發(fā)布時間：2020-12-16 06:51

　　目的本研究以TX小鼠和人臍靜脈血內皮細胞（human umbical vein endothelial cells,HUVECs）為研究對象,以體內和體外實驗相結合方式,研究中藥肝豆靈對肝豆狀核變性（Wilson’s disease,WD）患者腦血管的保護機制。闡明WD腦血管損害的機制與內質網應激PERK/e IF2α/CHOP信號通路介導的細胞凋亡有關,中藥肝豆靈可過調控內質網PERK/e IF2α/CHOP信號通路抑制細胞凋亡,從而發(fā)揮保護WD腦血管損害作用。通過研究肝豆靈保護WD腦血管損害的分子機制,為肝豆靈臨床應用提供理論基礎和科學依據,為中醫(yī)藥防治WD腦血管損害提供新的思路。通過體內實驗觀察肝豆靈干預內質網應激PERK/e IF2α/CHOP信號通路對WD模型TX小鼠腦血管的保護作用;并通過體外實驗HUVECs模擬腦血管內皮細胞進一步驗證肝豆靈通過干預內質網應激PERK/e IF2α/CHOP信號通路對銅負荷后的HUVECs的保護機制;探討肝豆靈對WD模型TX小鼠腦血管保護的作用機制。方法體內實驗——肝豆靈對TX小鼠腦血管保護機制的探討:48只TX小鼠隨機分為模型組、肝豆靈組... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學安徽省

【文章頁數】：114 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
第一部分 肝豆靈片通過PERK/eIF2α/CHOP內質網應激信號通路保護WD模型TX小鼠腦血管損傷
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
        2.3 檢測方法及實驗指標
        2.4 統計學分析
    3 結果
    4 討論
        4.1 實驗動物模型及對照藥物的選擇
        4.2 主要指標的選擇意義
        4.3 肝豆靈對TX小鼠腦血管保護的療效及機制分析
    5 結論
    參考文獻
第二部分 肝豆靈片通過PERK/eIF2α/CHOP內質網應激信號通路對銅負荷HUVECs凋亡的抑制作用
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要實驗試劑及儀器
        2.2 細胞株的生物特性及其培養(yǎng)
        2.3 肝豆靈含藥血清及硫酸銅培養(yǎng)基的制備
        2.4 實驗的設計及分組方法
        2.5 RT-qPCR觀察HUVECs內 PERK、p-eIF2α、CHOP m RNA表達水平
        2.6 Western Blot法觀察HUVECs內 PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表達量
        2.7 比色法進行HUVECs內 caspase-3 活性
        2.8 統計分析
    3 結果
        3.1 肝豆靈對銅負荷誘導的HUVECs凋亡的影響
        3.2 肝豆靈對銅負荷誘導的HUVECs內 PERK、p-eIF2α、CHOP mRNA表達的影響
        3.3 肝豆靈對銅負荷誘導的HUVECs內 PERK、p-eIF2α、CHOP蛋白表達的影響
        3.4 肝豆靈對銅負荷誘導的HUVECs內 caspase-3 活性的影響
    4 討論
        4.1 實驗對照藥物的選擇
        4.2 內質網應激PERK信號通路相關指標選擇的意義
        4.3 肝豆靈抑制銅負荷HUVECs凋亡的療效分析
        4.4 肝豆靈抑制銅負荷HUVECs凋亡的機制分析
    5 結論
    參考文獻
綜述一 PERK在內質網應激中的作用研究進展
    參考文獻
綜述二 腦血管內膜損傷及保護機制研究進展
    參考文獻
個人簡介
攻讀學位期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]大黃素對缺氧條件下人臍靜脈內皮細胞焦亡的影響[J]. 王凱,施思,雷少青,夏中元.  中國中醫(yī)急癥. 2018(12)
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碩士論文
[1]桂郁金揮發(fā)油和吉馬酮對損傷血管內皮細胞的保護作用及機制研究[D]. 陳瓊芳.廣西中醫(yī)藥大學 2017
[2]莪術醇提物對PC12細胞和HUVECs的保護作用及其機制研究[D]. 黃瑀莘.廣西醫(yī)科大學 2016
[3]肝豆靈對Wilson病患者腦血流動力學和血管損傷因子及TX小鼠血管損傷病理研究[D]. 江海林.安徽中醫(yī)藥大學 2016
[4]鎘經內質網應激途徑誘導雞肝細胞自噬的機制[D]. 李楠.東北農業(yè)大學 2014



本文編號：2919726