[目的]探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在消癌解毒方在人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡中的作用。[方法]CCK-8法檢測不同濃度的消癌解毒方處理HepG2細(xì)胞12、24、48 h后細(xì)胞的增殖情況;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞消癌解毒方處理HepG2細(xì)胞24 h凋亡情況;應(yīng)用qRT-PCR檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激上游分子標(biāo)記GRP78、PERK、ATF-6、IRE-1的mRNA水平;采用Western blot方法分析消癌解毒方對PERK、ATF4、CHOP和TRB3蛋白的表達(dá)情況;并用CCK-8法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)抑制劑4-苯基丁酸（4-PBA）對HepG2細(xì)胞凋亡率的影響。[結(jié)果]消癌解毒方抑制HepG2細(xì)胞的增殖,并且這種效應(yīng)呈現(xiàn)時間和濃度依賴;ATF-6和IRE-1 mRNA水平無明顯變化,GRP78和PERK mRNA水平較陰性對照組均顯著增加;消癌解毒方可上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路的標(biāo)志蛋白質(zhì)PERK、ATF4、CHOP水平,增加下游TRB3蛋白的表達(dá)。4-PBA與消癌解毒方聯(lián)合作用組的細(xì)胞凋亡率顯著減少。[結(jié)論]消癌解毒方通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞的凋亡,其可能是通過PERK通路上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡蛋白CHOP的表達(dá)... 

【文章來源】：中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志. 2020年06期

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

消癌解毒方抑制HepG2細(xì)胞增殖

選取消癌解毒方作用24 h時,空白組、低、中、高劑量組細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞分析。結(jié)果顯示,經(jīng)消癌解毒方處理24 h,低、中、高劑量組的細(xì)胞凋亡率均顯著增加(P<0.05),見圖2。2.3 消癌解毒方對HepG2細(xì)胞GRP78、ATF-6、IRE-1 mRNA水平的影響

經(jīng)中等劑量消癌解毒方處理24 h后,提取HepG2細(xì)胞中的mRNA,檢測ERS相關(guān)分子GRP78、ATF-6、IRE-1、RERK的mRNA水平。結(jié)果顯示,GRP78和PERK水平顯著增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而ATF-6、IRE-1升高不顯著,見圖3。2.4 消癌解毒方對HepG2細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白質(zhì)水平的影響

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：2930374