發(fā)布時間：2020-12-21 18:01

　　化療是臨床上治療包括肝癌在內(nèi)的各種癌癥的最常用方法。然而,ATP結(jié)合盒（ABC）轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的過表達(dá)是癌癥化學(xué)療法中遇到的主要障礙之一。目前,癌細(xì)胞中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）過表達(dá)引起的多藥耐藥（Multidrug resistance,MDR）是成功化療的最大阻力。新藤黃酸（Gambogenic acid,GNA）,一種從中藥藤黃中分離的生物活性成分,在體內(nèi)體外具有多種抗腫瘤作用。近年來,積累的證據(jù)顯示GNA對耐藥細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)具有潛在的作用,且在前期實驗中我們發(fā)現(xiàn)GNA在一定濃度范圍內(nèi)可抑制肝癌HepG2細(xì)胞內(nèi)P-gp的表達(dá),因此我們猜測GNA是否對肝癌治療中出現(xiàn)的MDR亦具有逆轉(zhuǎn)作用。目的:本研究擬將人肝癌HepG2/Adr耐藥細(xì)胞用作體外模型,以研究GNA對HepG2/Adr細(xì)胞內(nèi)P-gp介導(dǎo)的MDR的逆轉(zhuǎn)作用,并初步探討其耐藥機(jī)制是否與NF-κB和MAPK通路有關(guān),為預(yù)防肝癌耐藥細(xì)胞中出現(xiàn)的MDR提供新思路,并最終為豐富GNA在耐藥細(xì)胞中的抗癌作用提供一定的參考。方法:（1）通過MTT方法篩選GNA作用于HepG2/Adr細(xì)胞的最大無毒濃度,選取細(xì)胞存活率... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

倒置顯微鏡觀察HepG2/Adr和HepG2細(xì)胞的形態(tài)（10×20倍）（A：HepG2/Adr

1-2 MTT 法檢測 HepG2/Adr 和 HepG2 細(xì)胞在 GNA 處理 48 h 后的存活g 1-2 Cell Viability of HepG2/Adr and HepG2 cells were detected by MTT atreatment with GNAfor 48 hA 對 HepG2/Adr 細(xì)胞逆轉(zhuǎn)能力的影響進(jìn)一步確定 GNA 是否增強(qiáng)常規(guī)化療藥物在 HepG2/Adr 和 He敏作用，我們在上述細(xì)胞系中進(jìn)行了 GNA 與化療藥物（DO的共培養(yǎng)。如表 1 所示，與 HepG2 細(xì)胞相比，HepG2/Adr 細(xì)胞IC50值較高。但是，在 HepG2/Adr 細(xì)胞中，GNA（0.4 和 0.8 PTX 的共孵育可使 IC50值以劑量依賴性方式顯著降低（P<0.0NA 作用后，HepG2/Adr 細(xì)胞對 DOX 和 PTX 的逆轉(zhuǎn)倍數(shù)分別 HepG2 細(xì)胞內(nèi)兩者逆轉(zhuǎn)倍數(shù)沒有顯著差異（P>0.05）。另外，epG2/Adr 和 HepG2 細(xì)胞內(nèi) CDDP 的 IC50值，這可能與 CDD關(guān)。值得注意的是，Ver 組與化療藥物 DOX 與 PTX 的聯(lián)用

20圖 1-3 流式細(xì)胞儀測定 GNA 對 HepG2/Adr 細(xì)胞凋亡的影響。（A）HepG2/Adr 細(xì)胞的凋亡結(jié)果。（B）代表性的散點圖表示 HepG2/Adr 細(xì)胞的凋亡狀態(tài)。Fig 1-3 Effect of GNAon the apoptosis of HepG2/Adr cells by flow cytometry assay. （A）Result ofthe apoptosis of HepG2/Adr cells.（B）Representative dot plots illustrating the apoptotic status ofHepG2/Adr cells.4 本章小結(jié)本章首先通過 MTT 方法篩選出 GNA 給藥后，細(xì)胞存活率達(dá) 90%以上的藥物

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：2930243