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補腎解毒方體外抑制艾滋病毒及對HIV感染細(xì)胞ITAMs/ITIMs通路的干預(yù)作用

發(fā)布時間:2020-12-09 05:24
  目的:1.觀察中藥補腎解毒方對猴免疫缺陷病毒(SIV)/人免疫缺陷病毒(HIV)的體外抑制效果;2.探討HIV-1感染對ITAMs/ITIMs免疫調(diào)控信號通路的影響及其作用機制;3.觀察HIV-1感染對炎癥反應(yīng)相關(guān)細(xì)胞因子IL-6、IL-18、TNFa、TRAF-4表達的變化;4.觀察中藥補腎解毒方對HIV-1感染后ITAMs/ITIMs信號通路關(guān)鍵受體及炎癥反應(yīng)顯著變化因子的干預(yù)作用。方法:1.采用系統(tǒng)溶劑分離法對中藥YYH、GZ、LW的乙醇提取物進行萃取,得到前期初步證實具有抗SIV/HIV活性的YYH L部位、YYH Y部位、GZ S部位、LW S部位,組成中藥補腎解毒方;2.采用 SIVmac251 和 BK132 HIV-1 感染 CEMxl74 細(xì)胞、BK132 HIV-1 感染 M8166細(xì)胞作為實驗?zāi)P?通過體外藥效學(xué)實驗,采用病毒引起合胞體數(shù)量和實時熒光定量RT-PCR法,綜合考慮CPE效應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)HIVRNA表達水平和上清中病毒載量等指標(biāo),全面評估中藥補腎解毒方對SIV/H1V的抑制效果,再以同樣評價指標(biāo)比較補腎解毒方組方藥效與組方中各有效部位單獨藥效;3.以M81... 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

補腎解毒方體外抑制艾滋病毒及對HIV感染細(xì)胞ITAMs/ITIMs通路的干預(yù)作用


圖2補腎解毒方各濃度組對正常CEMxl?74細(xì)胞作用情況??

補腎,合胞體,病毒,濃度


?80,?40,?20,?10?y?g/ml)濃度組對SIV誘導(dǎo)的CEMxl74細(xì)胞病變效應(yīng)有不同程度??的抑制作用,其中補腎解毒方(160,?80ug/m])濃度組無細(xì)胞病變出現(xiàn),與陽性藥相??說明其抑制SIV效果良好。詳見表2、圖1。???表2補腎解毒方各濃度在174細(xì)胞感染SIV模型中的CPE情況???-?m;情況?????U]U?S?L2?復(fù)孔?3??病毒對照組?+?+?+?+?■(?f++?.f+++??陽性藥對照組?-?-?-??復(fù)方?160ug/ml?-?-?-??復(fù)方?80ug/ml?-??復(fù)方?40?u?g/ml?+?+?+??復(fù)方?20ug/ml?+?+?+??復(fù)方?l〇yg/ml?++?++?+■+??復(fù)方5?u?g/ml?+?+?+?+++?t"f-f??13??

正態(tài)分布,補腎,相對量,細(xì)胞內(nèi)


2.?3.?2.?3中藥補腎解毒方各濃度對CEMxl74細(xì)胞感染SIV模型中SHRNA表達的??影響??結(jié)果如表3、圖3及圖4所示,各組間細(xì)胞內(nèi)SIVRNA相對量(lglO)符合正態(tài)分布,??采用單因素方差分析,各組間方差齊(Levene’?s=1.622,/M).?200>0.05),均值總??體比較有顯著性差異(F=13.?623,片0.?000<0.?05),兩兩比較使用LSD檢驗方法,與??病毒對照組比較,補腎解毒方160?ug/ml濃度組(片0.000<0.?01)、80?ug/ml濃度組??(/M).000<0.?01)、40yg/ml濃度組(盧0.001<〇.01)、20ug/ml濃度組(/M).001??<0.01)均具有統(tǒng)計學(xué)意義,且復(fù)方各濃度細(xì)胞內(nèi)SIVRNA表達具有一定的量效關(guān)系;??與陽性藥對照組比較,補腎解毒方160ug/ml濃度組(聲〇.728>0.05)、80ug/ml濃??度組(蘆0.?124>0.05)未見明顯差異。??各組間上清中病毒載量(lglO)符合正態(tài)分布


本文編號:2906348

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