的傳統(tǒng)中藥材。中藥蒼耳子含有多種化學(xué)成分,現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,蒼耳子具有抗腫瘤、抗病毒、抑菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抗氧化和降血糖等藥理作用。但是,并未對(duì)蒼耳子中抑制HSV的活性成分進(jìn)行研究,另外乳腺癌一直嚴(yán)重威脅著女性的生命健康,因而,我們以蒼耳子為原料,以乳腺癌細(xì)胞MCF-7和1型單純皰疹病毒(HSV-1)為研究對(duì)象,對(duì)蒼耳子中抑制腫瘤細(xì)胞增殖和抑制病毒的活性成分進(jìn)行分離純化,以期篩選出活性成分。具體實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果見(jiàn)下文:1.蒼耳子抑制腫瘤細(xì)胞增殖成分的分離純化及其活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)以抑制MCF-7細(xì)胞增殖為活性追蹤指標(biāo),利用有機(jī)溶劑萃取、硅膠柱色譜、半制備高效液相色譜(HPLC)和凝膠柱色譜對(duì)蒼耳子抗癌活性成分進(jìn)行分離純化。抗癌活性篩選過(guò)程中,采用MTT法檢測(cè)各階段分離組分對(duì)MCF-7存活率的影響,并計(jì)算出IC50值,以IC50值評(píng)定它們抗癌活性的強(qiáng)弱。采用Annexin V-FITC/... 

【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 蒼耳子的研究概況
        1.1.1 蒼耳子的原植物
        1.1.2 蒼耳子的化學(xué)成分
        1.1.3 蒼耳子的生物活性
        1.1.4 蒼耳子的毒性研究
    1.2 乳腺癌研究概況
        1.2.1 乳腺癌概述
        1.2.2 腫瘤的增殖與凋亡
        1.2.3 中藥抗乳腺癌的研究
    1.3 單純皰疹病毒研究現(xiàn)狀
        1.3.1 單純皰疹病毒概述
        1.3.2 單純皰疹病毒感染的治療現(xiàn)狀
        1.3.3 中藥抗單純皰疹病毒的研究
    1.4 課題研究?jī)?nèi)容及意義
第二章 蒼耳子抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性成分的研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品與細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和耗材
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
        2.1.4 溶液的配方
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 蒼耳子各提取物的制備
        2.2.2 硅膠柱層析分離
        2.2.3 半制備高效液相色譜(HPLC)分離
        2.2.4 凝膠柱層析分離
        2.2.5 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代和凍存
        2.2.6 MTT法檢測(cè)蒼耳子各組分對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的影響
        2.2.7 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)MCF-7細(xì)胞凋亡
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 蒼耳子各提取物的制備結(jié)果
        2.3.2 蒼耳子各提取物抑制MCF-7細(xì)胞增殖的活性篩選結(jié)果
        2.3.3 蒼耳子EtOAC萃取物硅膠柱層析分離的結(jié)果
        2.3.4 蒼耳子EFa-EFl抑制MCF-7細(xì)胞增殖的活性篩選結(jié)果
        2.3.5 蒼耳子EFd的半制備HPLC分離結(jié)果
        2.3.6 蒼耳子EFd-1-EFd-4抑制MCF-7細(xì)胞增殖的活性篩選結(jié)果
        2.3.7 蒼耳子EFd-3的凝膠柱層析分離純化結(jié)果
        2.3.8 蒼耳子EFd-3-1的HPLC純度檢測(cè)結(jié)果
        2.3.9 蒼耳子EFd-3-1抑制MCF-7細(xì)胞增殖的結(jié)果
        2.3.10 蒼耳子EFd-3-1促進(jìn)MCF-7細(xì)胞凋亡的結(jié)果
    2.4 本章小結(jié)
第三章 蒼耳子抑制病毒活性成分的研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        3.1.2 細(xì)胞與病毒
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑和耗材
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 蒼耳子各提取物的制備
        3.2.2 硅膠柱層析分離
        3.2.3 半制備高效液相色譜(HPLC)分離
        3.2.4 測(cè)定各組分對(duì)HSV-1病毒感染的影響
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 蒼耳子各提取物的制備結(jié)果
        3.3.2 蒼耳子各提取物抑制HSV-1病毒感染的活性篩選結(jié)果
        3.3.3 蒼耳子EtOAC萃取物硅膠柱層析分離的結(jié)果
        3.3.4 蒼耳子EFa-EFl抑制HSV-1病毒感染的活性篩選結(jié)果
        3.3.5 蒼耳子EFe的半制備HPLC分離結(jié)果
        3.3.6 蒼耳子EFe-1-EFe-3抑制HSV-1病毒感染的活性篩選結(jié)果
    3.4 本章小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):2948851

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