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垂盆草介導Sirt1-AMPK-LXR信號通路改善二甲基亞硝胺所致肝纖維化作用機制的研究

發(fā)布時間:2020-12-24 01:19
  目的:肝纖維化是由多種致病因素引起的肝內(nèi)結(jié)締組織發(fā)育不良的病理過程,肝纖維化的過程長期持續(xù)就會發(fā)展成肝硬化。在肝纖維化過程中,其特征是肝星狀細胞和其他細胞外基質(zhì)細胞的激活。本實驗采用二甲基亞硝胺建立慢性肝纖維化體內(nèi)模型和活化肝星狀細胞體外實驗,探究垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge,SS)改善肝纖維化進程、脂質(zhì)沉積、細胞凋亡以及炎癥因子的作用,并分析其圍繞Sirt1-AMPK-LXR信號通路的調(diào)控機制。方法:體內(nèi)實驗中,取Wistar雄性大鼠隨機分為五組,每組六只,即為正常組、DMN組、垂盆草提取物低劑量組(100mg/kg)、垂盆草提取物高劑量組(300mg/kg)和扶正化瘀陽性對照組(2g/kg)。DMN組與各藥物治療組每周連續(xù)三次腹腔注射1%DMN(2ml/kg)誘導肝纖維化;造模的同時各治療組分別灌胃給予垂盆草提取物(100或300mg/kg)或扶正化瘀(2g/kg),每天一次,連續(xù)5周。在末次給藥6h后,將動物安樂死,收集血液和肝組織。利用試劑盒檢測血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST)的水平。利用H&E,Masson染色和... 

【文章來源】:延邊大學吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
第二章 實驗方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 垂盆草的提取方法
        2.2.2 細胞培養(yǎng)
        2.2.3 動物飼養(yǎng)管理
        2.2.4 生化指標的測定
        2.2.5 H&E染色
        2.2.6 Masson三色膠原染色
        2.2.7 免疫組化實驗
        2.2.8 Western blot實驗
        2.2.9 PCR實驗
        2.2.10 肝星狀細胞熒光實驗
    2.3 統(tǒng)計學處理
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 垂盆草提取物對大鼠DMN誘導的肝纖維化的保護作用
    3.2 垂盆草提取物對調(diào)節(jié)纖維化標志物表達的影響,包括α-平滑肌蛋白,基質(zhì)金屬蛋白酶1和膠原蛋白I
    3.3 垂盆草提取物對DMN誘導的SREBP-1,Fasn,ACCa的蛋白表達的影響
    3.4 垂盆草提取物對DMN誘導的凋亡因子的影響
    3.5 垂盆草提取物對DMN誘導的Caspase-1,TNFα表達的影響
    3.6 垂盆草提取物對DMN介導的SIRT1-AMPK-LXR信號通路的影響
    3.7 垂盆草提取物對活化的HSC-T6細胞和LX2細胞中纖維化標志物的表達的影響
    3.8 垂盆草提取物對TGF-β刺激活化的HSC-T6細胞和LX2細胞中Sirt1,LXR表達和AMPK磷酸化的影響
    3.9 垂盆草提取物對活化的HSC-T6細胞和LX2細胞中Sirt1-AMPK-LXR信號傳導組分的影響
第四章 討論
參考文獻
附錄A
謝辭



本文編號:2934699

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