目的本課題通過動物腎缺血再灌注模型和細胞缺血缺氧模型探討急性腎損傷過程中炎癥反應(yīng)與細胞自噬發(fā)生之間的關(guān)系,并探索中藥川穹嗪對急性腎損傷的保護作用及其可能的作用機制。方法本課題分為動物實驗和細胞實驗兩部分。動物實驗選用8周雄性SD大鼠27只,隨機分為三組:對照組（Sham組）、缺血再灌注損傷組（ischemical reperfusion injury,I/R組）、缺血再灌注期間應(yīng)用川穹嗪治療組（I/R+TMP組）。檢測血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血清肌酐（serum creatinine,SCr）確定模型制作成功后,通過蘇木素-伊紅（Hematoxylin-eosin,HE）染色、原位末端標記法（Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling,TUNEL）、Caspase3/cleaved Caspase3 免疫組化染色觀察各組腎小管形態(tài)學變化及細胞凋亡情況;Real time PCR檢測NOD2、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、單核細胞趨化因子（... 

【文章來源】：濱州醫(yī)學院山東省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２川穹嗪抑制腎臟缺血再灌注損傷后炎癥反應(yīng)??

ｓｈａｍ－ｏｐｅｒａｔｅｄ?ｒａｔｓ?（ｎ＝９），?＊＊?Ｐ?＜０．０５?ｖｓ．?Ｉ／Ｒ?ｒａｔｓ?（ｎ＝９）．??３在大鼠腎缺血再灌注損傷模型中，川穹嗪治療組ＮＯＤ２的表達降低??Ｒｅａｌ?ｔｉｍｅ?ＰＣＲ分析結(jié)果（圖３Ａ）和Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ分析結(jié)果（圖３Ｂ）顯示：在??ｍＲＮＡ水平和蛋白水平上，與對照組相比，腎臟缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２表達水??平均明顯升高；川穹嗪治療組較缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２水平降低。對腎臟組織??進一步做ＮＯＤ２免疫組織化學染色（圖３Ｃ），通過顯微鏡觀察ＮＯＤ２在腎臟的表??達變化，結(jié)果顯示：與對照組相比，腎臟缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２表達明顯增加；??川穹嗪治療組較缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２表達減少。炎癥和自噬是機體內(nèi)兩個不??可分割、聯(lián)系密切的重要病理生理過程。在自噬保護近端腎小管不受變性和急性??３０??

水平和ＬＣ３Ａ／Ｂ－ＩＩ／Ｉ比值明顯降低，說明嚴重缺氧抑制了自噬的發(fā)生；川穹嗪治療??組較缺氧組Ｂｅｃｌｉｎｌ的表達水平和ＬＣ３Ａ／Ｂ－ＩＩ／Ｉ的值顯著升高，且川穹嗪５０ｐＭ濃??度時較３０＾Ｍ濃度自噬升高更明顯（圖５Ｃ，?５Ｄ）。??Ａ?Ｂ?—????ＮＯＤ２－?一＂—一＂＾?■＊＿＊＊?曬圓?？？?Ｎ０Ｄ２－｜?，■丨＿■?■一?｜??Ｐ－ａｃｔｉｎ－ｆ＾ｐ＊?ｍｍｍ?ｍｍｍ?ｍｍｍ?？＞＾ｒ｜?Ｐ－ａｃｔｉｎ－｜?丨丨?｜??ＣｏＣＩ２（５０〇ｍＭ）?－？?＋?＋?＋?＋?ＯＧＤ?＋?＋?＋??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?＋?ＴＭＰ?（３〇ｍＭ）?＋??ＴＭＰ?（５〇ｍＭ）?？?ＴＭＰ?（５〇ｍＭ）?－?－?？?＋??ＳＳ?２．５－１?？?３．??Ｉ：?ｉ．?＿ａ＿??ｉｌ。＂?．?Ｕ?－??ＣｏＣＩ，?（６０〇ｍＭ）?－?？?？?＋?〇ＧＤ?－?＋?？?？??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－?－?＋?－?ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－?－?＋?－??ＴＭＰ?（５０ｐＭ）?－?－?－?＋?ＴＭＰ?（６〇ｗＭ）?－?－?－?？??Ｃ?Ｄ??Ｂｅｃｌｉｎ１４￣?一?一?＿?ＬＣ３Ａ／Ｂ－Ａ－?—?＾?＇ＭＷｍ??ｐ－ａｃｔｉｎ－?ｍｍ?ｍａｍ?ｐ－ａｃｔｉｎ－ｌ?—？？?——－??ＣｏＣＩ２?（５０〇ｍＭ）?－－?＋?？?＋?？?ＣｏＣＩ，（５０〇ｍＭ）?？？？？？?＋??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－？？？？－?ＴＭＰ?（３〇ｍＭ）?＋??ＴＭＰ?（５０ｐＭ）?？?ＴＭＰ?（５０ｐＭ＞?？??ｔ?２．０－，?＾?１Ｊ－??｜｜

【參考文獻】：
期刊論文
[1]表沒食子兒茶素沒食子酸酯對人急性單核細胞白血病細胞株U937的作用及機制研究[J]. 范麗萍,沈建箴,傅海英,周華蓉,沈松菲,喻愛芳.  中國實驗血液學雜志. 2010(02)



本文編號：2915202