和厚樸酚抑制白色念珠菌的作用機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 21:55
近年來,由于抗生素的濫用,癌癥治療時(shí)放療和化療的使用,導(dǎo)管等器械對人體的應(yīng)用等,以白色念珠菌(Candida albicans)為主的真菌感染患病人數(shù),及由此引發(fā)的系統(tǒng)性感染的死亡人數(shù)不斷升高。臨床上使用的傳統(tǒng)抗真菌藥物以唑類、多烯類和棘白菌素類等抗生素為主,因?yàn)閷θ梭w的毒性大,且真菌易對其產(chǎn)生耐藥,所以從天然產(chǎn)物中找尋新的抗真菌藥物成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。傳統(tǒng)中藥作為中華民族的瑰寶,有幾千年應(yīng)用的歷史,具有作用位點(diǎn)多樣、毒性低和不易產(chǎn)生耐藥等優(yōu)點(diǎn),是一個(gè)理想的抗真菌藥物的來源。和厚樸酚(honokiol)是我國傳統(tǒng)中藥厚樸的有效成分之一,具有抗菌、抗炎、抗腫瘤、肌肉松弛和抗氧化等廣泛的藥理作用。已有的研究證明了和厚樸酚對白色念珠菌有較強(qiáng)的抑制作用,但具體的作用機(jī)制還不清楚。本文以白色念珠菌ATCC 10231為供試菌株,研究了和厚樸酚對其的抑制作用及具體的作用機(jī)制,結(jié)果如下:(1)和厚樸酚有廣譜的抗菌活性,對白色念珠菌、革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌均有抑制作用;(2)和厚樸酚對白色念珠菌的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度分別為16μg/m L和64μg/m L;(3)和厚樸酚對白色念珠菌的細(xì)...
【文章來源】:遼寧師范大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
和厚樸酚的結(jié)構(gòu)式Fig.1.1Theconstitutionalformulaofhonokiol
圖 2.1 和厚樸酚對白色念珠菌的時(shí)間-殺菌曲線Fig. 2.1 The time-kill curve of honokiol against Candida albican2.4 小結(jié)本實(shí)驗(yàn)通過濾紙片法證明了和厚樸酚對白色念珠菌和 7 種細(xì)菌都有抑制作用。提和厚樸酚具有廣譜抑菌活性。其中,對白色念珠菌的抑制作用最好,其次為金黃色葡球菌等革蘭氏陽性菌,而對大腸桿菌等革蘭氏陰性菌的抑制作用略差。通過微量稀釋法測定了和厚樸酚對白色念珠菌的 MIC80和 MFC,分別為 16 μg/mL 和 64 μg/mL。時(shí)間殺菌曲線顯示,16 μg/mL 的和厚樸酚對白色念珠菌只有抑制作用,而不能完全殺死菌體而 64 μg/mL 的和厚樸酚作用 2 h 后,即可殺菌體。
圖 3.1 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 3.1 Protein standard curve3.3 和厚樸酚對白色念珠菌麥角甾醇影響的測定為了檢測和厚樸酚對真菌細(xì)胞膜固醇類的影響,參照[67]的方法,在培養(yǎng)基中加醇進(jìn)行測定。制備麥角甾醇母液:將麥角甾醇單體晶體用研缽研磨成粉末狀,稱取 40 mg 的粉末,用 0.5 mL DMSO 溶解,再將其溶解在 1 mL 的吐溫 80(Tween 80)中勻的、顆粒細(xì)小的乳濁液,將其加入到 100 mL RPMI 1640 培養(yǎng)液中,過濾除。 按 2.3.2 的方法測定培養(yǎng)基中加入麥角甾醇后,和厚樸酚對白色念珠菌的 M性霉素 B 作為陽性對照,用培養(yǎng)液中不加麥角甾醇的實(shí)驗(yàn)組為陰性對照。.4 DCFH-DA 染色法檢測和厚樸酚對白色念珠菌活性氧積累的影響采用 DCFH-DA 染色法測定和厚樸酚對白色念珠菌細(xì)胞內(nèi)活性氧積累影響1.2 的方法活化白色念珠菌菌株后,用 YEPD 培養(yǎng)液調(diào)整菌液濃度至 5×106CFU活性氧檢測試劑盒的說明,用 PBS 按 1:1000 稀釋 DCFH-DA,使 DCFH-DA 終
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]唑類抗真菌藥物耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉瀟,龍騰騰,郭春麗. 廣東醫(yī)學(xué). 2016(08)
[2]和厚樸酚抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌生物被膜形成[J]. 喬瑞紅,謝鯤鵬,謝明杰. 微生物學(xué)報(bào). 2016(08)
[3]白假絲酵母菌臨床菌株對氟康唑耐藥性及其與CAP1基因相關(guān)性研究[J]. 談潘莉,汪浙炯,趙金方. 中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2015(04)
[4]和厚樸酚對HL-60細(xì)胞增殖抑制作用及其相關(guān)機(jī)制研究[J]. 范佳鑫,曾英堅(jiān),翁光樣,吳建偉,李章球,李元明,鄭榮,郭坤元. 中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2014(06)
[5]和厚樸酚對哮喘小鼠氣道重構(gòu)及VEGF表達(dá)水平干預(yù)作用的研究[J]. 滕鴻,胡敏,劉躍建. 中醫(yī)臨床研究. 2014(27)
[6]超臨界流體色譜同時(shí)測定厚樸中厚樸酚和和厚樸酚(英文)[J]. 鄧亮,郭亞東,楊敏,沈志強(qiáng),徐文秀. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2013(12)
[7]白色念珠菌致病機(jī)制及治療研究進(jìn)展[J]. 楊豐帥,周厚吾. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2013(22)
[8]和厚樸酚對人肝癌HepG2細(xì)胞增殖及NF-kB mRNA表達(dá)的影響[J]. 張玉碧,張輝,呂林華,賀小平. 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(12)
[9]和厚樸酚抑制CFP-10、ESAT-6誘導(dǎo)的人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞炎癥因子表達(dá)[J]. 沈穎,王葉萍,程林芳,姚航平. 浙江醫(yī)學(xué). 2012 (08)
[10]和厚樸酚通過抑制腦MPTP開放和調(diào)節(jié)PARP-1活性保護(hù)全腦缺血的作用研究[J]. 楊爽,劉曉巖,胡振宇,陳世忠,王銀葉. 中國藥理學(xué)通報(bào). 2012(02)
本文編號:2900156
【文章來源】:遼寧師范大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
和厚樸酚的結(jié)構(gòu)式Fig.1.1Theconstitutionalformulaofhonokiol
圖 2.1 和厚樸酚對白色念珠菌的時(shí)間-殺菌曲線Fig. 2.1 The time-kill curve of honokiol against Candida albican2.4 小結(jié)本實(shí)驗(yàn)通過濾紙片法證明了和厚樸酚對白色念珠菌和 7 種細(xì)菌都有抑制作用。提和厚樸酚具有廣譜抑菌活性。其中,對白色念珠菌的抑制作用最好,其次為金黃色葡球菌等革蘭氏陽性菌,而對大腸桿菌等革蘭氏陰性菌的抑制作用略差。通過微量稀釋法測定了和厚樸酚對白色念珠菌的 MIC80和 MFC,分別為 16 μg/mL 和 64 μg/mL。時(shí)間殺菌曲線顯示,16 μg/mL 的和厚樸酚對白色念珠菌只有抑制作用,而不能完全殺死菌體而 64 μg/mL 的和厚樸酚作用 2 h 后,即可殺菌體。
圖 3.1 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 3.1 Protein standard curve3.3 和厚樸酚對白色念珠菌麥角甾醇影響的測定為了檢測和厚樸酚對真菌細(xì)胞膜固醇類的影響,參照[67]的方法,在培養(yǎng)基中加醇進(jìn)行測定。制備麥角甾醇母液:將麥角甾醇單體晶體用研缽研磨成粉末狀,稱取 40 mg 的粉末,用 0.5 mL DMSO 溶解,再將其溶解在 1 mL 的吐溫 80(Tween 80)中勻的、顆粒細(xì)小的乳濁液,將其加入到 100 mL RPMI 1640 培養(yǎng)液中,過濾除。 按 2.3.2 的方法測定培養(yǎng)基中加入麥角甾醇后,和厚樸酚對白色念珠菌的 M性霉素 B 作為陽性對照,用培養(yǎng)液中不加麥角甾醇的實(shí)驗(yàn)組為陰性對照。.4 DCFH-DA 染色法檢測和厚樸酚對白色念珠菌活性氧積累的影響采用 DCFH-DA 染色法測定和厚樸酚對白色念珠菌細(xì)胞內(nèi)活性氧積累影響1.2 的方法活化白色念珠菌菌株后,用 YEPD 培養(yǎng)液調(diào)整菌液濃度至 5×106CFU活性氧檢測試劑盒的說明,用 PBS 按 1:1000 稀釋 DCFH-DA,使 DCFH-DA 終
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]唑類抗真菌藥物耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉瀟,龍騰騰,郭春麗. 廣東醫(yī)學(xué). 2016(08)
[2]和厚樸酚抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌生物被膜形成[J]. 喬瑞紅,謝鯤鵬,謝明杰. 微生物學(xué)報(bào). 2016(08)
[3]白假絲酵母菌臨床菌株對氟康唑耐藥性及其與CAP1基因相關(guān)性研究[J]. 談潘莉,汪浙炯,趙金方. 中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2015(04)
[4]和厚樸酚對HL-60細(xì)胞增殖抑制作用及其相關(guān)機(jī)制研究[J]. 范佳鑫,曾英堅(jiān),翁光樣,吳建偉,李章球,李元明,鄭榮,郭坤元. 中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2014(06)
[5]和厚樸酚對哮喘小鼠氣道重構(gòu)及VEGF表達(dá)水平干預(yù)作用的研究[J]. 滕鴻,胡敏,劉躍建. 中醫(yī)臨床研究. 2014(27)
[6]超臨界流體色譜同時(shí)測定厚樸中厚樸酚和和厚樸酚(英文)[J]. 鄧亮,郭亞東,楊敏,沈志強(qiáng),徐文秀. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2013(12)
[7]白色念珠菌致病機(jī)制及治療研究進(jìn)展[J]. 楊豐帥,周厚吾. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2013(22)
[8]和厚樸酚對人肝癌HepG2細(xì)胞增殖及NF-kB mRNA表達(dá)的影響[J]. 張玉碧,張輝,呂林華,賀小平. 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(12)
[9]和厚樸酚抑制CFP-10、ESAT-6誘導(dǎo)的人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞炎癥因子表達(dá)[J]. 沈穎,王葉萍,程林芳,姚航平. 浙江醫(yī)學(xué). 2012 (08)
[10]和厚樸酚通過抑制腦MPTP開放和調(diào)節(jié)PARP-1活性保護(hù)全腦缺血的作用研究[J]. 楊爽,劉曉巖,胡振宇,陳世忠,王銀葉. 中國藥理學(xué)通報(bào). 2012(02)
本文編號:2900156
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