[目的]篩選和評價靈芝屬多糖對腎上腺酮(CORT)誘導(dǎo)神經(jīng)損傷的保護(hù)作用,為靈芝在抗抑郁功能方面的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。[方法]以CORT誘發(fā)神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生損傷后給予靈芝屬多糖提取物,分別通過MTT法、乳酸脫氫酶(LDH)胞外釋放法、總DNA定量分析法以及熒光標(biāo)記法確定細(xì)胞毒性以及對損傷細(xì)胞的保護(hù)作用。[結(jié)果]結(jié)果顯示靈芝屬多糖在低作用濃度下對PC12細(xì)胞不具有毒性,在100μg/mL的作用濃度下靈芝孢子粉多糖(PGL)可以顯著提高損傷細(xì)胞存活率的比例為22%,減少LDH的釋放比例為11.08%,增加胞內(nèi)總DNA含量14.65%,是所有待測多糖中作用最佳的。[結(jié)論]PGL對細(xì)胞具有低毒的特點(diǎn),顯著改善CORT對細(xì)胞的損傷作用,具有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用,可作為抗抑郁藥物進(jìn)行研究和開發(fā)。 

【文章來源】：生物技術(shù). 2020年03期 第269-274頁

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

靈芝屬多糖提取物的細(xì)胞毒性檢測

通過檢測受損神經(jīng)細(xì)胞胞外乳酸脫氫酶(LDH)的活性也可以體現(xiàn)靈芝屬多糖的保護(hù)作用。其結(jié)果與細(xì)胞存活(MTT)檢測結(jié)果相一致。與對照組相比較CORT可以顯著增加LDH的胞外釋放，釋放率為22.29%(圖3)，說明CORT能夠使細(xì)胞發(fā)生裂解，導(dǎo)致胞內(nèi)LDH的流出。靈芝屬多糖可以保護(hù)細(xì)胞的完整性，減少LDH的向外釋放，其中PGL的效果最顯著，可以使釋放率降低到11.21%，接近于正常對照組的釋放量。其次PLE、PLU和PSI處理組的釋放量分別為12.89%、15.96%和16.36%。結(jié)果證明靈芝屬多糖對神經(jīng)損傷細(xì)胞具有顯著的保護(hù)作用。圖3 靈芝屬多糖提取物減少LDH釋放的保護(hù)作用

圖2 靈芝屬多糖提取物對損傷神經(jīng)的保護(hù)作用為了進(jìn)一步證明靈芝屬多糖的神經(jīng)保護(hù)作用，定量檢測細(xì)胞中總DNA的含量可以直觀地反映出細(xì)胞的數(shù)量。熒光燃料標(biāo)記DNA，通過熒光強(qiáng)度可以定量的地分析完整DNA的含量從而反映活細(xì)胞的數(shù)量�？侱NA檢測結(jié)果如圖4所示，從結(jié)果中可以發(fā)現(xiàn)CORT可以使細(xì)胞內(nèi)DNA的數(shù)量明顯下降，僅為對照組的86.57%，與模型組相比較PGL和PLE處理組可以提高受損細(xì)胞的存活，保持細(xì)胞DNA的結(jié)構(gòu)，總DNA的含量分別可以提高14.65%和6.8%，而PSI和PLU的處理組雖然可以提高總DNA的含量，但是提升效果與模型對照組未達(dá)到顯著性差異的程度。定量分析結(jié)果說明PGL和PLE的效果優(yōu)于PSI和PLU。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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