背景及目的:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一種常見的自身免疫性疾病,在病程早期,關(guān)節(jié)周圍首先會(huì)出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤,進(jìn)而發(fā)展為骨侵蝕,導(dǎo)致不可逆的關(guān)節(jié)破壞。破骨細(xì)胞在RA關(guān)節(jié)骨侵蝕的病理過程中發(fā)揮重要的作用。因此,靶向破骨細(xì)胞來保護(hù)骨質(zhì)的藥物,有可能成為RA治療中的可行性方案。川續(xù)斷皂苷Ⅵ（AVI）屬于三萜皂苷類成分,為川續(xù)斷的主要活性成分,有研究表明其能促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖與分化,但是對于破骨細(xì)胞的影響以及能否通過抑制破骨細(xì)胞形成與功能來改善相關(guān)骨破壞疾病未見報(bào)道。本研究通過建立體外RANKL誘導(dǎo)破骨細(xì)胞的培養(yǎng)體系和體內(nèi)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型,共同探討AVI對破骨細(xì)胞分化與活化的影響及其潛在的分子機(jī)制。方法:1.在體內(nèi),建立膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎小鼠模型,以甲氨喋呤作為陽性對照藥,通過足腫脹評(píng)分考察AVI對小鼠關(guān)節(jié)腫脹的影響;Micro-CT和HE染色考察AVI對關(guān)節(jié)炎小鼠關(guān)節(jié)破壞的影響;ELISA檢測AVI對小鼠血清中TNF-α和IL-1β表達(dá)的影響;TRAP染色、q-PCR和western-blot考察AVI對關(guān)節(jié)炎小鼠關(guān)節(jié)組織中破骨細(xì)胞生成以及相關(guān)基... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１川續(xù)斷皂苷ＶＩ對膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎小鼠關(guān)節(jié)炎免疫炎癥的影響第１大采川今＿－?ＩＩ??１．

為了排除藥物抑制破骨細(xì)胞生成的效應(yīng)是藥物本身非特異性細(xì)胞毒性作用??所致，我們考察了?ＡＶＩ在０－４０ｐＭ濃度對破骨前體細(xì)胞ＢＭＭｓ?７２ｈ的細(xì)胞毒性??作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖２－１所示，０－４０（ａＭ濃度的ＡＶＩ在７２ｈ內(nèi)對ＢＭＭｓ無明??顯的細(xì)胞毒性作用。??３４??

Ｉ?ｉｉｉｉｉｉ??〇?１?５?１０?２０?４０??ＡＶＩ?（｜ｉＭ）??圖２－ｌ川續(xù)斷皂苷ＶＩ對ＢＭＭｓ細(xì)胞活力的影響。ＢＭＭｓ細(xì)胞與５０ｎｇ／ｍｌ的Ｍ－ＣＳＦ和０、??Ｉ、５、１０、２０和４０ｐＭ川續(xù)斷ｔｉｔＴＶｌ共同培養(yǎng)７２ｈ，通過ＣＣＫ８法測定ＢＭＭｓ細(xì)胞的生??＃中．。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ｍｅａｎ?±?ＳＤ）表示，獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)３次。＞?＜０．０５，?＜０．０１，??＜０．００１加藥組ｖｓ正常對照組。??Ｆｉｇｕｒｅ２－１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?Ａｓｐｅｒｏｓａｐｏｎｉｎ?ＶＩ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ＢＭＭｓ?ｃｅｌｌｓ．?ＢＭＭｓ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ??ｉｎｃｕｂａｔｅｄ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｐｒｅｓｅｎｃｅ?ｏｆ?Ｍ－ＣＳＦ?（５０ｎｇ／ｍｌ）?ｗｉｔｈ?ｖａｒｙｉｎｇ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ａｓｐｅｒｏｓａｐｏｎｉｎ?ＶＩ?（０、１、５、??１０、２０?ａｎｄ?４０｜＿ｉＭ）?ｆｏｒ?７２ｈ，?ｔｈｅｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＢＭＭｓ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＣＣＫ８?ａｓｓａｙ．?Ｔｈｅ??ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｗｅｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｉｎ?ｔｈｒｅｅ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｔｈｅ?ｍｅａｎ?±??ＳＤ?＊／？＜０．０５


本文編號(hào)：2946563