目的本課題通過動(dòng)物腎缺血再灌注模型和細(xì)胞缺血缺氧模型探討急性腎損傷過程中炎癥反應(yīng)與細(xì)胞自噬發(fā)生之間的關(guān)系,并探索中藥川穹嗪對(duì)急性腎損傷的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。方法本課題分為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)兩部分。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)選用8周雄性SD大鼠27只,隨機(jī)分為三組:對(duì)照組（Sham組）、缺血再灌注損傷組（ischemical reperfusion injury,I/R組）、缺血再灌注期間應(yīng)用川穹嗪治療組（I/R+TMP組）。檢測(cè)血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血清肌酐（serum creatinine,SCr）確定模型制作成功后,通過蘇木素-伊紅（Hematoxylin-eosin,HE）染色、原位末端標(biāo)記法（Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling,TUNEL）、Caspase3/cleaved Caspase3 免疫組化染色觀察各組腎小管形態(tài)學(xué)變化及細(xì)胞凋亡情況;Real time PCR檢測(cè)NOD2、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、單核細(xì)胞趨化因子（... 

【文章來源】：濱州醫(yī)學(xué)院山東省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２川穹嗪抑制腎臟缺血再灌注損傷后炎癥反應(yīng)??

ｓｈａｍ－ｏｐｅｒａｔｅｄ?ｒａｔｓ?（ｎ＝９），?＊＊?Ｐ?＜０．０５?ｖｓ．?Ｉ／Ｒ?ｒａｔｓ?（ｎ＝９）．??３在大鼠腎缺血再灌注損傷模型中，川穹嗪治療組ＮＯＤ２的表達(dá)降低??Ｒｅａｌ?ｔｉｍｅ?ＰＣＲ分析結(jié)果（圖３Ａ）和Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ分析結(jié)果（圖３Ｂ）顯示：在??ｍＲＮＡ水平和蛋白水平上，與對(duì)照組相比，腎臟缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２表達(dá)水??平均明顯升高；川穹嗪治療組較缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２水平降低。對(duì)腎臟組織??進(jìn)一步做ＮＯＤ２免疫組織化學(xué)染色（圖３Ｃ），通過顯微鏡觀察ＮＯＤ２在腎臟的表??達(dá)變化，結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，腎臟缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２表達(dá)明顯增加；??川穹嗪治療組較缺血再灌注損傷組ＮＯＤ２表達(dá)減少。炎癥和自噬是機(jī)體內(nèi)兩個(gè)不??可分割、聯(lián)系密切的重要病理生理過程。在自噬保護(hù)近端腎小管不受變性和急性??３０??

水平和ＬＣ３Ａ／Ｂ－ＩＩ／Ｉ比值明顯降低，說明嚴(yán)重缺氧抑制了自噬的發(fā)生；川穹嗪治療??組較缺氧組Ｂｅｃｌｉｎｌ的表達(dá)水平和ＬＣ３Ａ／Ｂ－ＩＩ／Ｉ的值顯著升高，且川穹嗪５０ｐＭ濃??度時(shí)較３０＾Ｍ濃度自噬升高更明顯（圖５Ｃ，?５Ｄ）。??Ａ?Ｂ?—????ＮＯＤ２－?一＂—一＂＾?■＊＿＊＊?曬圓?？？?Ｎ０Ｄ２－｜?，■丨＿■?■一?｜??Ｐ－ａｃｔｉｎ－ｆ＾ｐ＊?ｍｍｍ?ｍｍｍ?ｍｍｍ?？＞＾ｒ｜?Ｐ－ａｃｔｉｎ－｜?丨丨?｜??ＣｏＣＩ２（５０〇ｍＭ）?－？?＋?＋?＋?＋?ＯＧＤ?＋?＋?＋??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?＋?ＴＭＰ?（３〇ｍＭ）?＋??ＴＭＰ?（５〇ｍＭ）?？?ＴＭＰ?（５〇ｍＭ）?－?－?？?＋??ＳＳ?２．５－１?？?３．??Ｉ：?ｉ．?＿ａ＿??ｉｌ。＂?．?Ｕ?－??ＣｏＣＩ，?（６０〇ｍＭ）?－?？?？?＋?〇ＧＤ?－?＋?？?？??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－?－?＋?－?ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－?－?＋?－??ＴＭＰ?（５０ｐＭ）?－?－?－?＋?ＴＭＰ?（６〇ｗＭ）?－?－?－?？??Ｃ?Ｄ??Ｂｅｃｌｉｎ１４￣?一?一?＿?ＬＣ３Ａ／Ｂ－Ａ－?—?＾?＇ＭＷｍ??ｐ－ａｃｔｉｎ－?ｍｍ?ｍａｍ?ｐ－ａｃｔｉｎ－ｌ?—？？?——－??ＣｏＣＩ２?（５０〇ｍＭ）?－－?＋?？?＋?？?ＣｏＣＩ，（５０〇ｍＭ）?？？？？？?＋??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－？？？？－?ＴＭＰ?（３〇ｍＭ）?＋??ＴＭＰ?（５０ｐＭ）?？?ＴＭＰ?（５０ｐＭ＞?？??ｔ?２．０－，?＾?１Ｊ－??｜｜

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]表沒食子兒茶素沒食子酸酯對(duì)人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株U937的作用及機(jī)制研究[J]. 范麗萍,沈建箴,傅海英,周華蓉,沈松菲,喻愛芳.  中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2010(02)



本文編號(hào)：2915202