目的:（1）制備研究ABC現(xiàn)象的模型制劑PEG-GNA-Liposomes,選出最優(yōu)工藝與處方,并對(duì)其進(jìn)行表征;（2）證明模型制劑PEG-GNA-Liposomes二次注射具有ABC現(xiàn)象,并考察前后兩次注射間隔時(shí)間及劑量對(duì)該現(xiàn)象強(qiáng)弱的影響,與此同時(shí)考察各組肝、脾組織藥物蓄積量;（3）從血液學(xué)與組織學(xué)水平分別對(duì)ABC現(xiàn)象的產(chǎn)生機(jī)制進(jìn)行初步探討。旨在為最終消除PEG化納米載體二次注射產(chǎn)生的ABC現(xiàn)象提供解決思路。方法:（1）參考實(shí)驗(yàn)室前期研究,并以包封率為主要考察指標(biāo),結(jié)合單因素考察與正交試驗(yàn),最終確定用溶劑注入法制備PEG-GNA-Liposomes的最優(yōu)處方,并通過掃描電鏡、粒徑、Zeta電位、體外釋放等對(duì)最優(yōu)處方下的PEG-GNA-Liposomes進(jìn)行表征;（2）確定以HPLC法檢測血漿與肝、脾組織中GNA的方法。通過將首次注射PEG-GNA-Liposomes與二次注射后藥時(shí)曲線下降的速度作比較,證明該制劑二次注射是否具有ABC現(xiàn)象。將兩次注射間隔時(shí)間分為3天、5天和7天三組,比較三組藥時(shí)曲線下降速度,判斷ABC現(xiàn)象是否具有時(shí)間依賴性。將注射劑量分為高、中、低三組,通過藥時(shí)曲線下... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
前言
    1 加速血液清除現(xiàn)象
        1.1 加速血液清除現(xiàn)象的提出
        1.2 現(xiàn)有免疫學(xué)機(jī)制不能完全詮釋加速血液清除現(xiàn)象
        1.3 加速血液清除現(xiàn)象與ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體
    2 PEG化新藤黃酸脂質(zhì)體
    3 課題設(shè)計(jì)思路
第一章 處方前研究
    1 儀器與材料
        1.1 主要儀器
        1.2 材料和試劑
    2 方法與結(jié)果
        2.1 GNA體外分析方法的建立
            2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的制備
            2.1.2 色譜條件
            2.1.3 專屬性
                2.1.3.1 對(duì)照品溶液
                2.1.3.2 供試品溶液的制備
                2.1.3.3 陰性供試品溶液的
            2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            2.1.5 精密度實(shí)驗(yàn)
            2.1.6 重復(fù)性
            2.1.7 回收率
            2.1.8 穩(wěn)定性
        2.2 包封率測定方法的建立
            2.2.1 包封率測定方法的選擇-微柱離心法
            2.2.2 微柱的制備
            2.2.3 微柱對(duì)GNA吸附率考察
            2.2.4 洗脫曲線
            2.2.5 包封率及載藥量的測定
    3 討論
    4 本章小結(jié)
第二章 PEG化新藤黃酸脂質(zhì)體的處方研究與質(zhì)量評(píng)價(jià)
    第一節(jié)PEG-GNA-Liposomes的制備工藝與處方研究
        1 儀器與材料
            1.1 主要儀器
            1.2 試劑與試藥
        2 方法與結(jié)果
            2.1 制備方法的選擇
            2.2 有機(jī)溶劑的選擇
            2.3 單因素考察PEG-GNA-Liposomes的處方工藝
                2.3.1 制備工藝的考察
                    2.3.1.1 制備溫度的選擇
                    2.3.1.2 攪拌速度的選擇
                    2.3.1.3 攪拌時(shí)間的選擇
                2.3.2 PEG-GNA-Liposomes處方的篩選
                    2.3.2.1 水相/有機(jī)相比例的選擇
                    2.3.2.2 卵磷脂/膽固醇（w:w）比例的選擇
                    2.3.2.4 磷脂用量的考察
                    2.3.2.5 卵磷脂/mPEG-PE比例的選擇
            2.4 正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)
            2.5 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3 討論
    第二節(jié)PEG化新藤黃酸脂質(zhì)體的質(zhì)量評(píng)價(jià)
        1 儀器與材料
            1.1 儀器
            1.2 材料與試劑
        2 方法與結(jié)果
            2.1 形態(tài)學(xué)考察
            2.2 粒徑分布
            2.3 Zeta電位考察
            2.4 制劑初步穩(wěn)定性考察
                2.4.1 低溫（4℃）初步穩(wěn)定性考察
                2.4.2 室溫（25℃）初步穩(wěn)定性考察
            2.5 體外釋藥性考察
                2.5.1 色譜條件
                2.5.2 釋放介質(zhì)的選擇
                2.5.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
                2.5.4 精密度實(shí)驗(yàn)
                2.5.5 測定方法與結(jié)果
                2.5.6 體外釋放模型擬合
        3 討論
        4 本章小結(jié)
第三章 不同影響因素對(duì)PEG化新藤黃酸脂質(zhì)體加速血液清除現(xiàn)象影響的考察
    第一節(jié)GNA生物樣品分析方法的確立
        1 儀器與材料
            1.1 儀器
            1.2 材料
            1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2 方法與結(jié)果
            2.1 血漿樣品中GNA含量測定方法
                2.1.1 血漿樣品處理
                2.1.2 色譜條件
                2.1.3 專屬性
                2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
                2.1.5 定量下限（LLOQ）
                2.1.6 殘留
                2.1.7 精密度和準(zhǔn)確度
                2.1.8 回收率
                    2.1.8.1 提取回收率
                    2.1.8.2 相對(duì)回收率
                2.1.9 GNA血漿樣品穩(wěn)定性
                    2.1.9.1 儲(chǔ)備液穩(wěn)定性
                    2.1.9.2 GNA血漿樣品室溫放置穩(wěn)定性
                    2.1.9.3 GNA血漿樣品反復(fù)凍融穩(wěn)定性
            2.2 組織樣品分析方法建立-HPLC法
                2.2.1 組織樣品處理
                2.2.2 色譜條件
                2.2.3 專屬性考察
                2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
                2.2.5 精密度試驗(yàn)
                2.2.6 回收率
                    2.2.6.1 提取回收率
                    2.2.6.2 相對(duì)回收率
        3 討論
    第二節(jié) 時(shí)間與劑量因素對(duì)加速血液清除現(xiàn)象的影響
        1 儀器和材料
            1.1 儀器
            1.2 材料和試劑
            1.3 試驗(yàn)動(dòng)物
        2 血漿藥動(dòng)參數(shù)研究
            2.1 不同間隔天數(shù)對(duì)二次給藥血藥濃度的影響
                2.1.1 給藥劑量
                2.1.2 分組及給藥方式
                2.1.3 樣品處理與分析
                2.1.4 測定結(jié)果
                    2.1.4.1 藥時(shí)曲線的繪制
                    2.1.4.2 藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分析
            2.2 劑量因素（前后兩次給藥劑量相同）對(duì)二次給藥血藥濃度的影響58
                2.2.1 給藥劑量
                2.2.2 給藥間隔天數(shù)
                2.2.3 分組及給藥方式
                2.2.4 樣品處理與分析
                2.2.5 測定結(jié)果
                    2.2.5.1 藥時(shí)曲線的繪制
                    2.2.5.2 藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分析
            2.3 劑量因素（首次給藥劑量分組，二次給藥劑量相同）對(duì)二次給藥血藥濃度的影響
                2.3.1 給藥劑量
                2.3.2 給藥間隔天數(shù)
                2.3.3 分組及給藥方式
                2.3.4 樣品處理與分析
                2.3.5 測定結(jié)果
                    2.3.5.1 藥時(shí)曲線的繪制
                    2.3.5.2 藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分析
        3 組織分布研究
            3.1 不同間隔天數(shù)對(duì)二次給藥組織藥物蓄積的影響
                3.1.1 給藥劑量
                3.1.2 分組及給藥方式
                3.1.3 樣品處理與分析
                3.1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.2 劑量因素（前后兩次給藥劑量相同）對(duì)二次給藥組織藥物蓄積的影響
                3.2.1 給藥劑量
                3.2.2 給藥間隔天數(shù)
                3.2.3 分組及給藥方式
                3.2.4 樣品處理與分析
                3.2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.3 劑量因素（第一次給藥劑量分組，二次給藥劑量相同）對(duì)二次給藥血藥濃度的影響
                3.3.1 給藥劑量
                3.3.2 給藥間隔天數(shù)
                3.3.3 分組及給藥方式
                3.3.4 樣品處理與分析
                3.3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
        5 本章小結(jié)
第四章 PEG化新藤黃酸脂質(zhì)體加速血液清除現(xiàn)象的產(chǎn)生機(jī)制初步探討
    第一節(jié)ELISA法檢測血清抗PEG-IgM抗體的初步研究
        1 儀器和材料
            1.1 主要儀器
            1.2 材料和試劑
            1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 樣品采集
            2.2 試劑配制
            2.3 操作步驟
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
    第二節(jié)Western blot檢測肝臟組織ABCA1、MDR1、ABCG1蛋白表達(dá)水平
        1 儀器和材料
            1.1 主要儀器
            1.2 材料和試劑
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 分組及給藥方式
            2.2 大鼠肝組織總蛋白提取
            2.3 蛋白定量
            2.4 SDS-PAGE凝膠電泳
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
        5 本章小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 PEG化脂質(zhì)體引起的加速血液清除現(xiàn)象的研究
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人介紹
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：2909574