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補腎解毒方體外抑制艾滋病毒及對HIV感染細胞ITAMs/ITIMs通路的干預作用

發(fā)布時間:2020-12-09 05:24
  目的:1.觀察中藥補腎解毒方對猴免疫缺陷病毒(SIV)/人免疫缺陷病毒(HIV)的體外抑制效果;2.探討HIV-1感染對ITAMs/ITIMs免疫調控信號通路的影響及其作用機制;3.觀察HIV-1感染對炎癥反應相關細胞因子IL-6、IL-18、TNFa、TRAF-4表達的變化;4.觀察中藥補腎解毒方對HIV-1感染后ITAMs/ITIMs信號通路關鍵受體及炎癥反應顯著變化因子的干預作用。方法:1.采用系統(tǒng)溶劑分離法對中藥YYH、GZ、LW的乙醇提取物進行萃取,得到前期初步證實具有抗SIV/HIV活性的YYH L部位、YYH Y部位、GZ S部位、LW S部位,組成中藥補腎解毒方;2.采用 SIVmac251 和 BK132 HIV-1 感染 CEMxl74 細胞、BK132 HIV-1 感染 M8166細胞作為實驗模型,通過體外藥效學實驗,采用病毒引起合胞體數(shù)量和實時熒光定量RT-PCR法,綜合考慮CPE效應、細胞內HIVRNA表達水平和上清中病毒載量等指標,全面評估中藥補腎解毒方對SIV/H1V的抑制效果,再以同樣評價指標比較補腎解毒方組方藥效與組方中各有效部位單獨藥效;3.以M81... 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學廣東省

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

補腎解毒方體外抑制艾滋病毒及對HIV感染細胞ITAMs/ITIMs通路的干預作用


圖2補腎解毒方各濃度組對正常CEMxl?74細胞作用情況??

補腎,合胞體,病毒,濃度


?80,?40,?20,?10?y?g/ml)濃度組對SIV誘導的CEMxl74細胞病變效應有不同程度??的抑制作用,其中補腎解毒方(160,?80ug/m])濃度組無細胞病變出現(xiàn),與陽性藥相??說明其抑制SIV效果良好。詳見表2、圖1。???表2補腎解毒方各濃度在174細胞感染SIV模型中的CPE情況???-?m;情況?????U]U?S?L2?復孔?3??病毒對照組?+?+?+?+?■(?f++?.f+++??陽性藥對照組?-?-?-??復方?160ug/ml?-?-?-??復方?80ug/ml?-??復方?40?u?g/ml?+?+?+??復方?20ug/ml?+?+?+??復方?l〇yg/ml?++?++?+■+??復方5?u?g/ml?+?+?+?+++?t"f-f??13??

正態(tài)分布,補腎,相對量,細胞內


2.?3.?2.?3中藥補腎解毒方各濃度對CEMxl74細胞感染SIV模型中SHRNA表達的??影響??結果如表3、圖3及圖4所示,各組間細胞內SIVRNA相對量(lglO)符合正態(tài)分布,??采用單因素方差分析,各組間方差齊(Levene’?s=1.622,/M).?200>0.05),均值總??體比較有顯著性差異(F=13.?623,片0.?000<0.?05),兩兩比較使用LSD檢驗方法,與??病毒對照組比較,補腎解毒方160?ug/ml濃度組(片0.000<0.?01)、80?ug/ml濃度組??(/M).000<0.?01)、40yg/ml濃度組(盧0.001<〇.01)、20ug/ml濃度組(/M).001??<0.01)均具有統(tǒng)計學意義,且復方各濃度細胞內SIVRNA表達具有一定的量效關系;??與陽性藥對照組比較,補腎解毒方160ug/ml濃度組(聲〇.728>0.05)、80ug/ml濃??度組(蘆0.?124>0.05)未見明顯差異。??各組間上清中病毒載量(lglO)符合正態(tài)分布


本文編號:2906348

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