目的:利用體外貼壁法,誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠骨髓源的樹突狀細(xì)胞（DC）,研究脹果甘草多糖對DC表型成熟,和抗原提呈功能的影響,并初步研究其基于TLRs/NF-κB信號通路,促進(jìn)DC免疫功能的作用機(jī)制。方法:1)從C57BL/6雄性小鼠骨髓分離原代細(xì)胞,用終濃度為10 ng/mL IL-4、20 ng/mL GM-CSF聯(lián)合誘導(dǎo)成未成熟DC（imDC）,并利用倒置顯微鏡、掃描電鏡和流式細(xì)胞（FCM）術(shù)等方法鑒定DC的表型。2)收集培養(yǎng)至第七天的懸浮狀細(xì)胞,以不同濃度脹果甘草粗多糖GiP及其純化組分GiP-B1,分別干預(yù)DC 24 h和48 h,利用CCK8法檢測GiP-B1和GiP對DC的細(xì)胞毒性作用;FCM術(shù)檢測DC表面標(biāo)志分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86的表達(dá);ELISA法檢測DC分泌的IL-12、IL-6、IL-1β和TNF-α含量;WB法檢測GiP-B1和GiP對DC遷移能力的影響。3)FCM術(shù)和ELISA法分別檢測TLR2/4單克隆抗體封閉前后GiP-B1和GiP對DC表型和分泌IL-12、IL-6、IL-1β和TNF-α的影響;RT-PCR法檢測MyD88、p65、TL... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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摘要
ABSTRACT
前言
研究內(nèi)容
    1 小鼠骨髓源樹突狀細(xì)胞的體外誘導(dǎo)、培養(yǎng)和鑒定
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.4 討論
    2 脹果甘草多糖GiP-B1和GiP對樹突狀細(xì)胞表型和功能的影響
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4 討論
    3 脹果甘草多糖GiP-B1和GiP對樹突狀細(xì)胞作用機(jī)制的初步研究
        3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4 討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
導(dǎo)師評閱表



本文編號：2912541