發(fā)布時(shí)間：2020-12-16 06:51

　　目的本研究以TX小鼠和人臍靜脈血內(nèi)皮細(xì)胞（human umbical vein endothelial cells,HUVECs）為研究對象,以體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)相結(jié)合方式,研究中藥肝豆靈對肝豆?fàn)詈俗冃裕╓ilson’s disease,WD）患者腦血管的保護(hù)機(jī)制。闡明WD腦血管損害的機(jī)制與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK/e IF2α/CHOP信號通路介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有關(guān),中藥肝豆靈可過調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)PERK/e IF2α/CHOP信號通路抑制細(xì)胞凋亡,從而發(fā)揮保護(hù)WD腦血管損害作用。通過研究肝豆靈保護(hù)WD腦血管損害的分子機(jī)制,為肝豆靈臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù),為中醫(yī)藥防治WD腦血管損害提供新的思路。通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察肝豆靈干預(yù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK/e IF2α/CHOP信號通路對WD模型TX小鼠腦血管的保護(hù)作用;并通過體外實(shí)驗(yàn)HUVECs模擬腦血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)一步驗(yàn)證肝豆靈通過干預(yù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK/e IF2α/CHOP信號通路對銅負(fù)荷后的HUVECs的保護(hù)機(jī)制;探討肝豆靈對WD模型TX小鼠腦血管保護(hù)的作用機(jī)制。方法體內(nèi)實(shí)驗(yàn)——肝豆靈對TX小鼠腦血管保護(hù)機(jī)制的探討:48只TX小鼠隨機(jī)分為模型組、肝豆靈組... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
第一部分 肝豆靈片通過PERK/eIF2α/CHOP內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路保護(hù)WD模型TX小鼠腦血管損傷
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3 檢測方法及實(shí)驗(yàn)指標(biāo)
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
    4 討論
        4.1 實(shí)驗(yàn)動物模型及對照藥物的選擇
        4.2 主要指標(biāo)的選擇意義
        4.3 肝豆靈對TX小鼠腦血管保護(hù)的療效及機(jī)制分析
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 肝豆靈片通過PERK/eIF2α/CHOP內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路對銅負(fù)荷HUVECs凋亡的抑制作用
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
        2.2 細(xì)胞株的生物特性及其培養(yǎng)
        2.3 肝豆靈含藥血清及硫酸銅培養(yǎng)基的制備
        2.4 實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)及分組方法
        2.5 RT-qPCR觀察HUVECs內(nèi) PERK、p-eIF2α、CHOP m RNA表達(dá)水平
        2.6 Western Blot法觀察HUVECs內(nèi) PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表達(dá)量
        2.7 比色法進(jìn)行HUVECs內(nèi) caspase-3 活性
        2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 肝豆靈對銅負(fù)荷誘導(dǎo)的HUVECs凋亡的影響
        3.2 肝豆靈對銅負(fù)荷誘導(dǎo)的HUVECs內(nèi) PERK、p-eIF2α、CHOP mRNA表達(dá)的影響
        3.3 肝豆靈對銅負(fù)荷誘導(dǎo)的HUVECs內(nèi) PERK、p-eIF2α、CHOP蛋白表達(dá)的影響
        3.4 肝豆靈對銅負(fù)荷誘導(dǎo)的HUVECs內(nèi) caspase-3 活性的影響
    4 討論
        4.1 實(shí)驗(yàn)對照藥物的選擇
        4.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK信號通路相關(guān)指標(biāo)選擇的意義
        4.3 肝豆靈抑制銅負(fù)荷HUVECs凋亡的療效分析
        4.4 肝豆靈抑制銅負(fù)荷HUVECs凋亡的機(jī)制分析
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述一 PERK在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
綜述二 腦血管內(nèi)膜損傷及保護(hù)機(jī)制研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡介
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]黃連素對2型糖尿病大鼠胸主動脈PI3K/Akt/eNOS信號通路的影響[J]. 封芬,譚安雄,鄧集湘,周斌.  中國當(dāng)代醫(yī)藥. 2018(30)
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碩士論文
[1]桂郁金揮發(fā)油和吉馬酮對損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D]. 陳瓊芳.廣西中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[2]莪術(shù)醇提物對PC12細(xì)胞和HUVECs的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D]. 黃瑀莘.廣西醫(yī)科大學(xué) 2016
[3]肝豆靈對Wilson病患者腦血流動力學(xué)和血管損傷因子及TX小鼠血管損傷病理研究[D]. 江海林.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[4]鎘經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)雞肝細(xì)胞自噬的機(jī)制[D]. 李楠.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：2919726