MyD88非依賴性途徑在枸杞多糖影響T2DM小鼠炎癥因子生成過程中的作用
發(fā)布時(shí)間:2020-12-07 11:02
目的:慢性炎癥能夠?qū)е乱葝uβ細(xì)胞損傷,誘導(dǎo)胰島素分泌降低,同時(shí)干擾胰島素信號(hào)傳導(dǎo),誘導(dǎo)胰島素抵抗的發(fā)生,在2型糖尿。═2DM)的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。枸杞多糖(LBP)是枸杞提取物的主要活性成分之一。已有研究表明LBP除了具有降糖作用外,還可以降低T2DM患者體內(nèi)的炎癥因子水平,但是其抑炎降糖的作用機(jī)制還不清楚。本課題研究了My D88非依賴性途徑(又稱TRIF/TRAM途徑)在LBP影響T2DM炎癥因子生成過程中的作用,以探討LBP抑炎降糖的機(jī)制。方法:利用水煮醇沉法獲取LBP,并對(duì)其進(jìn)行表征。采用高脂飼料喂養(yǎng)My D88-/-小鼠(40只),鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)低劑量(80mg/kg)腹腔注射建立T2DM模型。將成模后的My D88-/-小鼠隨機(jī)分為模型組、二甲雙胍組(40mg/kg)以及低、中、高LBP組(20、40、80mg/kg),進(jìn)行為期3個(gè)月的干預(yù)。另取8只My D88-/-小鼠為正常對(duì)照組。干預(yù)過程中記錄所有小鼠的體重和血糖的變化。干預(yù)結(jié)束后,ELISA法檢測(cè)小鼠血清中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子ɑ(T...
【文章來源】:寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
枸杞多糖提的提取分離流程圖
文 第一章 材料與方法6圖 1 枸杞多糖提的提取分離流程圖2.2 苯酚-硫酸法測(cè)定總糖含量①標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制:稱取 105℃條件下干燥的 D-無水葡萄糖 0.1000g,置于 100mL 容量瓶中,加超純水溶解并稀釋至刻度線,搖勻使其完全溶解,待用。②樣品溶液的配制:稱取枸杞多糖(0.01g)放入 10mL 容量瓶用超純水定容并搖勻,再取 1mL 母液定容至 10ml 搖勻,即得到供試樣品溶液,待用。③5%苯酚溶液的配制:稱取重蒸餾苯酚 5g,加適量超純水溶解后,轉(zhuǎn)移至 100mL 容量瓶中定容搖勻,置于棕色試劑瓶保存待用。④制作標(biāo)準(zhǔn)曲線:分別吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL,加超純水至 1mL
為特征峰的 3336.85cm處有一個(gè)明顯的寬峰。在 2927.94cm處有一個(gè)強(qiáng)峰,此處H2的 C-H 伸縮振動(dòng)區(qū)。這些都是多糖結(jié)構(gòu)的特征吸收峰。另外,在 1637.56cm-1和.61cm-1范圍內(nèi)的峰可由 C=O(-NH2COHN3-)的變角振動(dòng)引起。1247.94cm-1處特征雙峰為酮的 C-O-C 結(jié)構(gòu)的伸縮振動(dòng)引起。1151.50cm-1處的尖峰是由 C-O(-COOH C-N 結(jié)構(gòu)的伸縮振動(dòng)引起的。1078.21cm-1處的尖峰由不對(duì)稱吡喃糖 C-O-C 振動(dòng)引1028.06cm-1處的吸收峰為糖苷環(huán)的特征吸收峰,表明 LBP 樣品中存在吡喃糖基。 LBP 樣品在 921.97cm-1處的峰,可以推測(cè) LBP 中鼠李糖末端(-CH2-)在脫氧核苷糖位置。775.38cm-1處為吡喃環(huán)對(duì)稱伸縮振動(dòng)引起的特征峰。酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸是蛋白質(zhì)中的常見成分。它們?cè)诟鞣N蛋白質(zhì)中含量相似最大吸收峰在 280nm 處,所以紫外吸收法也常用來進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)。采用紫外吸收測(cè) LBP 樣品在 200-550nm 范圍內(nèi)的吸收峰發(fā)現(xiàn),在 280nm 處出現(xiàn)一個(gè)吸收峰(圖說明獲得的 LBP 樣品為蛋白質(zhì)多糖。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]枸杞多糖對(duì)免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-10和IL-12/IL23 p40分泌水平的影響[J]. 白學(xué)鵬,孫鵬,沈春秀,楊榮敏,王昀昕,王佩,李家興,蘇春霞. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2019(07)
[2]二甲雙胍對(duì)2型糖尿病大鼠骨骼肌Toll樣受體/髓樣分化因子88信號(hào)通路的影響及機(jī)制[J]. 馬芳菲,李婷,單夢(mèng)婷,田晨光,呂晨燕,高迎. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2018(08)
[3]三黃湯通過抑制脂肪組織間巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)及炎癥因子表達(dá)改善肥胖小鼠的胰島素抵抗[J]. 趙娟,葉麗芳,梁舒,張顥,于希忠,尚文斌. 南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(04)
[4]高脂低糖和高脂高糖飼料建立糖耐量受損大鼠模型[J]. 陳珊珊,梁芳芳,王泓午,竇昊穎. 中國老年學(xué)雜志. 2018(08)
[5]枸杞多糖對(duì)糖尿病性白內(nèi)障大鼠晶狀體上皮細(xì)胞熱休克蛋白27表達(dá)及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響[J]. 劉求紅,張梅珍,余楊桂,俞曉藝,劉紅,程娟娟. 中國臨床藥理學(xué)雜志. 2018(07)
[6]MyD88非依賴性信號(hào)通路在枸杞多糖抑制糖尿病小鼠腫瘤壞死因子α中的作用[J]. 劉婷婷,王凌霄,楊曉輝,姚智卿,蔡慧珍. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(01)
[7]二甲雙胍在2型糖尿病中的臨床應(yīng)用[J]. 李融融,肖新華. 中國研究型醫(yī)院. 2018(01)
[8]腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6在NF-κB炎癥通路中的研究進(jìn)展[J]. 張群燕,郭郡浩,蔡輝. 東南國防醫(yī)藥. 2017(04)
[9]枸杞多糖作用于2型糖尿病大鼠的血清代謝組學(xué)研究[J]. 唐華麗,夏惠,王鋒,孫桂菊. 食品科學(xué). 2017(13)
[10]RNA干擾技術(shù)沉默TRAF6對(duì)脂多糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化及炎癥因子表達(dá)的影響[J]. 劉明龍,梁耀軍,李侃,楊洋,馬占軍,吳蓉,王鳳麗. 蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(03)
博士論文
[1]MyD88在特定細(xì)胞型中對(duì)肥胖相關(guān)炎癥疾病進(jìn)展的作用[D]. 虞敏佳.浙江大學(xué) 2013
[2]糖尿病人群及高脂飲食肥胖小鼠的免疫代謝學(xué)研究[D]. 向宇飛.中南大學(xué) 2011
碩士論文
[1]2型糖尿病胰島素抵抗與IL-6、IL-8、TNF-α及T細(xì)胞亞群變化的相關(guān)性研究[D]. 孫曉琳.青島大學(xué) 2018
[2]枸杞多糖的分離提取及質(zhì)量鑒定研究[D]. 符夢(mèng)凡.浙江大學(xué) 2018
[3]2型糖尿病患者血漿TG和LDL水平對(duì)胰島α及β細(xì)胞功能的影響[D]. 許軍華.天津醫(yī)科大學(xué) 2016
本文編號(hào):2903135
【文章來源】:寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
枸杞多糖提的提取分離流程圖
文 第一章 材料與方法6圖 1 枸杞多糖提的提取分離流程圖2.2 苯酚-硫酸法測(cè)定總糖含量①標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制:稱取 105℃條件下干燥的 D-無水葡萄糖 0.1000g,置于 100mL 容量瓶中,加超純水溶解并稀釋至刻度線,搖勻使其完全溶解,待用。②樣品溶液的配制:稱取枸杞多糖(0.01g)放入 10mL 容量瓶用超純水定容并搖勻,再取 1mL 母液定容至 10ml 搖勻,即得到供試樣品溶液,待用。③5%苯酚溶液的配制:稱取重蒸餾苯酚 5g,加適量超純水溶解后,轉(zhuǎn)移至 100mL 容量瓶中定容搖勻,置于棕色試劑瓶保存待用。④制作標(biāo)準(zhǔn)曲線:分別吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL,加超純水至 1mL
為特征峰的 3336.85cm處有一個(gè)明顯的寬峰。在 2927.94cm處有一個(gè)強(qiáng)峰,此處H2的 C-H 伸縮振動(dòng)區(qū)。這些都是多糖結(jié)構(gòu)的特征吸收峰。另外,在 1637.56cm-1和.61cm-1范圍內(nèi)的峰可由 C=O(-NH2COHN3-)的變角振動(dòng)引起。1247.94cm-1處特征雙峰為酮的 C-O-C 結(jié)構(gòu)的伸縮振動(dòng)引起。1151.50cm-1處的尖峰是由 C-O(-COOH C-N 結(jié)構(gòu)的伸縮振動(dòng)引起的。1078.21cm-1處的尖峰由不對(duì)稱吡喃糖 C-O-C 振動(dòng)引1028.06cm-1處的吸收峰為糖苷環(huán)的特征吸收峰,表明 LBP 樣品中存在吡喃糖基。 LBP 樣品在 921.97cm-1處的峰,可以推測(cè) LBP 中鼠李糖末端(-CH2-)在脫氧核苷糖位置。775.38cm-1處為吡喃環(huán)對(duì)稱伸縮振動(dòng)引起的特征峰。酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸是蛋白質(zhì)中的常見成分。它們?cè)诟鞣N蛋白質(zhì)中含量相似最大吸收峰在 280nm 處,所以紫外吸收法也常用來進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)。采用紫外吸收測(cè) LBP 樣品在 200-550nm 范圍內(nèi)的吸收峰發(fā)現(xiàn),在 280nm 處出現(xiàn)一個(gè)吸收峰(圖說明獲得的 LBP 樣品為蛋白質(zhì)多糖。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]枸杞多糖對(duì)免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-10和IL-12/IL23 p40分泌水平的影響[J]. 白學(xué)鵬,孫鵬,沈春秀,楊榮敏,王昀昕,王佩,李家興,蘇春霞. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2019(07)
[2]二甲雙胍對(duì)2型糖尿病大鼠骨骼肌Toll樣受體/髓樣分化因子88信號(hào)通路的影響及機(jī)制[J]. 馬芳菲,李婷,單夢(mèng)婷,田晨光,呂晨燕,高迎. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2018(08)
[3]三黃湯通過抑制脂肪組織間巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)及炎癥因子表達(dá)改善肥胖小鼠的胰島素抵抗[J]. 趙娟,葉麗芳,梁舒,張顥,于希忠,尚文斌. 南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(04)
[4]高脂低糖和高脂高糖飼料建立糖耐量受損大鼠模型[J]. 陳珊珊,梁芳芳,王泓午,竇昊穎. 中國老年學(xué)雜志. 2018(08)
[5]枸杞多糖對(duì)糖尿病性白內(nèi)障大鼠晶狀體上皮細(xì)胞熱休克蛋白27表達(dá)及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響[J]. 劉求紅,張梅珍,余楊桂,俞曉藝,劉紅,程娟娟. 中國臨床藥理學(xué)雜志. 2018(07)
[6]MyD88非依賴性信號(hào)通路在枸杞多糖抑制糖尿病小鼠腫瘤壞死因子α中的作用[J]. 劉婷婷,王凌霄,楊曉輝,姚智卿,蔡慧珍. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(01)
[7]二甲雙胍在2型糖尿病中的臨床應(yīng)用[J]. 李融融,肖新華. 中國研究型醫(yī)院. 2018(01)
[8]腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6在NF-κB炎癥通路中的研究進(jìn)展[J]. 張群燕,郭郡浩,蔡輝. 東南國防醫(yī)藥. 2017(04)
[9]枸杞多糖作用于2型糖尿病大鼠的血清代謝組學(xué)研究[J]. 唐華麗,夏惠,王鋒,孫桂菊. 食品科學(xué). 2017(13)
[10]RNA干擾技術(shù)沉默TRAF6對(duì)脂多糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化及炎癥因子表達(dá)的影響[J]. 劉明龍,梁耀軍,李侃,楊洋,馬占軍,吳蓉,王鳳麗. 蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(03)
博士論文
[1]MyD88在特定細(xì)胞型中對(duì)肥胖相關(guān)炎癥疾病進(jìn)展的作用[D]. 虞敏佳.浙江大學(xué) 2013
[2]糖尿病人群及高脂飲食肥胖小鼠的免疫代謝學(xué)研究[D]. 向宇飛.中南大學(xué) 2011
碩士論文
[1]2型糖尿病胰島素抵抗與IL-6、IL-8、TNF-α及T細(xì)胞亞群變化的相關(guān)性研究[D]. 孫曉琳.青島大學(xué) 2018
[2]枸杞多糖的分離提取及質(zhì)量鑒定研究[D]. 符夢(mèng)凡.浙江大學(xué) 2018
[3]2型糖尿病患者血漿TG和LDL水平對(duì)胰島α及β細(xì)胞功能的影響[D]. 許軍華.天津醫(yī)科大學(xué) 2016
本文編號(hào):2903135
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